The invention relates to the field of Western blot technology, in particular to a double diaphragm protein blot hybridization instrument and an experimental operation method. The instrument comprises a shell, a transmission positioning device, a rocking bed device and a hybrid slot group, and the PVDF diaphragm completed by the transfer film is immersed in a closed liquid slot in a hybrid slot group by a transmission positioning device. Anti hybridization tank, elution tank, two anti hybrid tank and elution tank were used to complete the hybridization process. By using the above scheme, the double diaphragm protein blot hybrid apparatus provided by the invention focuses on the tedious hybridization process in the experiment of Western blot hybridization. Its instrument structure is simple, the experimental operation is convenient, the work intensity of the experimenters is lighten, and the cost of the experiment is reduced.
【技术实现步骤摘要】
双膜片蛋白质印迹杂交仪及其实验操作方法
本专利技术涉及蛋白印迹
,具体涉及一种双膜片蛋白质印迹杂交仪及其实验操作方法。
技术介绍
蛋白质印迹杂交(Westernblot)是生物学实验中最为常用的技术之一,实验操作过程包括蛋白电泳、蛋白转膜、杂交、染色。蛋白电泳是将混合蛋白进行分离的过程;转膜是将分离好的蛋白质转移到作为固相支持体的PVDF膜(即聚偏二氟乙烯膜)上,便于后续进行杂交的过程;杂交是指用抗体和靶蛋白(抗原)发生特异性结合从而对其进行进一步鉴定的过程;染色是在抗体-抗原杂交后对其通过化学发光或化学染色进行鉴定的过程。其中蛋白质杂交的过程可以细分为封闭、杂交孵育和洗脱三步,即将电泳转膜后的PVDF膜(即聚偏二氟乙烯膜)置于含脱脂奶粉或牛血清白蛋白(BSA)的封闭液中,慢速摇动封闭,持续时间40-60分钟;之后在含第一抗体的一抗孵育液中慢速摇动进行一抗孵育,持续时间60分钟;然后用洗脱液快速摇动洗脱3次,每次5-10分钟;再然后在含第二抗体的二抗孵育液中慢速摇动进行二抗孵育,持续时间40分钟;最后用洗脱液快速摇动洗脱3次,每次5-10分钟,得到符合要求的 ...
【技术保护点】
1.一种双膜片蛋白质印迹杂交仪,其特征在于,包括:壳体、传送定位装置、摇床装置和杂交槽组;所述壳体包括:水平设置的底壳体以及一体设置在底壳体后部并垂直向上延伸的立壳体,所述立壳体的后部为敞口,并在所述敞口上设置一个可拆卸的背板;所述传送定位装置包括:传送机构和安装在传送机构上的横梁,所述横梁水平向前延伸并突出于所述立壳体的前表面,所述传送机构安装在所述背板的前板面上,并通过第一电机驱动所述横梁作横向移动,通过第二电机驱动所述横梁作纵向移动的,所述横梁的前部安装有膜片夹;所述摇床装置包括:摇床机构和安装在摇床机构上部的槽架,所述摇床机构固定安装在所述底壳体的底部,驱动所述槽架 ...
【技术特征摘要】
1.一种双膜片蛋白质印迹杂交仪,其特征在于,包括:壳体、传送定位装置、摇床装置和杂交槽组;所述壳体包括:水平设置的底壳体以及一体设置在底壳体后部并垂直向上延伸的立壳体,所述立壳体的后部为敞口,并在所述敞口上设置一个可拆卸的背板;所述传送定位装置包括:传送机构和安装在传送机构上的横梁,所述横梁水平向前延伸并突出于所述立壳体的前表面,所述传送机构安装在所述背板的前板面上,并通过第一电机驱动所述横梁作横向移动,通过第二电机驱动所述横梁作纵向移动的,所述横梁的前部安装有膜片夹;所述摇床装置包括:摇床机构和安装在摇床机构上部的槽架,所述摇床机构固定安装在所述底壳体的底部,驱动所述槽架震动摇摆,所述槽架突出于所述底壳体的上表面;所述杂交槽组垂直、可拆卸的安装在所述槽架上,包括:十一个独立的槽体,十一个所述槽体成排布置:第一排设置一个用于盛装封闭液的封闭液槽;第二排并排设置两个用于盛装一抗孵育液的一抗杂交槽,且两个所述一抗杂交槽的长度之和与所述封闭液槽的长度相等;第三排、第四排和第五排各设置一个长度与所述封闭液槽相同的洗脱槽,用以盛装洗脱液;第六排并排设置两个用于盛装二抗孵育液的二抗杂交槽,且两个所述二抗杂交槽的长度之和与所述封闭液槽的长度相等;第七排、第八排和第九排各设置一个与所述封液闭槽长度相同的洗脱槽,用以盛装洗脱液。2.根据权利要求1所述的双膜片蛋白质印迹杂交仪,其特征在于,还包括:控制装置,所述控制装置包括:PLC控制器以及与PLC控制器电连接的输入装置、显示屏和步进驱动器,所述输入装置和显示屏设置在所述底壳体的前端面上,所述PLC控制器和步进驱动器安装在所述底壳体内,并将所述第一电机和第二电机与所述步进驱动器电连接,所述摇床机构与所述PLC控制器电连接。3.根据权利要求1所述的双膜片蛋白质印迹杂交仪,其特征在于,所述传送机构包括:纵向设置的桥板、滑动穿插在桥板上部的上导向杆和滑动穿插在桥板下部的下导向杆;所述上导向杆和下导向杆平行、水平地固定在所述背板的前板面上,并在上导向杆和下导向杆之间的背板上水平设置一个横向传送带,所述横向传送带的一边与所述桥板的后部连接;所述第一电机与横向传送带的一端驱动连接,驱动所述横向传动带带动桥板在上导向杆和下导向杆上作水平滑动;所述横梁的后端部滑动安装在所述桥板上,并在所述桥板的前端面上铅垂设置一个纵向传送带,所述纵向传送带的一边与所述横梁连接,所述第二电机与纵向传送带的一端驱动连接,驱动所述纵向传动带带动横...
【专利技术属性】
技术研发人员:王宇,李郁,郁国宏,
申请(专利权)人:兰州奥润环保设备有限公司,
类型:发明
国别省市:甘肃,62
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