一种SD大鼠临床检验方法技术

本发明专利技术提供了一种新的SD大鼠临床检验方法，对进行长期毒性试验的SD大鼠进行临床检验，该检验方法稳定有效，通过观察供试品对实验动物产生的毒性反应及其严重程度、主要毒性靶器官及损害的可逆程度，可有效的提供无毒性反应剂量，为临床设计人用剂量和主要观察指标提供参考。

A clinical test method for SD rats

The invention provides a new method of clinical test for SD rats, and the clinical test of SD rats for long-term toxicity test. The test method is stable and effective. By observing the toxicity and severity of the test animal, the degree of the main toxic target organs and the reversibility of the damage can be effectively provided. The dosage of sex reaction provides reference for clinical design of human dosage and main observation indexes.

【技术实现步骤摘要】
一种SD大鼠临床检验方法
本专利技术涉及医药领域，特别涉及一种SD大鼠临床检验方法。
技术介绍
毒性试验为给实验动物进行不同途径、不同期限的染毒、检测各种毒性终点的实验，其目的是确定无害作用水平、毒性类型、靶器官、剂量-反应关系，为安全性评价或危险性评价提供重要的资料。长期毒性试验为在急性毒性试验结果的基础上，观察评价动物反复给予受试物后，机体产生毒性反应的特征及其毒性损害的严重程度，以及主要毒性靶器官及其损害的可逆性。受试物长期毒性试验的目的是提供受试物的无毒性反应剂量和临床主要检测指标，为制定人用安全剂量提供参考资料。一种好的长期毒性试验方法，可推动毒性试验方法的统一和规范化，获得符合管理部门所需毒性资料。
技术实现思路
为此，专利技术人提供一种适合长期毒性研究的SD大鼠临床检验方法。为实现上述目的，专利技术人提供了一种SD大鼠临床检验方法，包括以下步骤：SD大鼠给药试验结束后，SD大鼠禁食12～16小时后灌胃2％的戊巴比妥钠生理盐水溶液进行麻醉，从心脏采血完毕后处死后进行解剖；检测血液、血清的生化指标并对解剖后的器官或组织进行称重和病理组织学检查。进一步地，所述血液生化指标包括红细胞计数、血红蛋白定量、红细胞比积、血小板计数、白细胞计数、中性粒细胞定量、淋巴细胞定量、单核细胞定量、嗜酸性粒细胞定量、网织红细胞计数。进一步地，所述血清生化指标包括丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、尿素、肌酐、总蛋白、白蛋白、葡萄糖、总胆固醇、甘油三脂。进一步地，所述SD大鼠进行称量重量的组织器官包括：心脏、肝脏、脾脏、肺、肾脏、脑、肾上腺、睾丸、卵巢。进一步地，所述SD大鼠进行病理组织学检查的组织器官包括：脑、心脏、肺、肝脏、肾脏、脾脏、胃、小肠、大肠、睾丸、卵巢、肾上腺。进一步地，所述病理组织学检查包括以下步骤：将组织器官进行固定，固定后的组织经修块取材，逐级酒精脱水石蜡包埋轮转式切片，经苏木素-伊红染色，光镜下进行检查。进一步地，所述HE染色步骤包括：将病理切片置于65℃烘箱中5min,将切片置于二甲苯中两次进行脱蜡，酒精梯度脱去二甲苯。苏木素染色6min,清水冲洗2min后，梯度乙醇依次脱水，伊红染色2min,无水乙醇浸泡3min后再置于二甲苯中浸泡3min,中性树胶封片。进一步地，进行临床检验的SD大鼠毒性培育方式包括：给药方式为连续灌胃，其中健康SD大鼠按体重随机分为4组：溶媒对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组，每组数量相同，雌雄各半；低、中、高剂量组给药剂量分别为500、1500、4500mg/kg大鼠，溶媒对照组灌胃0.2％CMC-Na，给药容量均为10ml/kg大鼠；所述溶媒由CMC-Na用去离子水配置，为质量百分比为0.2％的CMC-Na溶液；所述低剂量组、中剂量组、高剂量组，为溶媒溶解待检测药剂，配置浓度分别为50mg/ml、150mg/ml、450mg/ml。区别于现有技术，上述技术方案提供了一种新的SD大鼠临床检验方法，对进行长期毒性试验的SD大鼠进行临床检验，该检验方法稳定有效，通过观察供试品对实验动物产生的毒性反应及其严重程度、主要毒性靶器官及损害的可逆程度，可有效的提供无毒性反应剂量，为临床设计人用剂量和主要观察指标提供参考。附图说明：图1胜培元灌胃雌性大鼠体重的变化,图2胜培元灌胃雄性大鼠体重的变化,图3胜培元灌胃雌性大鼠食量的变化,图4胜培元灌胃雄性大鼠食量的变化,图5胜培元灌胃雌性大鼠血常规的变化,图6胜培元灌胃雄性大鼠血常规的变化,图7胜培元灌胃雌性大鼠血生化的变化,图8胜培元灌胃雄性大鼠血生化的变化,图9胜培元灌胃雌性大鼠主要脏器的绝对重量的变化,图10胜培元灌胃雄性大鼠主要脏器的绝对重量的变化,图11胜培元灌胃雌性大鼠主要脏器的相对重量的变化,图12胜培元灌胃雄性大鼠主要脏器的相对重量的变化，图13胜培元灌胃给药对SD大鼠30天毒性实验肝脏组织图片，图14胜培元灌胃给药对SD大鼠30天毒性实验睾丸组织图片，图15胜培元灌胃给药对SD大鼠30天毒性实验卵巢组织图片，图16胜培元灌胃给药对SD大鼠30天毒性实验肾上腺组织图片，图17胜培元灌胃给药对SD大鼠30天毒性实验肾脏组织图片，图18胜培元灌胃给药对SD大鼠30天毒性实验肺组织图片，图19胜培元灌胃给药对SD大鼠30天毒性实验小肠组织图片，图20胜培元灌胃给药对SD大鼠30天毒性实验大肠组织图片，图21胜培元灌胃给药对SD大鼠30天毒性实验脑组织图片，图22胜培元灌胃给药对SD大鼠30天毒性实验脾组织图片，图23胜培元灌胃给药对SD大鼠30天毒性实验心脏组织图片。具体实施方式为详细说明技术方案的
技术实现思路
、构造特征、所实现目的及效果，以下结合具体实施例并配合附图详予说明。本实施方式中用于试验的产品为甘诺宝力牌胜培元胶囊(以下简称“胜培元”)。实施例：用胜培元进行30天毒性试验的SD大鼠进行临床检验1、供试品：胜培元，胶囊(450mg/粒)2溶媒2.1溶媒名称：CMC-Na性状：类白色粉末批号：B326BA0713有效期：开封后3年有效(开封时间：2016年04月20日)提供单位：上海生物工程股份有限公司；保存：2～8℃保存；配制方法：用去离子水配制成0.2％CMC-Na溶液。2.2供试品配制方法用溶媒配制成所需浓度2.3剩余供试品的处理对于没有开封的供试品全部返还委托方；已经开封配制使用后剩余的供试品进行废弃处理，并进行登记，由实验动物中心统一处理。2.4主要试剂名称：戊巴比妥钠；性状：棕黄色粉末；有效期：开封后3年有效(开封日期：2015.05.25)；提供单位：Bio-L灌胃HTBIOTECH；保存：室温保存；配制方法：用0.9％氯化钠配制成0.2％的戊巴比妥钠生理盐水溶液。3试验动物3.1试验系统及选择理由SD大鼠国内外背景资料丰富，动物供应充足；3.2种系、质量SD大鼠，普通级；3.3来源由上海西普尔-必凯实验动物有限公司提供；3.4实验动物资料实验动物质量合格证号：2008001660398，序号：024811，由上海西普尔-必凯试验动物有限公司提供；实验动物生产许可证号：SCXK(沪)2013-0016，由上海市科学技术委员会签发；动物接收日期：2016年05月10日；3.5试验动物数动物订购数量：雄性：40只；雌性：40只；动物接收数量：雄性41只，雌性42只；试验用动物数：80只；雌雄各半；选择体重符合要求的动物进行试验，分组后剩余的动物移交给实验动物管理室负责处理。3.6试验开始(分组)时年龄4周龄；3.7试验开始(分组)时体重雌性：88.6～102.3g，雄性：78.9～102.4g。3.8检疫检疫内容：(1)动物外观健康检查：从外观体征、行为活动、排泄物性状等方面观察动物的一般状态有无异常。(2)动物微生物检查—动物体内外寄生虫检查，体内细菌、病毒检查本试验所用动物来自上海西普尔-必凯实验动物有限公司，此检查已在实验动物有限公司完成，因此除非观察到动物有明显的感染症状，在检疫观察期不再进行该项检查。4动物分组及识别4.1组数共分4组，分别为：溶媒对照组、低剂量组(500mg/kg)、中剂量组(1500mg/kg)、高剂量组(4500mg/kg)。4.2各组动物数4.3分组方法根据检疫、环境适应和饲养本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种SD大鼠临床检验方法，其特征在于，包括以下步骤：SD大鼠给药试验结束后，SD大鼠禁食12～16小时后灌胃2％的戊巴比妥钠生理盐水溶液进行麻醉，从心脏采血完毕后处死后进行解剖；检测血液、血清的生化指标并对解剖后的器官或组织进行称重和病理组织学检查。

【技术特征摘要】
1.一种SD大鼠临床检验方法，其特征在于，包括以下步骤：SD大鼠给药试验结束后，SD大鼠禁食12～16小时后灌胃2％的戊巴比妥钠生理盐水溶液进行麻醉，从心脏采血完毕后处死后进行解剖；检测血液、血清的生化指标并对解剖后的器官或组织进行称重和病理组织学检查。2.根据权利要求1所述的SD大鼠临床检验方法，其特征在于，所述血液生化指标包括红细胞计数、血红蛋白定量、红细胞比积、血小板计数、白细胞计数、中性粒细胞定量、淋巴细胞定量、单核细胞定量、嗜酸性粒细胞定量、网织红细胞计数。3.根据权利要求1所述的SD大鼠临床检验方法，其特征在于，所述血清生化指标包括丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、尿素、肌酐、总蛋白、白蛋白、葡萄糖、总胆固醇、甘油三脂。4.根据权利要求1所述的SD大鼠临床检验方法，其特征在于，所述SD大鼠进行称量重量的组织器官包括：心脏、肝脏、脾脏、肺、肾脏、脑、肾上腺、睾丸、卵巢。5.根据权利要求1所述的SD大鼠临床检验方法，其特征在于，所述SD大鼠进行病理组织学检查的组织器官包括：脑、心脏、肺、肝脏、肾脏、脾脏、胃、小肠、大肠、睾丸、卵巢、肾上腺。6.根据权利要求1所述的SD大鼠临床检验方法，其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员：高益槐，邱安东，王红兵，郑春源，
申请(专利权)人：安发福建生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：福建,35