HPLC测定复方柳安咖注射液中咖啡因含量的方法技术

本发明专利技术公开了一种HPLC测定复方柳安咖注射液中咖啡因含量的方法，包括以下步骤：(1)制备对照品溶液：取咖啡因对照品用水制成对照品溶液；(2)制备待测样品溶液：取复方柳安咖注射液样品加水稀释制备待测样品溶液；(3)制定标准曲线：取不同浓度的咖啡因对照品溶液混合后上高效液相色谱仪进行定量测定，获得咖啡因的标准曲线；(4)测定待测样品溶液：取待测样品溶液上高效液相色谱仪进行定量测定，获得咖啡因的峰面积，然后根据标准曲线获得待测样品中咖啡因的含量。本发明专利技术的操作简捷，结果准确，适用于测定复方柳安咖注射液中的咖啡因。

Determination of caffeine in compound Liu An Jiao injection by HPLC

The invention discloses a method for determining caffeine content in compound Liu An caffeine injection by HPLC. The following steps are as follows: (1) preparation of a control solution: a control solution of a caffeine control product; (2) preparation of a sample solution: preparation of a compound willow injection sample and water dilution to prepare a sample solution; (3) formulation Standard curve: the standard curve of caffeine was obtained by mixing the caffeine control solution with different concentrations. The standard curve of caffeine was obtained. (4) determination of the sample solution: the high performance liquid chromatograph of the sample solution was measured, the peak area of caffeine was obtained, and then the standard curve was obtained by the standard curve. The content of caffeine in the sample is to be measured. The method is simple and accurate, and is suitable for the determination of caffeine in compound Liu An Ke injection.

【技术实现步骤摘要】
HPLC测定复方柳安咖注射液中咖啡因含量的方法
本专利技术涉及测定复方柳安咖注射液中咖啡因含量的方法，尤其涉及一种HPLC测定复方柳安咖注射液中咖啡因含量的方法。
技术介绍
复方柳安咖注射液主要用于治疗风湿、类风湿等各类关节炎及发热等，为常用解热镇痛药，系咖啡因、安替比林和咖啡因的灭菌水溶液注射剂。在国家药品标准中，只有该药的咖啡因、安替比林的含量测定方法。咖啡因含量采用酸碱滴定法，安替比林含量测定方法为对照品分光光度法，方法操作复杂、费时、准确度和精密度较差。
技术实现思路
本专利技术的目的旨在提供一种HPLC测定复方柳安咖注射液中咖啡因含量的方法。本专利技术的目的通过以下技术方案来实现：一种HPLC测定复方柳安咖注射液中咖啡因含量的方法，包括以下步骤：(1)制备对照品溶液：取咖啡因对照品用水制成对照品溶液；(2)制备待测样品溶液：取复方柳安咖注射液样品加水稀释制备待测样品溶液；(3)制定标准曲线：取不同浓度的咖啡因对照品溶液混合后上高效液相色谱仪进行定量测定，获得咖啡因的标准曲线；(4)测定待测样品溶液：取待测样品溶液上高效液相色谱仪进行定量测定，获得咖啡因的峰面积，然后根据标准曲线获得待测样品中咖啡因的含量；所述步骤(3)和(4)中的色谱条件：250mm×4.6mm，5μmKRomasilC18色谱柱，进样量1μ量，以体积比为10∶90的乙腈-0.2％磷酸氢钾溶液为流动相，检测波长为272nm，柱温室温，流速1.0mL/min。所述步骤(1)中，精密称取咖啡因对照品70mg至100mL量瓶中，加水溶解并定容至刻度，制得咖啡因对照品溶液。所述步骤(2)中，取复方柳安咖注射液样品2ml，置于500ml量瓶中，加水稀释至刻度，得到待测品溶液。与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：本专利技术的操作简捷，结果准确，适用于测定复方柳安咖注射液中的咖啡因。具体实施方式实施例1(1)制备对照品溶液：精密称取咖啡因对照品70mg至100mL量瓶中，加水溶解并定容至刻度，制得咖啡因对照品溶液。(2)制备待测样品溶液：取复方柳安咖注射液样品2ml，置于500ml量瓶中，加水稀释至刻度，然后精密量取溶液10ml置于100ml量瓶中，加水稀释至刻度，得到待测品溶液。(3)制定标准曲线：精密量取咖啡因对照品溶液5、7.5、10、12.5、15ml，分别置于100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，按以下色谱条件进行测定，获得咖啡因的回归方程：Y＝-5326+3297332X(r＝0.9999)，Y为峰面积，X为浓度。色谱条件：250mm×4.6mm，5μmKRomasilC18色谱柱，进样量1μ量，以体积比为10∶90的乙腈-0.2％磷酸氢钾溶液为流动相，检测波长为272nm，柱温室温，流速1.0mL/min。(4)测定待测样品溶液：取待测样品溶液上高效液相色谱仪，按照上述步骤(3)的色谱条件进行定量测定，获得咖啡因的峰面积，然后根据回归方程获得待测样品中咖啡因的含量；(5)精密度：取咖啡因对照品溶液，连续进样6次，记录峰面积，结果峰面积RSD分别为0.6％，表明仪器精密度良好。(6)稳定性试验：取咖啡因待测品溶液分别于0、1、2、4、8h测定，记录峰面积。结果咖啡因峰面积的RSD为0.8％。(7)重复性试验：取咖啡因待测样品溶液进样，按上述色谱条件进行测定，测得咖啡因含量的RSD0.5％。(8)加样回收试验：精密量取咖啡因对照品溶液4、5、6ml各3份，分别置100ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，按上述测定方法和色谱条件进行测定，按回归方程计算含量，咖啡因的回收率为97.5～99.60％，RSD为0.5％。(9)样品测定：共取复方柳安咖注射液3批按上述方法进样检测，结果3批样品中咖啡因的含量分别为98.10％、99.2％、99.10％。本专利技术可用其他的不违背本专利技术的精神或主要特征的具体形式来概述。本专利技术的上述实施方案都只能认为是对本专利技术的说明而不是限制，因此凡是依据本专利技术的实质技术对以上实施例所作的任何细微修改、等同变化与修饰，均属于本专利技术技术方案的范围内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种HPLC测定复方柳安咖注射液中咖啡因含量的方法，其特征是，包括以下步骤：(1)制备对照品溶液：取咖啡因对照品用水制成对照品溶液；(2)制备待测样品溶液：取复方柳安咖注射液样品加水稀释制备待测样品溶液；(3)制定标准曲线：取不同浓度的咖啡因对照品溶液混合后上高效液相色谱仪进行定量测定，获得咖啡因的标准曲线；(4)测定待测样品溶液：取待测样品溶液上高效液相色谱仪进行定量测定，获得咖啡因的峰面积，然后根据标准曲线获得待测样品中咖啡因的含量。

【技术特征摘要】
1.一种HPLC测定复方柳安咖注射液中咖啡因含量的方法，其特征是，包括以下步骤：(1)制备对照品溶液：取咖啡因对照品用水制成对照品溶液；(2)制备待测样品溶液：取复方柳安咖注射液样品加水稀释制备待测样品溶液；(3)制定标准曲线：取不同浓度的咖啡因对照品溶液混合后上高效液相色谱仪进行定量测定，获得咖啡因的标准曲线；(4)测定待测样品溶液：取待测样品溶液上高效液相色谱仪进行定量测定，获得咖啡因的峰面积，然后根据标准曲线获得待测样品中咖啡因的含量。2.根据权利要求1所述的HPLC测定复方柳安咖注射液中咖啡因含量的方法，其特征是，所述步骤(3)和(4)中的色谱条件：...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈学松，罗达龙，刘慧妍，
申请(专利权)人：广西壮族自治区梧州食品药品检验所，
类型：发明
国别省市：广西,45