一种易保藏富含小肽的海产小杂鱼酶解全鱼浆的制备方法技术

一种易保藏富含小肽的海产小杂鱼酶解全鱼浆的制备方法，包括如下步骤：1）颗粒化，将以新鲜海产小杂鱼全鱼为原料鱼，分级粉碎至最大尺寸在5mm以下的蛋白颗粒；2）微粒化，超高速剪切至150目以上的蛋白微粒浆；3）微小化，加热至微小化温度55℃～75℃，超声探头伸入盛放槽作用微小化超声波，制得微小粒蛋白活化浆；4）酶解，微波包围加热至酶解反应温度40℃～65℃，将原料鱼重0.01～2%的蛋白酶加入到微粒蛋白浆中，微波、超声波酶解反应循环交替施加10‑20分钟/次，酶解反应时间20～60min，得到酶解蛋白浆；灭活发酵，真空浓缩至水分含量为40‑60wt%，即得易保藏富含小肽的海产小杂鱼酶解全鱼浆；所述制备方法，能替代鱼粉作为水产养殖的经济饲料的饲料蛋白源。

A method for preparation of enzymatic hydrolysate of whole fish paste, which is easy to preserve marine small fish with rich peptides

A method for the preparation of the whole fish pulp with small peptides rich in small peptides, which includes the following steps: 1) granulation, with fresh marine small fish all fish as raw fish, fractionated to the maximum size of protein particles below 5mm; 2) microparticle, ultra high speed shear to more than 150 mesh protein slurry; 3) tiny It was heated to the miniaturization temperature of 55 to 75 degrees C, the ultrasonic probe was extended into the blooming trough to make the miniaturized ultrasonic wave, and the activated pulp of microgranulocyte was prepared. The enzymatic hydrolysis, the microwave encircling heating to the enzymatic hydrolysis temperature 40 to 65 Centigrade, added 0.01 to 2% protease from the raw fish to the particle egg white pulp, and the microwave and ultrasonic enzymatic hydrolysis reaction. The cycle alternately applied 10 minutes to 20 minutes / times, enzymatic hydrolysis time 20 ~ 60min, enzymolysis protein pulp, inactivated fermentation, vacuum concentration to 40 of water content, which is easy to preserve small peptides rich in marine small fish enzyme hydrolysis whole fish pulp; the preparation method can replace fish meal as a feed protein for aquaculture economic feed protein. Source.

【技术实现步骤摘要】
一种易保藏富含小肽的海产小杂鱼酶解全鱼浆的制备方法
本专利技术涉及一种蛋白质酶解
，具体为一种易保藏富含小肽的海产小杂鱼酶解全鱼浆的制备方法。
技术介绍
鱼饲料中的一个重要且成本较高的原料是蛋白质。种类丰富的海洋鱼类是蛋白酶解的主要对象，海洋蛋白酶解后，其水解产物之一是小肽。小肽应为小分子肽的总称,既包括2～3个氨基酸残基的分子学小肽,也包括氨基酸残基低于10个的寡肽,即在实际应用中,氨基酸残基在10个左右的小分子小肽产品均可归为小肽产品。小肽具有很好的功能特性，不仅能够被有机体以完整的形式快速吸收，直接参与组织蛋白的合成，而且具有抗菌和提高免疫力的生理功能，实现了蛋白质的高值化。研究证明，小肽替代一定比例的鱼粉作为饲料饲喂养殖鱼，除了可以促进养殖鱼生长外，还可增强饲喂养殖鱼的自身免疫功能，降低它们的疾病发生率。蛋白酶解的机制非常复杂，因为底物包含了大量的不同种类的不溶性蛋白。相同量的蛋白质，如何提高酶解效率，得到更多的小肽是大家追求的目标。1）蛋白酶是水解蛋白质的关键。酶解研究的蛋白酶种类很多,根据它们来源不同主要分为来自动物,植物,微生物的蛋白酶。不同的蛋白酶会极大地影响水解产物的理化功能特性,所以蛋白酶的选择在海洋蛋白酶解工业中是至关重要的。蛋白水解物的营养价值和风味的好坏很大程度上依赖于所用酶的不同。2）酶解效率低。常规的水浴酶解需要55-65℃、7小时以上,费时费力，还容易变质；由于游离酶自身的缺陷,使酶解反应不利于多肽的生产制备,例如:游离酶在酸、碱、热及有机溶剂等介质中易变性,活性降低或丧失；酶在反应后溶液中残留,造成酶反应难以连续化与自动化。3)如何储藏，蛋白酶解液的存储条件苛刻，很多地区由于酶解液存储技术不过关，在酶解液存储过程中养分流失严重，导致蛋白酶解液品质较差，造成严重的原料浪费。目前关于蛋白酶解液储存技术的研究主要集中在酶解液中添加剂的研究，通过加入添加剂可以提高其存储效果、防止二次发酵；但由于添加剂受环境、原料等影响较大，所以研究结果间存在差异，难以实现规模化应用。如何低成本而高效率地酶解海产小杂鱼得到富含小肽的全鱼浆，并实现营养的良好存储是酶解液应用在水产养殖业中急需解决的工艺难题。
技术实现思路
针对上述现有技术存在的问题，本专利技术的目的是如何低成本而高效率地酶解海产小杂鱼得到富含小肽的全鱼浆，并实现营养的良好存储，提供一种易保藏富含小肽的海产小杂鱼酶解全鱼浆的制备方法。本专利技术是这样实现的，一种易保藏富含小肽的海产小杂鱼酶解全鱼浆的制备方法，包括如下步骤：1）颗粒化，将以新鲜海产小杂鱼全鱼为原料鱼，冷冻干燥至含水量在50wt%-70wt%，分级粉碎至最大尺寸在5mm以下的蛋白颗粒，干散冷冻存放；2）微粒化，按照蛋白颗粒与水质量比1:0.2在蛋白颗粒中加入0-3℃纯水，超高速剪切至150目以上的蛋白微粒浆,加纯水至原料鱼与水质量比为1:0.2～10；3）微小化，蛋白微粒浆进行微波包围加热，90-100℃沸煮10-20min，冷却至微小化温度55℃～75℃，超声探头伸入蛋白微粒浆中作用微小化超声波，使得蛋白微粒浆的蛋白微粒直径减小到微米级或微米级以下，制得微小粒蛋白活化浆；4）酶解，对微小粒蛋白活化浆进行微波包围加热至酶解反应温度40℃～65℃，将原料鱼重0.01～2wt%的蛋白酶固定于分散载体表面，然后将分散载体均匀固定于多个预置体表面，微波、超声、微小粒蛋白活化浆浸入到预置体中酶解反应循环交替施加10-20min/次，总酶解反应时间20～60min，得到酶解蛋白浆；5）高温灭活，对所述酶解蛋白浆微波包围加热至90℃～120℃，恒温灭活15-30min，冷却后得到洁净酶解全鱼浆；6）发酵，将乳酸菌和丙酸杆菌按照洁净酶解全鱼浆总重量1～10wt%接种量接种至洁净酶解全鱼浆，于25～40℃发酵2～8h；7）分离浓缩，发酵液离心分离出上清液，真空浓缩至水分含量为40-60wt%，即得易保藏的富含小肽的酶解全鱼浆；步骤1）-7）均在残氧量<5%的氮气保护环境中进行。进一步地，所述预置体是聚乙烯板，分散载体固定于多个预置体表面，是指将所述分散载体均匀粘结到薄聚乙烯板的上下表面，最后将多个薄聚乙烯板格间隔组装而成多个同心圆环形组成的格栅板。进一步地，所述预置体是薄膜，所述薄膜上表面间隔排列有多条隔离凸棱，所述隔离凸棱呈相同周期的正弦曲线，所述薄膜上下表面均匀粘结有分散载体，然后薄膜绕轴外周面卷绕成一定直径的预置体卷绕体。进一步地，所述微波包围加热，是指管形容器的周壁间隔装有多个微波发生器，对蛋白微粒浆进行微波包围加热。进一步地，所述作用微小化超声波，直径10-40mm超声探头伸入管形容器距离管中心1/3深处，多个超声探头在超声管长度方向上间隔布置，以频率20-40kHz，场强70-100w/cm2，超声作用3-10分钟。进一步地，所述蛋白酶固定于分散载体表面为，制备Fe3O4磁性纳米颗粒，硅烷修饰到Fe3O4磁性纳米颗粒表面得到微磁核，将蛋白酶共价偶联到微磁核表面得到分散的硅核酶颗粒。进一步地，所述微波、超声、微小粒蛋白活化浆浸入到预置体中酶解反应循环交替施加是通过交替作用装置来实现，所述交替作用装置包括首尾连通的酶固定化反应管、微波管和超声波管，所述格栅板或所述预置体卷绕体固定在酶固定化反应管中，浆液以一定压力充满所述交替作用装置，并浆液在交替作用装置中每一定间歇时间后在交替作用装置循环一次；间歇时间期间，微波管中浆液接受微波作用，超声波管中浆液接受超声波作用，酶固定化反应管中发生酶解反应。进一步地，所述循环一次是指，根据管流量可计算出酶解固定化反应器的浆液约全部流到微波管中，微波管中的浆液约全部流到超声波管中，如此循环一次所需的循环时间确定为间歇时间。一种所述易保藏富含小肽的海产小杂鱼酶解全鱼浆的制备方法得到的富含小肽的海产小杂鱼酶解全鱼浆，所述海产小杂鱼酶解全鱼浆为具有一定粘性和可流动性的膏状物，其中氨基酸残基在10个左右的小分子小肽含量为15～20wt%。一种所述易保藏富含小肽的海产小杂鱼酶解全鱼浆在水产养殖中的应用，用占鱼粉总重量至少20wt%的所述海产小杂鱼酶解全鱼浆替代鱼粉连续饲喂养殖鱼类。本专利技术通过主要改进以下几点来达到“低成本而高效率地酶解海产小杂鱼得到富含小肽的全鱼浆且要易保藏”的目的，1、颗粒化->微粒化->微小化，为酶解蛋白源创造小分子化的条件（1）逐级配合做到尽可能的微小化蛋白酶解至少分为两个阶段，第一步，酶分子与小的蛋白颗粒连接；第二步，水解发生，释放出大量可溶性肽和氨基酸。本专利技术的步骤1）-3）的目的就是为了得到尽可能小的蛋白颗粒，步骤1）先分级粉碎到最大尺寸在5mm以下，步骤2）高速剪切成微粒浆，步骤3）蒸煮后超声振动微小化，超声波是振动频率大于20KHz的一种纵波，超声作用在液体介质产生空化作用，超声可使液体介质中形成微泡，随后微泡破裂，利于蛋白质粒径微小化。（2）低成本微小化到150目以上是不易做到的。微粒化的实现属于自己的微小创新，用的是土办法。现有技术做到150目以上的粉碎粒度，必须购买超微细粉碎机或者胶体磨或流化床气流粉碎机，这些设备是非常昂贵的。而做鱼粉替代品均是小微企业，投资购买这么高大本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种易保藏富含小肽的海产小杂鱼酶解全鱼浆的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：1）颗粒化，将以新鲜海产小杂鱼全鱼为原料鱼，冷冻干燥至含水量在50wt%‑70wt%，分级粉碎至最大尺寸在5mm以下的蛋白颗粒，干散冷冻存放；2）微粒化，按照蛋白颗粒与水质量比1:0.2在蛋白颗粒中加入0‑3℃纯水，超高速剪切至150目以上的蛋白微粒浆, 加纯水至原料鱼与水质量比为1:0.2～10；3）微小化，蛋白微粒浆进行微波包围加热，90‑100℃沸煮10‑20min，冷却至微小化温度55℃～75℃，超声探头伸入蛋白微粒浆中作用微小化超声波，使得蛋白微粒浆的蛋白微粒直径减小到微米级或微米级以下，制得微小粒蛋白活化浆；4）酶解，对微小粒蛋白活化浆进行微波包围加热至酶解反应温度40℃～65℃，将原料鱼重0.01～2wt%的蛋白酶固定于分散载体表面，然后将分散载体均匀固定于多个预置体表面，微波、超声、微小粒蛋白活化浆浸入到预置体中酶解反应循环交替施加10‑20min/次，总酶解反应时间20～60min，得到酶解蛋白浆；5）高温灭活，对所述酶解蛋白浆微波包围加热至90℃～120℃，恒温灭活15‑30min，冷却后得到洁净酶解全鱼浆；6）发酵，将乳酸菌和丙酸杆菌按照洁净酶解全鱼浆总重量1～10wt%接种量接种至洁净酶解全鱼浆，于25～40℃发酵2～8h；7）分离浓缩，发酵液离心分离出上清液，真空浓缩至水分含量为30‑60wt%，即得易保藏的富含小肽的酶解全鱼浆；步骤1）‑7）均在残氧量<5%的氮气保护环境中进行。...

【技术特征摘要】
1.一种易保藏富含小肽的海产小杂鱼酶解全鱼浆的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：1）颗粒化，将以新鲜海产小杂鱼全鱼为原料鱼，冷冻干燥至含水量在50wt%-70wt%，分级粉碎至最大尺寸在5mm以下的蛋白颗粒，干散冷冻存放；2）微粒化，按照蛋白颗粒与水质量比1:0.2在蛋白颗粒中加入0-3℃纯水，超高速剪切至150目以上的蛋白微粒浆,加纯水至原料鱼与水质量比为1:0.2～10；3）微小化，蛋白微粒浆进行微波包围加热，90-100℃沸煮10-20min，冷却至微小化温度55℃～75℃，超声探头伸入蛋白微粒浆中作用微小化超声波，使得蛋白微粒浆的蛋白微粒直径减小到微米级或微米级以下，制得微小粒蛋白活化浆；4）酶解，对微小粒蛋白活化浆进行微波包围加热至酶解反应温度40℃～65℃，将原料鱼重0.01～2wt%的蛋白酶固定于分散载体表面，然后将分散载体均匀固定于多个预置体表面，微波、超声、微小粒蛋白活化浆浸入到预置体中酶解反应循环交替施加10-20min/次，总酶解反应时间20～60min，得到酶解蛋白浆；5）高温灭活，对所述酶解蛋白浆微波包围加热至90℃～120℃，恒温灭活15-30min，冷却后得到洁净酶解全鱼浆；6）发酵，将乳酸菌和丙酸杆菌按照洁净酶解全鱼浆总重量1～10wt%接种量接种至洁净酶解全鱼浆，于25～40℃发酵2～8h；7）分离浓缩，发酵液离心分离出上清液，真空浓缩至水分含量为30-60wt%，即得易保藏的富含小肽的酶解全鱼浆；步骤1）-7）均在残氧量&lt;5%的氮气保护环境中进行。2.如权利要求1所述易保藏富含小肽的海产小杂鱼酶解全鱼浆的制备方法，其特征在于，所述预置体是聚乙烯板，分散载体固定于多个预置体表面，是指将所述分散载体均匀粘结到薄聚乙烯板的上下表面，最后将多个薄聚乙烯板格间隔组装而成多个同心圆环形组成的格栅板。3.如权利要求1所述易保藏富含小肽的海产小杂鱼酶解全鱼浆的制备方法，其特征在于，所述预置体是薄膜（5.2），所述薄膜（5.2）上表面间隔排列有多条隔离凸棱（5.3），所述隔离凸棱（5.3）呈相同周期的正弦曲线，所述薄膜（5.2）上下表面均匀粘结有分散载体（5.4），然后薄膜（5.2）绕轴（5.1）外周面卷绕成一定直径的预置体卷绕体（5）。4...

【专利技术属性】
技术研发人员：许剑彬，孙姜，许福土，王灵华，
申请(专利权)人：玉环县五丰蒸干脱脂鱼粉厂，
类型：发明
国别省市：浙江,33