一种利用玉米秸秆制备木霉菌可湿性粉剂的方法，属农用微生物杀菌剂技术领域，用于解决提高制备效率和产品性能的问题。其技术方案是，它以玉米秸杆粉为原料经原料加工、液体发酵、固体发酵、可湿性粉剂的制备等步骤制成，其中，在固体发酵时添加柿叶提取物促使木霉菌生物量大幅提高，并将固体发酵物添加ＷＬＮＰＫ、Ｄ５００、润湿剂、填料等直接粉碎，省去了了固体发酵物木霉分生孢子收集的繁复工序。本发明专利技术提高了利用玉米秸秆制备木霉菌的生产效率，使该项技术更便于推广应用。本发明专利技术对人畜和生态环境无害，无残留，不产生抗药性，生产成本低于化学农药多菌灵，速克灵等，还可以变废为宝，具有很好的经济效益和社会效益。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种农用生物杀菌剂，特别是，属农用微生物杀菌剂
技术介绍
在一个农业生产大国内，每年收获农作物后的秸杆可高达上亿吨，这是一项可回收利用的珍贵资源。中国专利200510012912.1公开过一种以玉米秸秆为原料生产木霉生物杀菌剂的制备方法，该方法改变制备木霉杀菌剂需要使用玉米粉、糖蜜、麦麸等价格较贵的原料的状况，利用秸杆等廉价原料制备木霉杀菌剂，既可以变废为宝解决秸杆利用问题，又可以使用低价环保的木霉杀菌剂防治病害，收到了较好的社会效益和经济效益。但是这种方法存有下列不足之处1.在固体发酵阶段木霉分生孢子的产孢量较低，2.固体发酵物木霉分生孢子收集的工序繁复，上述问题制约了木霉素高效生产，也影响到该方法的广泛推广，故有待于进一步改进。
技术实现思路
本专利技术用于解决上述已有技术之缺陷而提供一种，该方法可以大幅度增加固体发酵时木霉分生孢子生成量，该方法还省去了木霉分生孢子收集的繁复工序。本专利技术所称问题是通过以下技术方案解决的一种，其特别之处是，它以玉米秸杆粉为原料按照如下步骤制备a.原料加工选择无霉变玉米秸秆，粉碎成20目粉状备用；b.液体发酵培养基成分麸皮0.5-0.8克，(NH4)2SO40.2-0.4克，KH2PO40.1-0.3克，CaCO30.1-0.3克，葡萄糖1-3克，以上述物质配制液体发酵培养基100毫升，调整液体的PH值为5.5-6，高压灭菌30-40分钟，待物料冷却后接入筛选好的拮抗性木霉菌种，于26-28℃振荡培养36-48小时，停止培养备用； c.固体发酵取粉碎好的玉米秸秆粉8-10克，(NH4)2SO40.12-0.14克，MgSO40.002-0.004克，KH2PO40.004-0.006克，柿叶提取物0.004-0.005克，其中，柿叶提取物先用5毫升酒精溶解，把上述物质加200毫升水溶解，再放入玉米秸秆粉，搅拌均匀，盖好瓶塞，高压灭菌30-40分钟，待物料冷却后接入步骤b的1-2毫升液体培养液，搅拌均匀，放于28℃的恒温培养箱中，保持湿度65～85％进行固体培养96小时，培养好的固体发酵物料在不高于40℃环境中干燥后备用；d.可湿性粉剂的制备把风干好的固体发酵物40-50克，WLNPK2-3克，D5001-2克，润湿剂3-4克，填料(硅藻土)40-50克用气流粉碎机粉碎至325目，再用混合设备充分混合均匀，即制备木霉菌可湿性粉剂。上述，所述柿叶提取物的提取工艺如下把干燥无霉变的柿子叶15-20克放入1000毫升两口瓶中，一口连接冷凝器回收酒精，一口接温度计，加入30％的酒精液700-800毫升，使液面超过物料，然后加热到70-80℃提取2-3小时，倒出提取过的柿叶，把提取液过滤，然后用蒸发器蒸发，回收酒精，再把蒸发剩余物料放入干燥箱，在100-110℃烘成干粉备用。上述，所述拮抗性木霉菌种为绿色木霉，并经紫外光照射诱变选育。本专利技术使用廉价的玉米秸秆粉为原料，替代目前使用的淀粉等类原料，采用液-固两相发酵工艺，制备生物杀菌剂。与现有技术相比具有如下创新之处1.添加少量的柿叶提取物，可促使木霉菌生物量大幅提高，使固体发酵物的木霉分生孢子产量提高5倍；2.省去了固体发酵物木霉分生孢子收集的繁复工序，该方法把固体发酵物直接粉碎，把没有利用的纤维素粉碎后作为可湿性粉剂的填料，既降低成本，又可以作为喷施药液中的木霉孢子萌发和生长的营养物质，提高药剂的防治效果，提高了制备木霉菌的生产效率。本专利技术对人畜和生态环境无害，无残留，不产生抗药性。采用玉米秸秆粉为主要原料，生产成本低于化学农药多菌灵，速克灵等。本专利技术还可以消耗大量玉米秸秆，不仅避免因焚烧玉米秸秆造成的大气污染，还可以变废为宝，具有很好的经济效益和社会效益，是发展高效，绿色，生态农业理想的生物农药。具体实施例方式本专利技术在木霉菌固体发酵时，添加少量柿叶提取物，该物质为类磺酮物质，可促使木霉菌生物量大幅提高，试验表明，添加柿叶提取物后，固体发酵的木霉分生孢子产量提高近5倍，因而大幅提高了物料利用率和生产效益。此外，现有技术中固体发酵物木霉分生孢子收集的工序繁复，不便于操作，本专利技术把固体发酵物直接粉碎，将没有利用的纤维素粉碎后既可作为可湿性粉剂的填料，降低惰性填料的使用量，降低成本；又可以作为喷施药液中的木霉孢子萌发和生长的营养物质，提高药剂的防治效果。但由于固体发酵物中除了木霉分生孢子外，大部分是没有被利用的纤维素粉，需用分散剂使其在配制药液时均匀分散在水中。本专利技术采用南京某科技有限公司生产的WLNPK和D500两种产品作为复合分散剂，分散效果较好。以下提供几个具体实施例实施例1. a.原料加工选择无霉变玉米秸秆，粉碎成20目粉状备用；b.液体发酵培养基成分麸皮0.5克，(NH4)2SO40.2克，KH2PO40.2克，CaCO30.1克，葡萄糖2克，以上述物质配制液体发酵培养基100毫升，调整液体的PH值为5.5，高压灭菌35分钟，待物料冷却后接入筛选好的拮抗性木霉菌种，于28℃振荡培养36小时，停止培养备用；c.固体发酵取粉碎好的玉米秸秆粉8克，(NH4)2SO40.12克，MgSO40.002克，KH2PO40.004克，柿叶提取物0.004克，其中，柿叶提取物先用5毫升酒精溶解，把上述物质加200毫升水溶解，再放入玉米秸秆粉，搅拌均匀，盖好瓶塞，高压灭菌35分钟，待物料冷却后接入步骤b的1.5毫升液体培养液，搅拌均匀，放于30℃的恒温培养箱中，保持湿度65％进行固体培养96小时。培养好的固体发酵物料在不高于40℃环境中干燥后备用；d.可湿性粉剂的制备把风干好的固体发酵物40克，WLNPK 2克，D500 1克，润湿剂3克，填料(硅藻土)40克用气流粉碎机粉碎至325目，再用混合设备充分混合均匀，即制备木霉菌可湿性粉剂。柿叶提取物的提取工艺如下把干燥无霉变的柿子叶15克放入1000毫升两口瓶中，一口连接冷凝器回收酒精，一口接温度计，加入30％的酒精液700毫升，使液面超过物料，然后加热到70℃提取3小时，倒出提取过的柿叶，把提取液过滤，然后用蒸发器蒸发，回收酒精。再把蒸发剩余物料放入干燥箱，在105℃左右烘成干粉备用。实施例2. a.原料加工选择无霉变玉米秸秆，粉碎成20目粉状备用；b.液体发酵培养基成分麸皮0.8克，(NH4)2SO40.2克，KH2PO40.3克，CaCO30.3克，葡萄糖3克，以上述物质配制液体发酵培养基100毫升，调整液体的PH值为6，高压灭菌40分钟，待物料冷却后接入筛选好的拮抗性木霉菌种，于26℃振荡培养45小时，停止培养备用； c.固体发酵取粉碎好的玉米秸秆粉9克，(NH4)2SO40.13克，MgSO40.003克，KH2PO40.006克，柿叶提取物0.005克，其中，柿叶提取物先用5毫升酒精溶解，把上述物质加200毫升水溶解，再放入玉米秸秆粉，搅拌均匀，盖好瓶塞，高压灭菌40分钟，待物料冷却后接入步骤b的2毫升液体培养液，搅拌均匀，放于30℃的恒温培养箱中，保持湿度75％进行固体培养96小时。培养好的固体发酵物料在不高于40℃环境中干燥后备用；d.可湿性粉剂的制备把风干好的固体发酵物50克，WLNPK 3克，D500 2克，润湿剂3.5克，填料(硅藻土)本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种利用玉米秸秆制备木霉菌可湿性粉剂的方法，其特征在于：它以玉米秸杆粉为原料并按照如下步骤制备： ａ．原料加工：选择无霉变玉米秸秆，粉碎成２０目粉状； ｂ．液体发酵：培养基成分：麸皮０．５－０．８克，（ＮＨ↓［４］）↓［２］ＳＯ↓［４］ ０．２－０．４克，ＫＨ↓［２］ＰＯ↓［４］ ０．１－０．３克，ＣａＣＯ↓［３］ ０．１－０．３克，葡萄糖１－３克，以上述物质配制液体发酵培养基１００毫升，调整液体的ＰＨ值为５．５－６，高压灭菌３０－４０分钟，待物料冷却后接入筛选好的拮抗性木霉菌种，于２６－２８℃振荡培养３６－４８小时，停止培养备用； ｃ．固体发酵：取粉碎好的玉米秸秆粉８－１０克，（ＮＨ↓［４］）↓［２］ＳＯ↓［４］ ０．１２－０．１４克，ＭｇＳＯ↓［４］ ０．００２－０．００４克，ＫＨ↓［２］ＰＯ↓［４］ ０．００４－０．００６克，柿叶提取物０．００４－０．００５克，其中，柿叶提取物先用５毫升酒精溶解，把上述物质加２００毫升水溶解，再放入玉米秸秆粉，搅拌均匀，高压灭菌３０－４０分钟，待物料冷却后接入步骤ｂ的１－２毫升液体培养液，搅拌均匀，放于２８℃的恒温培养箱中，保持湿度６５～８０％进行固体培养９６小时，培养好的固体发酵物料在不高于４０℃环境中干燥后备用； ｄ．可湿性粉剂的制备：把风干好的固体发酵物４０－５０克，ＷＬＮＰＫ２－３克，Ｄ５００ １－２克，润湿剂３－４克，填料硅藻土４０－５０克用气流粉碎机粉碎至３２５目，再用混合设备充分混合均匀，即制备木霉菌可湿性粉剂。...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：田连生，陈菲，高海霞，单旭辉，
申请(专利权)人：田连生，
类型：发明
国别省市：13[中国|河北]
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