一个基本上纯的由ＨＳＶ－２ ＵＬ ２６基因编码的蛋白及其功能片段。（*该技术在2014年保护过期，可自由使用*）
【技术实现步骤摘要】
有关申请的相互参考这个申请是1993年8月20日提交的共同未决的美国专利申请系列号08/110,522的一个部分继续申请，该申请整个内容在此引入作为参考。专利
本专利技术涉及HSV-2(单纯性疱疹病毒-2)UL26和HSV-2 UL26.5的基因；涉及基本上纯的HSV-2 UL26和HSV-2 UL26.5的基因各产物；涉及生产和利用HSV-2 UL26和HSV-2 UL26.5 DNA序列和基因产物的组成和方法。专利技术背景疱疹病毒由大约二十面体包封的内含一条双链基因组的病毒粒子组成。当前，六种人的疱疹病毒已被分离到，并已知它们从亚临床感染到致死病害状态的多种免疫受损状态有关。有一种人的疱疹病毒，单纯性疱疹病毒类型2，叫作HSV-2，常是通过性接触被传染的并引起生殖器疱疹。第二次生殖器疱疹复发率范围为每年1到6次之间。据估计，在美国有1千万到6千万人发生生殖器HSV-2感染。当今，还没有可以用来预防HSV-2感染的疫苗。关于HSV-2的基因组组成所知甚少。然而，HSV-2引出了一个重要的公共健康问题。多数个人继续被病毒感染而且还没有完全满意的抗病毒药剂或疫苗。需要有一种鉴定抗HSV-2剂的方法以及在这样方法中使用的试剂。需要有一种鉴定化合物的方法，该种化合物能调节HSV-2蛋白的活性和影响病毒在一个感染的细胞中复制和产生多重感染的病毒粒子的能力。还需要有区别HSV-2感染与其他疱疹病毒感染的方法和检别试剂盒。专利技术概要本专利技术涉及基本上纯的HSV-2 UL-26基因产物和其片段，他们包括HSV-2蛋白酶前体蛋白，成熟的HSV-2蛋白酶及其活性片段，HSV衣壳前体蛋白和成熟的HSV-2衣壳蛋白。本专利技术涉及基本上纯的包括HSV-2衣壳前体蛋白和成熟的HSV-2衣壳蛋白的HSV-2 UL26.5基因产物及其片段。本专利技术涉及分离的包含HSV-2 UL-26基因或它的部份的核酸分子，该基团或它的部份的核酸分子包括编码成熟的HSV-2蛋白酶和其活性片段的核酸分子以及编码前体或成熟的HSV-2衣壳蛋白，调节区域，例如启动子区域或其功能片段的核酸分子。本专利技术涉及包含HSV-2 UL-26基因或其一部分的表达载体，其中包括编码成熟HSV-2蛋白酶和它的活性片段的核苷酸序列，以及编码前体或成熟的HSV-2衣壳蛋白或它的功能片段的核苷酸序列。本专利技术涉及含有包括HSV-2 UL-26基因或他的一部分的表达载体的宿主细胞，其中包括编码成熟的HSV-2蛋白酶和他的活性片段的核苷酸序列和编码前体或成熟的HSV-2衣壳蛋白或他的功能片段的核苷酸序列。本专利技术涉及包括HSV-2 UL 26.5基因或他的一部分的分离到的核酸分子，该UL 26.5基因或他的一部分包含编码成熟的HSV-2衣壳蛋白、调节区(例如启动子区或他的片段)的分离到的核酸，和编码前体或成熟的HSV-2衣壳蛋白或他的功能片段的核苷酸序列。本专利技术涉及包括HSV-2 UL 26.5基因或他的一部分的表达载体，该UL 26.5基因或他的一部分包含编码成熟的HSV-2衣壳蛋白或他的片段的核苷酸序列和编码前体或成熟的HSV-2衣壳蛋白或他的功能片段的核苷酸序列。本专利技术涉及含有包括HSV-2 UL 26.5基因或他的一部分的表达载体的宿主细胞，该UL 26.5基因或它的一部分包括编码成熟的HSV-2衣壳蛋白或他的片段的核苷酸序列和编码前体或成熟的HSV-2衣壳蛋白或他的功能片段的核苷酸序列。本专利技术涉及鉴定抑制HSV-2蛋白酶活性的化合物的方法，包括在一种被试化合物存在下，用一个HSV-2蛋白酶的底物与HSV-2蛋白酶或他的活性片段接触以检测底物被蛋白酶裂解的水平，并与不存在被试化合物下酶解的水平相比较。本专利技术涉及鉴定抑制HSV-2病毒粒子装配的化合物的方法，通过在一种被试化合物存在下与HSV-2衣壳蛋白的接触，检测衣壳-衣壳联合的水平，并以此水平与在没有被试化合物下发生的水平相比较。本专利技术涉及用化学合成手段产生HSV-2蛋白酶底物，或重组生产断定是全部UL 26基因产物或部分片段的HSV-2蛋白酶底物。本专利技术涉及抗体，他选择性地结合HSV-2蛋白酶处理过的底物但不是没有处理过的底物，或选择性地与不经处理过的底物结合但不是经过处理的底物。本专利技术涉及区别HSV-1 DNA和HSV-2 DNA间的方法，包括扩增HSV-1 DNA但不是HSV-2 DNA的引物用PCR扩增DNA和/或用扩增HSV-2 DNA但不是HSV-1 DNA的引物用PCR扩增DNA。本专利技术涉及扩增HSV-1 DNA但不是HSV-2 DNA的PCR引物和扩增HSV-2 DNA但不是HSV-1 DNA的PCR引物。本专利技术涉及用以区别HSV-1 DNA与HSV-2 DNA的试剂盒，包括一个内装有扩增HSV-1 DNA但不是HSV-2 DNA的PCR引物和-个阳性对照以及确定HSV-1 DNA是否通过引物扩增的分子大小标志的容器，和/或一个内装有扩增HSV-2 DNA但不是HSV-1 DNA的PCR引物和一个阳性对照以及用以确定HSV-2 DNA是否已通过引物扩增的分子大小标志的容器。本专利技术涉及区别HSV-1蛋白和HSV-2蛋白的方法包括采用选择性地与HSV-1蛋白但不是HSV-2蛋白相结合的抗体的免疫测定法和/或利用选择性地与HSV-2蛋白但不是HSV-1蛋白相结合的抗体的一个免疫测定法。本专利技术涉及选择性地与HSV-1蛋白但不是HSV-2蛋白相结合的抗体或选择性地与HSV-2蛋白但不是HSV-1蛋白相结合的抗体。本专利技术涉及用以区别HSV-1蛋白和HSV-2蛋白的试剂盒。所说的试剂盒包括一个有分隔空间以接受一系列严格规定的容器的运载箱，它装有一个包含选择性地与HSV-1蛋白但不是HSV-2蛋白相结合的抗体和一套检测抗体是否被结合到HSV-1蛋白上工具的第一容器，和/或一个包含选择性地与HSV-2蛋白但不是HSV-1蛋白相结合的抗体和一套检测抗体是否被结合到HSV-2蛋白上的工具的第二容器。本专利技术涉及HSV-2蛋白酶启动子和/或增强子元件和他们的应用。本专利技术涉及HSV-2衣壳蛋白启动子和/或增强子元件和他们的应用。附图简述附图说明图1说明HSV-2 UL 26基团。符号<>表示HSV-2 UL 26基团产物的限界线。公认的末端密码子为在字下划线。符号]表示HSV-2 UL 26基团产物的限界线。符号[]表示二个主要蛋白水解位点的限界线。裂开键用*表示。符号‖表示HSV-2 UL 26.5基因的启动子区域，一个公认的“TATA盒”用在字下划线表示。图2说明在HSV-2 UL 26.5启动子调节下，氯霉素乙酰转移酶的表达。专利技术详述这里所用的术语UL 26基团指的是包含一个编码HSV-2蛋白酶和一种HSV-2衣壳蛋白的核苷酸序列的一个DNA分子。UL 26基因被公开在SEQ ID NO1(序列鉴定1号)中。UL 26基因的编码区域由SEQ ID NO1的534-2447间核苷酸组成。UL 26基因表达时编码一个638个氨基酸的活性蛋白酶前体(在SEQ ID NO1和SEQ ID NO2中公开)。如在这里所用，术语“有活性的蛋白酶前体”指的是不经加工的UL 26翻译的产物。有活性的蛋白酶前体是一个有活本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：A·G·迪莱拉，C·M·迪布克，
申请(专利权)人：史密丝克莱恩比彻姆公司，
类型：发明
国别省市：
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