基于绿色荧光蛋白检测细胞凋亡的方法技术

技术编号:1758682 阅读:335 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术涉及一种基于绿色荧光蛋白检测细胞凋亡的方法。提供一种荧光蛋白构建体来用于检测在细胞凋亡中蛋白酶或半胱天冬酶的激活。该构建体含有一个供体荧光蛋白;一个受体荧光蛋白;以及一个连接头肽,其中的连接头肽含有半胱天冬酶的底物序列。连接头肽位于供体和受体蛋白之间。本发明专利技术还提供了该编码荧光蛋白构建物的核酸,含有该核酸的表达构建体以及含有这些核酸的基因传递载体。所述方法通过在适于供体荧光蛋白激发的条件下培养含有上述核酸和/或蛋白的宿主细胞的样本并检测样本中的荧光特性,其中细胞程序性死亡在样本细胞中的存在导致供体蛋白和受体蛋白之间的荧光共振能量转移的程度的变化。(*该技术在2022年保护过期,可自由使用*)

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及用于检测细胞凋亡或检测细胞程序性死亡的组合物和方法。
技术介绍
在本专利技术公开的内容中,不同的文献通过第一作者和日期,在括号内的,专利号或文献号被引用。完整的文献引用被提供在本申请的末尾用于参考。这些文献的内容通过引用被合并到本申请中用来更全面的描述本申请的相关技术。细胞凋亡,也称为细胞程序死亡(“PCD”),是在维持生物体的正常生理功能中起重要作用的非常重要的细胞过程。例如,当DNA在细胞中被损伤且不能被修复时,细胞将进入细胞凋亡来避免在组织中形成畸形变态。此外,细胞凋亡过程被用于胸腺中来去除自我反应的T细胞从而来避免自身免疫。细胞凋亡必需被精确地调控来维持我们机体的正常功能。例如激活细胞凋亡的失败可引起癌症或自身免疫病。另一方面,细胞凋亡的激活过度可导致有机体的巨大的损伤;其可导致很多的神经变性疾病例如亨廷顿舞蹈病(Huntington′s disease)和阿耳茨海默氏病(Alzheimer’sdisease)。由于很多重要的疾病,包括癌症,AIDS,自身免疫疾病以及神经变性疾病与细胞凋亡的不足或过度有关,能够启动或阻止细胞凋亡的药物在治疗很多的疾病中均是非常本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于检测在细胞凋亡中半胱天冬酶或蛋白酶激活的荧光蛋白构建体,含有: a.一个供体荧光蛋白; b.一个受体荧光蛋白;以及 c.一个含有半胱天冬酶或蛋白酶的底物序列的连接供体荧光蛋白和受体荧光蛋白的肽连接头。

【技术特征摘要】
...

【专利技术属性】
技术研发人员:张东才罗茜
申请(专利权)人:香港科技大学
类型:发明
国别省市:HK[中国|香港]

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