一种制造重组人粒－巨噬细胞集落刺激因子的方法技术

本发明专利技术涉及一种利用基因工程技术制造重组人粒－巨噬细胞集落刺激因子方法，其目的在于提高粒－巨噬细胞集落刺激因子的表达水平，便于纯化制备。利用ＰＣＲ技术改构其ｃＤＮＡ成熟肽编码区５′端，消除其强二级结构，将其插入高效表达载体，受热诱导后得到高效表达，分离包含体、溶解、复性、纯化后得到比活性＞１×１０↑［７］，纯度＞９８％的重组人粒－巨噬细胞集落刺激因子纯品，可以满足临床应用要求。（*该技术在2015年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种利用基因工程技术制造重组人粒－巨噬细胞集落刺激因子的方法，其特征在于用ＰＣＲ方法对人粒－巨噬细胞集落刺激因子ｃＤＮＡ的改构，获得重组质粒以及对此工程菌进行表达，经离心、洗涤液洗涤、回收包含体、尿素溶解、稀释复性液中复性，经Ｑ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＦＦ和Ｓｅｐｈａｃｒｙｌ Ｓ－２００层析柱纯化，分步收集可得重组人粒－巨噬细胞集落刺激因子纯品。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：汲言山，沈倍奋，
申请(专利权)人：中国人民解放军军事医学科学院基础医学研究所，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]