新型人分泌相关膜蛋白，其编码序列及用途制造技术

本发明专利技术提供了一种新型人分泌相关膜蛋白５（ｈｕｍａｎｓｅｃｒｅｔｏｒｙｃａｒｒｉｅｒａｓｓｏｃｉａｔｅｄｍｅｍｂｒａｎｅｐｒｏｔｅｉｎ５，ｈＳＣＡＭＰ５）。本发明专利技术提供编码此蛋白分子的多核苷酸和经重组技术产生这种蛋白分子的方法。本发明专利技术还公开了这种新型分泌相关膜蛋白分子及其多核苷酸编码序列的用途。ｈＳＣＡＭＰ５是一种在各种腺体及组织广泛表达的分子。本发明专利技术还公开了抗此蛋白分子用于疾病的诊断及治疗的策略。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物技术和医学领域，具体地说，本专利技术涉及新的编码新型人分泌相关膜蛋白hSCAMP5多肽的多核苷酸，以及此多核苷酸编码的多肽。本专利技术还涉及此多核苷酸和多肽的用途和制备。本专利技术的hSCAMP5是一种广泛分布和表达的膜分子。
技术介绍
分泌相关膜蛋白SCAMPs是一种在外分泌腺广泛表达的分子，表观分子量大约为35-40Kd，位于分泌囊泡上，参与囊泡和细胞膜的循环融合。SCAMP分子在各种囊泡上均有表达，因此广泛地参与蛋白的细胞器之间或囊泡之间的转运。除了在突触囊泡、分泌颗粒、糖原运输体(glucose transporter)等囊泡结构的运输中起着重要的作用外，SCAMP蛋白也参与内吞过程的调控，与转铁蛋白受体和甘露糖受体的转运也有关系。SCAMPs的共同特点是都含有氨基端和羧基端的可溶性部分及四次跨膜的疏水性结构域，某些SCAMP(如SCAMP1和SCAMP3)氨基端含有数个重复的NPF基序，可以被表皮生长因子(EGF)的受体或其他生长因子受体磷酸化，参与EGF所介导的细胞生长调控，可能与EGFR相关蛋白的下调、循环和降解相关。目前除了证明其参与内吞过程中衣被囊泡介导的囊泡芽生外，还广泛参与外吐过程中分泌囊泡和细胞膜的融合。SCAMP1基因敲除小鼠显示大脑组织的形态异常，提示其参与机体的分化发育。SCAMP还参与糖原运输体(glucose transporter)的转运和代谢。小鼠的SCAMP5不含NPF基序，而且在脑组织特异表达。因此，SCAMP与细胞的生长调控、肿瘤发生、器官发育、糖尿病及其他疾病存在潜在的联系。鉴于分泌相关膜蛋白的重要作用，本领域迫切需要开发新的分泌相关膜蛋白。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种新的人分泌相关膜蛋白hSCAMP5的编码序列和蛋白序列以及其片段、类似物和衍生物。本专利技术的另一目的是提供编码这些多肽的多核苷酸。本专利技术的另一目的是提供生产这些多肽的方法以及该多肽和编码序列的用途。在本专利技术的第一方面，提供新颖的分离出的hSCAMP5多肽，该多肽是人源的，它包含具有SEQ ID NO2氨基酸序列的多肽、或其保守性变异多肽、或其活性片段、或其活性衍生物。较佳地，该多肽选自下组(a)具有SEQ ID NO2氨基酸序列的多肽；(b)将SEQ ID NO2氨基酸序列经过一个或多个氨基酸残基的取代、缺失或添加而形成的，且具有转运功能的由(a)衍生的多肽。在本专利技术的第二方面，提供编码分离的这些多肽的多核苷酸，该多核苷酸包含一核苷酸序列，该核苷酸序列与选自下组的一种核苷酸序列有至少90％相同性(a)编码上述人hSCAMP5的多核苷酸；和(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸。较佳地，该多核苷酸编码具有SEQ ID NO2所示氨基酸序列的多肽。更佳地，该多核苷酸的序列是选自下组的一种(a)具有SEQ ID NO1中3021-3725位的序列；(b)具有SEQ ID NO1中1-5762位的序列。在本专利技术的第三方面，提供了含有上述多核苷酸的载体，以及被该载体转化或转导的宿主细胞或者被上述多核苷酸直接转化或转导的宿主细胞。在本专利技术的第四方面，提供了制备具有人hSCAMP5蛋白活性的多肽的方法，该方法包含(a)在适合表达人hSCAMP5蛋白的条件下，培养上述被转化或转导的宿主细胞；(b)从培养物中分离出具有人hSCAMP5蛋白活性的多肽。在本专利技术的第五方面，提供了与上述的人hSCAMP5多肽特异性结合的抗体。还提供了可用于检测的核酸分子，它含有上述的多核苷酸中连续的10-5762个核苷酸。在本专利技术的第六方面，提供了模拟、促进、拮抗人hSCAMP5多肽活性的化合物，以及抑制人hSCAMP5多肽的表达的化合物。还提供了筛选和/或制备这些化合物的方法。较佳地，该化合物是人hSCAMP5多肽的编码序列或其片段的反义序列。在本专利技术的第七方面，提供了检测样品中是否存在hSCAMP5蛋白的方法，它包括将样品与hSCAMP5蛋白的特异性抗体接触，观察是否形成抗体复合物，形成了抗体复合物就表示样品中存在hSCAMP5蛋白。在本专利技术的第八方面，提供了一种检测与人hSCAMP5多肽异常表达相关的疾病或疾病易感性的方法，该方法包括检测编码所述多肽的核酸序列中是否存在突变。在本专利技术的第九方面，提供了本专利技术多肽和编码序列的用途。例如本专利技术多肽可被用于筛选促进人hSCAMP5多肽活性的激动剂，或者筛选抑制人hSCAMP5多肽活性的拮抗剂、或者被用于肽指纹图谱鉴定。本专利技术的人hSCAMP5蛋白的编码序列或其片段，可被作为引物用于PCR扩增反应，或者作为探针用于杂交反应，或者用于制造基因芯片或微阵列。在本专利技术的第十方面，提供了一种药物组合物，它含有安全有效量的本专利技术的人hSCAMP5多肽或其激动剂、拮抗剂以及药学上可接受的载体。这些药物组合物可治疗原发性心肌病、肝功能衰竭等病症。本专利技术的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。附图说明图l显示了hSCAMP5的正常组织Northern印迹分布。图2显示了为hSCAMP5在多种细胞系内的RT-PCR分布。具体实施例方式本专利技术人在人骨髓基质细胞的cDNA大规模测序中发现了并分离了hSCAMP5。hSCAMP5与已知的SCAMP分子具有较高的同源性，Northern杂交显示hSCAMP5在正常人体组织内广泛分布，在腺体内有较高的表达，在胃、脊髓、甲状腺和肾上腺等组织均有较高表达。RT-PCR分析显示，hSCAMP5多种细胞系内均有较高的表达。因此，可以确定hSCAMP5是一种新的在细胞生长发育中以及在肿瘤细胞的生长发育中起着重要作用的分子。hSCAMP5可能在肿瘤、糖尿病、内分泌系统的其他疾病和神经系统的诊断、治疗等多个领域具有重要的开发和应用价值。在本专利技术中，术语“hSCAMP5蛋白”、“hSCAMP5多肽”或“人分泌相关膜蛋白5”可互换使用，都指具有人分泌相关膜蛋白5氨基酸序列(SEQ ID NO2)的蛋白或多肽。如本文所用，“分离的”是指物质从其原始环境中分离出来(如果是天然的物质，原始环境即是天然环境)。如活体细胞内的天然状态下的多聚核苷酸和多肽是没有分离纯化的，但同样的多聚核苷酸或多肽如从天然状态中同存在的其他物质中分开，则为分离纯化的。如本文所用，“分离的hSCAMP5蛋白或多肽”是指hSCAMP5多肽基本上不含天然与其相关的其它蛋白、脂类、糖类或其它物质。本领域的技术人员能用标准的蛋白质纯化技术纯化hSCAMP5蛋白。基本上纯的多肽在非还原聚丙烯酰胺凝胶上能产生单一的主带。本专利技术的多肽可以是重组多肽、天然多肽、合成多肽，优选重组多肽。本专利技术的多肽可以是天然纯化的产物，或是化学合成的产物，或使用重组技术从原核或真核宿主(例如，细菌、酵母、高等植物、昆虫和哺乳动物细胞)中产生。根据重组生产方案所用的宿主，本专利技术的多肽可以是糖基化的，或可以是非糖基化的。本专利技术的多肽还可包括或不包括起始的甲硫氨酸残基。本专利技术还包括人hSCAMP5蛋白的片段、衍生物和类似物。如本文所用，术语“片段”、“衍生物”和“类似物”是指基本上保持本专利技术的天然人hSCAMP5蛋白相同的生物学功能或活性的多肽。本专利技术的多肽片段、衍生物或类似物可以是(i)有一个或多个本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种分离的人分泌相关膜蛋白ｈＳＣＡＭＰ５多肽，其特征在于，它包含：具有ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２氨基酸序列的多肽、或其保守性变异多肽、或其活性片段、或其活性衍生物。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陈涛涌，李楠，万涛，曹雪涛，
申请(专利权)人：第二军医大学免疫学研究所，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]