一类针对目的基因Rig-G的有效siRNA分子制造技术

本发明专利技术涉及一类能对目的基因Ｒｉｇ－Ｇ的表达进行有效干扰的小片段双链ＲＮＡ分子（ｓｉＲＮＡ）。本发明专利技术所公开的一种针对目的基因Ｒｉｇ－Ｇ的有效ｓｉＲ－ＮＡ，可以通过以下步骤制备得到：（１）在目的基因的ｃＤＮＡ序列中选择位点，合成ＤＮＡ模板；（２）体外转录，合成ＲＮＡ片段；或构建ｓｉＲＮＡ表达质粒。使用这些ｓｉＲＮＡ，可以有效地抑制Ｒｉｇ－Ｇ基因的表达，为建立Ｒｉｇ－Ｇ缺失型的细胞株模型奠定了基础，同时也有助于我们进一步认识Ｒｉｇ－Ｇ在维甲酸信号传导网络中的作用，从而深入揭示维甲酸诱导ＡＰＬ细胞分化的分子机制。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及分子遗传学、细胞生物学、血液学领域。具体地说，本专利技术涉及一类能对目的基因Rig-G的表达进行有效干扰的小片段双链RNA分子。
技术介绍
急性早幼粒细胞白血病(APL)是急性髓系白血病中一种临床表现较为凶险的亚型。我国医学界在国际上率先使用全反式维甲酸(ATRA)分化诱导治疗APL获得成功，成为肿瘤治疗史上一个全新的里程碑。为了阐明ATRA诱导APL细胞分化的机制，十多年来各国学者进行了大量的研究。但是迄今为止有关维甲酸的信号传导途径仍然是个迷。为了对这方面的研究有所突破，这些年来，我们上海血液学研究所一直致力于APL细胞分化过程中有关维甲酸受体靶基因的研究。Rig-G基因是我们实验室利用差示PCR技术从急性早幼粒白血病细胞株NB4中克隆得到的一个可被维甲酸(ATRA)诱导表达的基因，在未经ATRA处理时，Rig-G在NB4细胞中的表达很低，几乎不能被检测到，而经ATRA处理12小时后，其表达水平明显上升，24小时后达到高峰，并可持续至72小时以后(见图1)。通过酵母双杂交技术我们筛选到了一些能与Rig-G发生相互作用的蛋白，其中JAB1和PIAS3两个蛋白在细胞本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种针对目的基因Ｒｉｇ－Ｇ有效ｓｉＲＮＡ，其特征在于：（１）在目的基因的ｃＤＮＡ序列中选择位点，合成ＤＮＡ模板：（２）体外转录、合成ＲＮＡ片段。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：童建华，肖澍，贾培敏，
申请(专利权)人：上海第二医科大学附属瑞金医院，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]