一种Exiguobacterium sp. MY02菌株的嘧啶核苷磷酸化酶基因及其制备方法技术

技术编号:1741945 阅读:272 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
一种嘧啶核苷磷酸化酶的结构基因,其特征在于它是编码Exiguobacterium  sp.MY02菌株的嘧啶核苷磷酸化酶的结构基因。制备该基因时,首先使用PCR法筛选Exiguobacterium  sp.MY02菌株的基因组DNA文库并测序,初步确定嘧啶核苷磷酸化酶的基因序列;进一步在大肠杆菌中重组表达该基因、纯化重组酶并测定活性,结果表明所发明专利技术的嘧啶核苷磷酸化酶基因能编码生产重组嘧啶核苷磷酸化酶,且重组酶不仅具有磷酸化活性还具有较高转移酶活性,具有工业应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种Exiguobacterium sp.MY02菌株的嘧啶核苷磷酸化酶基因和用Exiguobacterium sp.MY02菌株制备嘧啶核苷磷酸化酶基因的方法。
技术介绍
近三十年来,在代谢中起着重要作用的核苷类活性物质(包括自然结构碱基、核苷、核苷酸结构类似物和聚合物)是当今人类治疗病毒、肿瘤、爱滋病等不可缺少的临床药物,目前已开发的核苷类抗病毒化合物已有数千种。5’-脱氧-5-氟尿苷(5’-deoxy-5-fluorouridine,5’-dFUrd)是一种良好的抗肿瘤新药,我国于1995年正式用于临床,临床效果好,市场需求量大,目前主要采用化学合成法大量生产。但是,在化学生产过程中(1)首先需要将碱基和核糖残基的部分基团进行保护;(2)产物为多种核苷异构体和其它副产品的混合物,需要进一步分离,因此耗时费力、收率很低(约10%);(3)对环境污染严重。所以,针对已有生产技术的缺陷,寻求新型方法满足大量合成5’-dFUrd的需要成为新的研究热点。5-氟尿苷是合成抗癌药物5’-dFUrd的重要中间体,具有一定的抗癌活性。5-氟尿苷中的核糖在5’位上脱氧后即可得到5本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种嘧啶核苷磷酸化酶基因,其特征在于它是Exiguobacteriumsp.MY02菌株嘧啶核苷磷酸化酶的结构基因,核苷酸序列为:1atgcgtatggtagatttgattgcaacaaaacgagacggtggcgaactcgcaacagctgat6061attcaagcaatggtagaaggattcacgaatggtgagattccagattaccaaatgtcagcg120121atgtcgatggcgattttctatcaaggaatgtcagatcgtgaaatcgctgatttgacgatg180181gcgatggtcaactcgggcgacgtgatcgacctttcacg...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:阮期平韩文君古静燕赵丽
申请(专利权)人:绵阳师范学院
类型:发明
国别省市:51[中国|四川]

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