p53四聚化结构域介导的四价单链抗体制造技术

本发明专利技术涉及一种基因工程四价抗体，其特征在于由抗ＴＮＦ－α抗体、ＨＳＡ连接肽和人类抑癌蛋白ｐ５３四聚化结构域依次连接而成。更具体地说，本发明专利技术涉及抗ＴＮＦ－α的基因工程四价单链抗体：ＴＮＦ－ＴｅＡｂ，该抗体是将一种抗人ＴＮＦ－α单链抗体片段和介导人类抑癌蛋白ｐ５３的四聚体形成的结构域片段通过ＨＳＡ连接肽串联在一起构建而成的，并可在其Ｃ－末端添加Ｃ－ｍｙｃ标签和组氨酸标签（（Ｈｉｓ）↓［６］－ｔａｇ）。本发明专利技术还涉及一种构建、表达、纯化和复性该抗体的方法；该抗体的编码ＤＮＡ序列、表达载体和含有该载体的宿主细胞。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因工程抗体领域，更具体地，涉及一种p53四聚化结构域介导的四价单链抗体，特别是基因工程抗人TNF-α四价单链抗体；这种抗体的构建、表达、纯化和复性方法；含有该抗体编码序列的载体和含有该载体的宿主细胞。
技术介绍
肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α，TNF-α)是上世纪70年代中叶发现的一个细胞因子，最初发现它能引起某些肿瘤组织的出血性坏死，现在研究表明其除了具有抗肿瘤作用外，还在机体的免疫，炎症和病理反应中起着非常重要的作用(参考文献1-2)。TNF-α的拮抗剂包括中和性抗体被认为是多种急慢性炎症疾病，如类风湿性关节炎、牛皮癣、局限性回肠炎和急性内毒素休克等(参考文献3-5)的有效治疗剂。早在1988年，人们在对类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis，RA)滑膜组织细胞的体外培养物的研究中发现，在无外界刺激剂存在时，前炎性细胞因子的产生仍然可持续几天，提示在该培养体系中有内源性刺激信号调节细胞因子的产生(参考文献6)，随后在该培养体系中加入TNF-α的抗体，其它几种前炎性细胞因子如IL-1、IL-6、IL-8和GM-C本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种四价的单链抗体，其特征在于由单链抗体与介导人类抑癌蛋白ｐ５３四聚体形成的结构域（四聚化结构域）构成的融合蛋白在表达后自然聚合而成。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：黄华樑，刘梦元，王祥斌，尹长城，林晴，
申请(专利权)人：北京安波特基因工程技术有限公司，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]