含16型HPV反义E7基因的重组腺相关病毒的构建方案及用途制造技术

本发明专利技术公开了一种含人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）１６型反义Ｅ７基因的腺相关病毒构建方案，以及用该方案获取的一种重组腺相关病毒构建体在肿瘤治疗中的具体用途。用ＰＣＲ法扩增全长、酶切、连接、同源重组、转染、腺相关病毒纯化等技术，获得一种重组腺相关病毒构建体，其技术特征在于：在ＮｏｔＩ酶切位点中反向插入全长外源性ＨＰＶ１６型Ｅ７基因ｃＤＮＡ片段。该种重组腺相关病毒构建体具有以下突出的技术优势：能定点整合入染色体；插入的反向外源性基因为全长片段，特异性好；对感染１６型ＨＰＶ的细胞具有强效应，具备预防效能。该重组腺相关病毒构建体为肿瘤基因治疗和预防提供了一种理想的基因靶点特异性治疗和预防应用途径。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种重组腺相关病毒构建体，该构建体命名为ｒＡＡＶ－ＨＰＶ１６Ｅ７ＡＳ，其技术特征在于：在野生型ＡＡＶ５ＮｏｔＩ酶切位点中反向插入３１５ｂｐ的外源性１６型ＨＰＶ　Ｅ７　ｃＤＮＡ片段，相当于ＨＰＶ１６　Ｅ７　ｍＲＮＡ的８５８－５４４ｎｔ ，其他基因组结构与野生型ＡＡＶ５完全相同。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：马丁，王世宣，周剑峰，卢运萍，邬素芳，
申请(专利权)人：深圳市奥尼克斯基因技术有限公司，
类型：发明
国别省市：94[中国|深圳]