一种千金子二萜醇酯有效部位及其制备方法技术

本发明专利技术公开了千金子二萜醇酯有效部位及其制备方法。千金子经压榨得到千金子油，然后用甲醇提取其中二萜醇酯类化合物，提取液减压回收溶剂，得到千金子二萜醇酯有效部位。用高效液相色谱法进行含量测定，其中二萜醇酯类化合物的含量之和大于50％。

The effective part and preparation method of a kind of two terpenol ester of gold

The invention discloses the effective parts of the two terpene alcohol ester of the gold seed and the preparation method. Semen Euphorbia oil was extracted by pressing, and then two terpene alcohol esters were extracted from methanol, and the effective fraction of two triterpene alcohol was obtained by decompressing and recovering solvent. The content of two terpenol esters was more than 50% by HPLC.

【技术实现步骤摘要】
一种千金子二萜醇酯有效部位及其制备方法
本专利技术涉及千金子中二萜醇酯有效物质的提取，属于天然药物化学研究领域。
技术介绍
千金子为大戟科植物续随子(EuphorbiaLathyrisL.)的干燥成熟种子，夏、秋二季果实成熟时采收，除去杂质，干燥。用于水肿、疲饮、二便不通、血瘀经闭，外用治顽癣、赘疣及虫蛇咬伤。最近研究表明其在治疗白血病、食管癌、皮肤癌等疾病方面有显著疗效。续随子原产欧洲，我国久已引种栽培，现各地有逸生，多生于向阳山坡草丛或灌木丛中。分布于黑龙江、吉林、辽宁、河北、山西、河南、江苏、浙江、福建、台湾、四川、云南等省。自20世纪40年代开始，国外学者已经对千金子化学成分进行了研究。千金子主要含脂肪酸，二萜醇酯类，甾类，香豆素类以及黄酮等成分。续随子油脂肪酸成分主要有油酸、棕榈酸、亚油酸、α-亚麻酸、花生烯酸、硬脂酸、豆蔻酸、棕榈烯酸、十七碳烯酸、γ-亚麻酸等，其中以油酸、棕榈酸、亚油酸、α-亚麻酸为主，总含量达96％以上。关于二萜酯类成分的研究报道较多，此类成分在大戟属植物中普遍存在，特别是在其白色乳汁中分布较多。迄今为止已有20余种不同碳骨架类型的300多种大戟二萜酯被分离鉴定,且包括新碳骨架在内的新化合物仍在被发现。报道较多的大戟二萜酯包括巴豆萜烷型二萜酯、巨大戟烷型二萜酯、瑞香烷型二萜酯、千金二萜烷型二萜酯、假白榄酮型二萜酯、松香烷型酯等。千金子中的二萜醇酯主要含有巨大戟烷型二萜酯和千金二萜烷型二萜酯两大类，已有人从千金子中分得如下一些二萜醇酯：6，17-环氧千金二萜醇-5，15-二乙酸-3-苯乙酸酯，7-羟基-千金二萜醇-5，15-二乙酸-3，7-二苯甲酸酯，千金二萜醇-5，15-二乙酸-3-苯甲酸酯，千金二萜醇-3，15-二乙酸-5-烟酸酯，7-羟基-千金二萜醇-5，15-二乙酸-3-苯甲酸酸-7-烟酸酯，17-羟基-异千金二萜醇-5，15，17-三乙酸-3-苯甲酸酯，巨大戟萜醇-20-棕榈酸酯，巨大戟萜醇-1-H-3，4，5，8，9，13，14-七去氢-3-十四酸酯，巨大戟萜醇-3-棕榈酸酯，17-羟基-岩大戟-15，17-二-乙酸-3-O-桂皮酸酯等。千金子中还含有菜油甾醇，豆甾醇,β-谷甾醇,△7-豆甾醇等甾醇类成分，双七叶内酯，异双七叶内酯，秦皮乙素，七叶树甙等香豆素类成分以及山奈酚-3-葡萄糖醛酸甙黄酮类成分。现代药理学研究表明千金子具有抗菌作用、镇痛作用、抗炎作用、利尿作用、致泻作用、抗肿瘤作用。毒性研究结果表明千金子水煎液(每毫升相当于生药0.2g)100％死亡量为2.5mg·kg-1，0死亡率为1.3mg·kg-1，其LD50为1.7950g·kg-1，95％的可信限为1.6211～1.9879。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供千金子二萜醇酯有效部位及其制备方法。千金子中含有大量油脂，利用常规的有机溶剂提取法对千金子中的化学成分进行提取，其中除了二萜醇酯类，甾类，香豆素类以及黄酮等成分外，绝大部分为油脂类成分。利用柱层析等手段可以从中分得二萜醇酯类单体成分或千金子总二萜醇酯，但由于硅胶和有机溶剂使用量大，不仅会造成环境污染，对操作人员也会带来较大危害，而且产品成本高。为此我们专利技术了如下千金子二萜醇酯有效部位的制备方法。本专利技术的具体内容如下。(1)二萜醇酯类成分的提取分离及结构鉴定提取千金子中二萜醇酯类成分可以采用传统的水煎煮提取或有机溶剂回流提取等方法。由于千金子中二萜醇酯类成分极性较低，故更适合采用有机溶剂回流提取方法进行提取，当然也可以采用有机溶剂浸泡提取、超声提取等方法。但是本专利技术没有采用上述方法，而是采用了压榨法进行提取。对有机溶剂回流提取和压榨提取得到的提取物进行的对比研究结果表明，两种提取法获得的提取物均是油状物(简称千金子油)，提取率以及其中千金子二萜醇酯类成分的种类和含量基本一致。但是与有机溶剂回流提取相比，压榨法不仅降低了提取成本，减少了环境污染，还能够避免由于回流提取过程中二萜醇酯类成分受热分解(水解)等缺陷。本专利技术从千金子中共分离鉴定7种二萜醇酯类成分，它们分别是6,17-环氧千金二萜醇-5,15-二乙酸-3-苯乙酸酯，千金二萜醇-5,15-二乙酸-3-苯甲酸酯，7-羟基-千金二萜醇-5,15-二乙酸-3,7-二苯甲酸酯，17-羟基-异千金二萜醇-5,15,17-三乙酸-3-苯甲酸酯，17-羟基-异千金二萜醇-15,17-二乙酸-3-苯乙烯酸酯，千金二萜醇-5,15-二乙酸-3-烟酸酯和千金二萜醇-5,15-二乙酸-3-苯乙酸酯，结构式如下：6,17-环氧千金二萜醇-5,15-二乙酸-3-苯乙酸酯7-羟基-千金二萜醇-5,15-二乙酸-3,7-二苯甲酸酯千金二萜醇-5,15-二乙酸-3-苯甲酸酯L7a(17-羟基-异千金二萜醇-15,17-二乙酸-3-苯乙烯酸酯17-羟基-异千金二萜醇-5,15,17-三乙酸-3-苯甲酸酯千金二萜醇-5,15-二乙酸-3-烟酸酯千金二萜醇-5,15-二乙酸-3-苯乙酸酯(2)萃取用有机溶剂的筛选从压榨得到的千金子油中分离纯化二萜醇酯类成分可以采用柱层析等方法。但此方法会用到大量的硅胶尤其是石油醚、乙酸乙酯、甲醇等有机溶剂。为了克服这个问题，我们专利技术了用一种有机溶剂直接从千金子油中提取(萃取)出二萜醇酯类成分的方案。为此首先筛选了与千金子油互不相溶的有机溶剂。结果环己烷、四氢呋喃、正丙醇、异丙醇、正己醇、正戊醇、正庚醇、三氯甲烷、丙酮、甲醇、乙醇、乙腈、正丁醇、1，2-丙二醇等有机溶剂中与千金子油互溶的溶剂有环己烷、四氢呋喃、正丙醇、异丙醇、正己醇、正戊醇、正庚醇、三氯甲烷、丙酮；与千金子油不互溶且油在下层的溶剂有甲醇、乙醇、乙腈、正丁醇；与千金子油不互溶且油在上层的溶剂有1，2-丙二醇。接着本专利技术对与千金子油不互溶的有机溶剂进行了筛选，结果发现甲醇的效果最好。在此基础上本专利技术又对甲醇萃取的方法进行了优化，发现利用甲醇水混合溶液进行萃取，不仅分层快而且油脂进入到甲醇层较少。最终本专利技术发现90％左右的甲醇水溶液萃取效果最佳，从而完成了本专利技术。具体实施方式实施例1取千金子1000克，常温下液压压榨得千金子油400ml，取千金子油100ml，用200ml甲醇萃取3次，取上层萃取液减压回收甲醇。产物利用高效液相色谱仪进行含量测定，外标法以峰面积计算含量(高效液相色谱仪为Agilent1100Series高效液相色谱仪，色谱柱为Prevail-C18色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)，色谱条件：流动相为甲醇：水(75：25)；流速1.0mL·min-1；检测波长280nm；柱温25℃,进样量20μL)。结果二萜醇酯类成分6,17-环氧千金二萜醇-5,15-二乙酸-3-苯乙酸酯，千金二萜醇-5,15-二乙酸-3-苯甲酸酯，7-羟基-千金二萜醇-5,15-二乙酸-3,7-二苯甲酸酯，17-羟基-异千金二萜醇-5,15,17-三乙酸-3-苯甲酸酯，17-羟基-异千金二萜醇-15,17-二乙酸-3-苯乙烯酸酯，千金二萜醇-5,15-二乙酸-3-烟酸酯和千金二萜醇-5,15-二乙酸-3-苯乙酸酯的含量之和为83.2％。实施例2取千金子1000克，45℃下液压压榨得千金子油400ml，取千金子油100ml，用300m本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种千金子二萜醇酯有效部位，其特征在于其中二萜醇酯类化合物的含量之和大于50％。

【技术特征摘要】
1.一种千金子二萜醇酯有效部位，其特征在于其中二萜醇酯类化合物的含量之和大于50％。2.权利要求1所述的千金子二萜醇酯有效部位，其特征在于所述二萜醇酯类化合物是6,17-环氧千金二萜醇-5,15-二乙酸-3-苯乙酸酯，千金二萜醇-5,15-二乙酸-3-苯甲酸酯，7-羟基-千金二萜醇-5,15-二乙酸-3,7-二苯甲酸酯，17-羟基-异千金二萜醇-5,15,17-三乙酸-3-苯甲酸酯，17-羟基-异千金二萜醇-15,17-二乙酸-3-苯乙烯酸酯，千金二萜醇-5,15-二乙酸-3-烟酸酯和千金二萜醇-5,15-二乙酸-3-苯乙酸酯中的任何两种、三种、四种、五种、六种、七种的含量之和大...

【专利技术属性】
技术研发人员：金永日，包龙跃，李绪文，丁长江，
申请(专利权)人：吉林大学，
类型：发明
国别省市：吉林,22