一种SN-38的UPLC分析方法技术

本发明专利技术具体涉及一种SN‑38有关物质测定的UPLC方法，色谱柱：ACQUITY UPLC BEH C18；流动相A为0.01%三氟乙酸的水溶液，流动相B为0.01%三氟乙酸的甲醇溶液，梯度洗脱，流速0.5ml/min，柱温25度，检测波长254nm在该方法条件下，SN‑38及其有关物质得到了有效分离，方法学结果均符合分析测定要求，可快速可靠的检测出SN‑38的杂质，操作简单，重现性好，灵敏度高，可更好的控制SN‑38产品的质量。

A method of UPLC analysis for SN-38

The present invention relates to a method for determination of UPLC, SN 38 related substances column: ACQUITY UPLC BEH C18; mobile phase A 0.01% aqueous solution of three fluorine acetic acid, mobile phase B was 0.01% three fluorine acetic acid methanol solution, gradient elution, flow rate 0.5ml/min, the column temperature was 25 degrees, wave detection long 254nm in the method under the condition of SN 38 and its related substances were effectively separated from the methodological analysis results were in line with the requirements, can quickly and reliably detect SN 38 impurities, simple operation, good reproducibility, high sensitivity, quality can be better controlled SN products 38.

【技术实现步骤摘要】
一种SN-38的UPLC分析方法
本专利技术涉及本专利技术涉及一种医药中间体有关物质的检测领域，特别涉及SN-38（7-乙基-10-羟基喜树碱）的分析方法领域。
技术介绍
伊立替康（Irinotecan）是一种具有广泛应用前景的广谱高效抗肿瘤新药，其主要半合成工艺原料是喜树碱；喜树碱是1966年有wall等首次从我国引种的植物珙桐科喜树杆中分离得到的具有抗癌活性的生物碱，在治疗肝癌、胃癌、结肠癌、膀胱癌和白血病等方面均有疗效，但因伴有尿血、尿急、尿频等毒副作用而受到限制。而SN-38是喜树碱类药物伊立替康的关键中间体。美国药典对伊立替康有收载，采用HPLC法对有关物质进行测定，每个样品分析为35分钟，流速为1.0ml/min，采用离子对缓冲盐；国内外对SN-38的分析均未有报到，以前一直参照美国药典中伊立替康的检测方法测定SN-38，针对性和时效性都受限制，而以天然萃取产品喜树碱为起始物料的半合成工艺中有关物质的控制是影响产品质量的关键点，非常重要。
技术实现思路
为了弥补国内没有测定SN-38有关物质方法的空白，本专利技术采用超高效液相色谱柱建立了SN-38有关物质的检查测定方法，能更好的控制SN-38生产中的有关物质，确保产品质量，该方法只需要10分钟，就可以针对性的将原料和工艺中可能产生的其他5种有关物质一起检测，相比美国药典伊立替康方法分析一个样品需要55min，分析时间大大缩短，该方法中流速为0.5ml/min，相比美国药典1.0ml/min，大大的减少了试剂消耗，更为环保、经济、快速，不使用离子对缓冲盐也使方法更简便。本专利技术经多次反复试验和优化而建立的超高效液相色谱法测定SN-38有关物质的方法专属性强、准确、灵敏度高、快速、能有效控制SN-38的产品质量。本专利技术涉包括以下步骤：(1)样品溶液配制：精密称取供试品20mg至100ml容量瓶中，加入80ml甲醇置于60℃水浴超声使溶解，放至室温后用甲醇稀释至刻度，摇匀，过滤，作为供试品溶液。(2)超高效液相色谱测定：将对照品溶液和样品溶液进行超高效液相色谱测定，色谱柱：ACQUITYUPLCBEHC18；流动相A为0.01%三氟乙酸的水溶液，流动相B为0.01%三氟乙酸的甲醇溶液，按下表进行梯度洗脱，流速0.5ml/min，柱温25度，检测波长254nm，系统适用性：理论板数（N）不小于6000，分离度（R）应大于1.5，拖尾因子（T）应不大于2.0。流动相梯度洗脱程序附图说明图1SN-38及其有关物质的化学结构图（1.10-羟基喜树碱，2.喜树碱，3.SN-38，4.7-乙基喜树碱，5.7,11-二乙基喜树碱，6.7,11-二乙基-10羟基喜树碱，7.N-氧化－7－乙基喜树碱）。图2混合对照溶液色谱图（1.10-羟基喜树碱，2.喜树碱，3.SN-38，4.7-乙基喜树碱，5.7,11-二乙基喜树碱，6.7,11-二乙基-10羟基喜树碱，7.N-氧化－7－乙基喜树碱）。具体实施方式为了能够更清楚地理解本专利技术的
技术实现思路
，特举以下实施例详细说明。实施例1：仪器与试剂WatersACQUITY超高效液相色谱仪，所用试剂均为色谱纯，水为超纯水。SN-38样品3批。色谱条件色谱柱：ACQUITYUPLCBEHC18（1.7um，2.1X50mm），流动相A为0.01%三氟乙酸的水溶液，流动相B为0.01%三氟乙酸的甲醇溶液，按下表进行梯度洗脱，流速0.5ml/min，柱温25度，检测波长254nm，系统适用性：理论板数（N）不小于6000，分离度（R）应大于1.5，拖尾因子（T）应不大于2.0。流动相梯度洗脱程序样品溶液配制：精密称取供试品20mg至100ml容量瓶中，加入80ml甲醇置于60℃水浴超声使溶解，放至室温后用甲醇稀释至刻度，摇匀，过滤，作为供试品溶液。系统适用性：理论板数（N）不小于6000，分离度（R）应大于1.5，拖尾因子（T）应不大于2.0。各杂质峰的相对保留时间与校正因子在此说明书中，本专利技术已参照其特定的实施例作了描述。但是，很显然仍可以作出各种修改和变换而不背离本专利技术的精神和范围。因此，说明书和附图应被认为是说明性的而非限制性的。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种SN‑38有关物质测定的UPLC方法，其特征在于包含下列步骤：a) 样品溶液配制：精密称取供试品20mg至100ml容量瓶中，加入80ml甲醇置于60℃水浴超声使溶解，放至室温后用甲醇稀释至刻度，摇匀，过滤，作为供试品溶液；b) 超高效液相色谱测定：将对照品溶液和样品溶液进行超高效液相色谱测定，色谱柱：ACQUITY UPLC BEH C18；流动相A为0.01%三氟乙酸的水溶液，流动相B为0.01%三氟乙酸的甲醇溶液，按下表进行梯度洗脱，流速0.5ml/min，柱温25度，检测波长254nm，系统适用性：理论板数（N）不小于6000，分离度（R）应大于1.5，拖尾因子（T）应不大于2.0；流动相梯度洗脱程序

【技术特征摘要】
1.一种SN-38有关物质测定的UPLC方法，其特征在于包含下列步骤：a)样品溶液配制：精密称取供试品20mg至100ml容量瓶中，加入80ml甲醇置于60℃水浴超声使溶解，放至室温后用甲醇稀释至刻度，摇匀，过滤，作为供试品溶液；b)超高效液相色谱测定：将对照品溶液和样品溶液进行超高效液相色谱测定，色谱柱：...

【专利技术属性】
技术研发人员：李涛，
申请(专利权)人：上海朴颐化学科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31