制备有义RNA长链的方法技术

技术编号:1716280 阅读:330 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术提供一种合成并扩增有义RNA链的方法。本发明专利技术的方法包括合成探针,所述特征可用于探测寡核苷酸和cDNA微阵列,以及减法和标准化文库。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及产生长的有义(sense)RNA链的方法。
技术介绍
人类基因组完整序列的完成提供了用于生物学研究的大量的DNA序列信息。人类基因组信息最显著的应用之一是微阵列技术。利用寡核苷酸或互补DNA(cDNA)的高密度阵列,可以从与疾病、癌症、细胞循环、与环境接触等有关的细胞活性产生大量的基因表达图谱。微阵列可以由cDNA、基因组DNA制得,最近发现可以由寡核苷酸引物制得。见例如Lockhart等,Nature 105827-836(2000)。先前,DNA片段被点在尼龙膜上,与放射性标记的探针杂交以筛选不同表达的基因。近来,采用玻璃片作为DNA点阵的基质,用荧光进行更有效的检测。研究显示基于寡核苷酸的微阵列比基于cDNA的微阵列在靶序列设计和检测方面有更好的特异性。至少有三种方法被用于制备测量基因表达的标记物质。例如,RNA可直接用光生物素化方法标记。或者,被标记的核苷酸可在逆转录反应中掺入cDNA,或者被标记的核苷酸可通过体外转录掺入反义RNA中。见例如Van Gelder等,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 871663-1667(1990)。在此研究领域本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种产生长的有义RNA链的方法,该方法包括:提供包含5’和3’端的第一cDNA链;将包含启动子调节元件的启动子引物掺入第一cDNA链的3’端;起始从cDNA的转录,由此产生长的有义链。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:许军普秦晓华赵峰
申请(专利权)人:北京雅康博生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:11[中国|北京]

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