兔病毒性出血症病毒衣壳蛋白基因重组杆状病毒及疫苗制造技术

技术编号:1711124 阅读:297 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术涉及兔病毒性出血症病毒衣壳蛋白重组杆状病毒及基因工程疫苗,属于生物制药领域。通过RT-PCR扩增兔病毒性出血症病毒衣壳蛋白VP60全基因,通过分子生物学技术构建杆状病毒重组载体,转染Sf9细胞,使VP60基因获得表达,然后以重组杆状病毒表达的兔病毒性出血症病毒衣壳蛋白VP60作为抗原,加上相应的佐剂制成兔病毒性出血症的基因工程疫苗。本发明专利技术可以提供一种免疫效果好、工艺简便的兔病毒性出血症病毒衣壳蛋白基因工程疫苗,用于预防控制兔病毒性出血症。

【技术实现步骤摘要】
专利说明兔病毒性出血症病毒衣壳蛋白基因重组杆状病毒及疫苗
本专利技术涉及兔病毒性出血症病毒衣壳蛋白重组杆状病毒及基因工程疫苗,属于生物制药领域。
技术介绍
兔病毒性出血症,又称兔瘟,是由兔病毒性出血症病毒(RHDV)引起的一种以急性、高度传染性、大面积死亡为特征的兔传染病,感染兔通常48~72h死亡,主要特征为传染性极强、呼吸系统出血、肝坏死、脏器水肿、淤血和出血等变化,给全世界养兔业造成了巨大的经济损失。国际兽医局将该病列为B类传染病,我国农业部96号令颁布为二类疫病。RHD出现比较突然且流行速度极快,现有研究结果表明世界范围内的所有RHDV分离株均为同一血清型,无论是遗传特性还是抗原性都很稳定。目前用兔病毒性出血症组织灭活疫苗免疫是预防该病的主要措施,疫苗的制备过程中必须以RHDV感染致死的兔内脏组织为原料。近年来,随着兔产品等行业的兴起以及其他动物疫苗等对家兔的需求的增加,市场对兔病毒性出血症疫苗的需求量增加了许多,但是用于制备组织灭活疫苗的非免疫兔的供应量却很不稳定,造成传统的组织灭活苗的成本不断增加,加之组织灭活苗存在散播强毒的潜在危险等种种缺点,而RHDV本文档来自技高网...

【技术保护点】
兔病毒性出血症病毒衣壳蛋白基因重组杆状病毒,其特征是,由以下步骤构建而成:    1)兔病毒性出血症病毒总RNA的提取用焦碳酸二乙酯DEPC水按体积比1∶10加入发生兔病毒性出血症的兔肝脏组织中,研磨成悬液,装入用DEPC处理过的1.5mL  EP管中,于-20℃反复冻融3次,在高速冷冻离心机上,以7200r/min,离心20min,取上清200μL,加入Trizol  800μL,振荡混匀后,室温放置10min,加入氯仿210μL,剧烈振荡后,室温放置1min,4℃,10000r/min离心15min,取上层水相750μL,加入0.5mL异丙醇,混匀,-20℃放置15min,4℃10000r...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:王芳薛家兵范志宇胡波徐为中张则斌何孔旺
申请(专利权)人:江苏省农业科学院
类型:发明
国别省市:84[中国|南京]

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