金针菇液体菌种的培养方法技术

本发明专利技术公开了金针菇液体菌种的培养方法，具体步骤为：将马铃薯去皮，切碎，加水煮沸，过滤得马铃薯汁液；将豆粕与等质量的水混合，酶解，灭酶，过滤，浓缩得豆粕酶解液；将味精废液浓缩得味精废液浓缩液；按配方量取马铃薯汁液、豆粕酶解液、味精废水、琼脂、磷酸二氢钾、维生素B1、硫酸镁，混合均匀，灭菌，即得金针菇液体培养基；将菌种接种到培养液中，通入净化空气进行培养，即可制备金针菇液体菌种。有益效果为：该培养过程能够满足菌种繁殖营养需要，增强菌种的萌发能力，使菌种生长速度快，具有菌种生产周期短、菌种质量容易控制、接入栽培瓶或袋装培养基上发菌速度快、出菇整齐、产量高等优点。

Culture method of liquid strain of Flammulina velutipes

The invention discloses a culture method of mushroom liquid spawn, which comprises the following steps: the potatoes peeled, chopped and boiled in water, filtered potato juice; mixed, soybean meal and other water quality of enzymolysis, inactivation, filtration, concentration of soybean meal hydrolysate; the concentration of monosodium glutamate wastewater of monosodium glutamate waste concentrate take potato juice; according to the formula, the amount of soybean meal hydrolysate, monosodium glutamate wastewater, agar, potassium dihydrogen phosphate, vitamin B1, Magnesium Sulfate, mixing, sterilization, the culture liquid of Flammulina velutipes; inoculated into the culture medium, the air purification were cultured to prepare needle mushroom liquid spawn. The beneficial effect of the training process can meet the nutritional needs of bacteria breeding, enhance the germination ability of bacteria, the bacteria strains with fast growth, short production cycle, easy quality control, bacteria culture bottle or bag access medium spawnrunning fast and orderly musheroom, high yield.

【技术实现步骤摘要】
金针菇液体菌种的培养方法
本专利技术涉及食用菌栽培
，尤其是涉及金针菇液体菌种的培养方法。
技术介绍
金针菇学名毛柄金钱菌，又称毛柄小火菇、朴菇、冬菇、智力菇、毛柄金钱菇、金菇等，在植物分类学上，属真菌门，担子菌纲，伞菌目，口蘑科，金钱菌属。金针菇在自然界中分布广泛，中国、日本、俄罗斯、欧洲、北美洲、澳大利亚等地均有栽培。金针菇不含叶绿素，不具有光合作用，不能制造碳水化合物，完全可在黑暗环境中生长，必须从培养基中吸收现成的有机物质，如碳水化合物、蛋白质和脂肪等的降解物才能生长，为腐生营养型，是一种异养生物川。金针菇是一种木材腐生菌，易生长在柳、榆、白杨树等阔叶树的枯树干及树桩上，其在生长时先是由孢子萌发生成菌丝，菌丝通常呈白色绒毛状，有横隔和分枝，很多菌丝聚集在一起形成菌丝体，菌丝生长到一定阶段便会形成子实体，子实体的主要功能是产生抱子，用于繁殖后代。金针菇是秋冬与早春栽培的食用菌，以其菌盖滑嫩、柄脆、营养丰富、味美适口而著称于世。液体深层发酵培养是采用生物发酵培养设备，通过液体深层培养即发酵的方式生产食用菌菌球，作为食用菌栽培的种子或作为有效成分提取分离及深加工的原料。食用菌液体发酵可以获得大量的菌丝体，其营养和活性成分含量比固体发酵获得的子实体中更高`屯，且在液体发酵过程中分泌的胞外产物也有很多的活性成分，因此液体培养具有固体培养不可比拟的优势：生产周期短、营养利用率高、产品种性稳定和产物污染小等。近年来，随着液体发酵技术的日臻成熟，大量的食用菌采用了液体发酵培养技术，以获得更多的菌丝体和胞外发酵产物，用于提取功能蛋白质、多糖、生物碱、氨基酸等生理活性物质。现有技术如授权公告号为CN101773049B的中国专利技术专利，公开了金针菇液体菌种的培养方法，它包括如培养基配制，灭菌和接种培养等步骤，它的培养基包括豆柏粉、白砂糖、硫酸镁、磷酸二氢钾，将液体培养基加入外置热源的液体菌种培养罐内后，将培养罐推入灭菌锅灭菌，灭菌完成后冷却到室温接种，然后接无菌压缩空气培养。该方法的培养基配方合理，营养丰富，采用外置热源的液体菌种培养罐，液体培养基受热均匀，不会破坏营养成分，该方法培养的液体菌种生产周期短、质量容易控制、发菌速度快、出菇整齐、产量高，但是该培养基培养成本较高。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供制备方法简单可行，原料成本低，营养丰富全面，利于菌种吸收利用，含氮量充足，碳氮配比合理，增强菌种的萌发能力，使菌种生长速度快，缩短菌种生长周期的金针菇液体菌种的培养方法。本专利技术针对上述技术中提到的问题，采取的技术方案为：金针菇液体菌种的培养方法，包括马铃薯汁液制备、豆粕酶解液制备、味精废液浓缩液准备、培养基配制、接种培养，具体步骤为：马铃薯汁液制备：将马铃薯去皮，切碎，再加入马铃薯重量0.01-0.03%的活性多肽，以料液比为1:4-5加水煮沸30-40min，纱布过滤得马铃薯汁液，备用，上述活性多肽的氨基酸序列HSHCFCCGAAKCYLCRVLHPGKLNCSK，该活性多肽能够破坏马铃薯细胞的细胞膜物质，使细胞膜产生孔洞，改变细胞膜的渗透压，使细胞内成分物质能够快速完全释放出来，提高马铃薯汁的浸提速率和有效成分，增加培养基的营养成分；豆粕酶解液制备：将豆粕与等质量的水混合，调节pH值至8-9，随后添加6000-7000U/g的碱性蛋白酶，在50-60℃下酶解2-3h，灭酶，过滤，浓缩至50-60%，即得豆粕酶解液，该步骤可将大豆蛋白分解成大豆肽，大豆肽具有吸收速率快、能耗低、可避免氨基酸之间的吸收竞争和载体不易饱和的特点，以大豆肽的形式补充氨基酸，可改善金针菇菌种对氮的吸收，为金针菇菌种提供充足的氨基酸和氮源，加快金针菇菌种的吸收利用，提高菌种的生长速率和品质；味精废液浓缩液准备：将味精废液浓缩为固含为30-40%的浓缩液，即得味精废液浓缩液，备用，金针菇可利用浓缩液中的葡萄糖、谷氨酸、尿素、乙酸铵和硫酸铵等作为菌丝发酵生长的碳源或氮源物质，呈现正常的生长状态，金针菇对味精废水的处理效果较佳，COD去除率最高可达82%，利用味精废水培养金针菇是减少污染、提高资源利用率有效途径；培养基配制：按重量份取马铃薯汁液20-30份、豆粕酶解液15-22份、味精废水11-15份、琼脂0.2-0.3份、磷酸二氢钾0.02-0.04份、维生素B10.001-0.002份、硫酸镁0.01-0.02份，混合均匀，调节pH至6-7，放入高压灭菌器中，在压力0.1-0.15Mpa下灭菌55-65min，即得金针菇液体培养基，该培养基是废物再生利用，不污染环境，大幅度降低了排污费用，增加资源利用率，具有配制方便、成本低的特点，营养丰富，能为金针菇菌种提供充足的营养物质，为菌中提供了更适宜的生长环境，大大缩短了培养时间，适合产业化推广；接种培养：将菌种接种到培养液中，调节培养温度为18-20℃，按照通气量1.4-1.8V/(V.min)通入净化空气进行有氧培养3-4天，即可制备金针菇液体菌种，该培养过程能够满足菌种繁殖营养需要，能够加快金针菇菌种的吸收利用，增强菌种的萌发能力，使菌种生长速度快，长势强，菌丝粗壮、密集，具有菌种生产周期短、菌种质量容易控制、接入栽培瓶或袋装培养基上发菌速度快、出菇整齐、产量高等优点。与现有技术相比，本专利技术的优点在于：1）本专利技术培养基采用的配方合理，营养丰富，能够满足菌种繁殖营养需要，能够加快金针菇菌种的吸收利用，增强菌种的萌发能力，使菌种生长速度快，长势强，菌丝粗壮、密集，具有菌种生产周期短、菌种质量容易控制、接入栽培瓶或袋装培养基上发菌速度快、出菇整齐、产量高等优点；2）本专利技术制备方法将大豆蛋白分解成大豆肽，以大豆肽的形式补充氨基酸，可改善金针菇菌种对氮的吸收，加快金针菇菌种的吸收利用，提高菌种的生长速率和品质；3）本专利技术培养基的制备方法简单可行，是废物再生利用，不污染环境，大幅度降低了排污费用，增加资源利用率，具有配制方便、成本低的特点。具体实施方式下面通过实施例对本专利技术方案作进一步说明：实施例1：金针菇液体菌种的培养方法，包括马铃薯汁液制备、豆粕酶解液制备、味精废液浓缩液准备、培养基配制、接种培养，具体步骤为：1）马铃薯汁液制备：将马铃薯去皮，切碎，再加入马铃薯重量0.01%的活性多肽，以料液比为1:4加水煮沸40min，经6层纱布过滤得马铃薯汁液，备用，上述活性多肽的氨基酸序列HSHCFCCGAAKCYLCRVLHPGKLNCSK，该活性多肽能够破坏马铃薯细胞的细胞膜物质，使细胞膜产生孔洞，改变细胞膜的渗透压，使细胞内成分物质能够快速完全释放出来，提高马铃薯汁的浸提速率和有效成分，增加培养基的营养成分；2）豆粕酶解液制备：将豆粕与等质量的水混合，调节pH值至8，随后添加7000U/g的碱性蛋白酶，在60℃下酶解2h，在100℃下灭酶12min，用8层纱布过滤，然后高温浓缩至50%，即得豆粕酶解液，该步骤可将大豆蛋白分解成大豆肽，大豆肽具有吸收速率快、能耗低、可避免氨基酸之间的吸收竞争和载体不易饱和的特点，以大豆肽的形式补充氨基酸，可改善金针菇菌种对氮的吸收，为金针菇菌种提供充足的氨基酸和氮源，加快金针菇菌种的吸收利用，提高菌种的生长速率和品质；3）味精废液浓缩液准备：将味精废液浓缩本文档来自技高网...

【技术保护点】
金针菇液体菌种的培养方法，包括马铃薯汁液制备、豆粕酶解液制备、味精废液浓缩液准备、培养基配制、接种培养，其特征在于：所述培养基配制步骤为：将配方量取马铃薯汁液、豆粕酶解液、味精废水、琼脂、磷酸二氢钾、维生素B1、硫酸镁，混合均匀，调节pH，放入高压灭菌器中灭菌，即得金针菇液体培养基。

【技术特征摘要】
1.金针菇液体菌种的培养方法，包括马铃薯汁液制备、豆粕酶解液制备、味精废液浓缩液准备、培养基配制、接种培养，其特征在于：所述培养基配制步骤为：将配方量取马铃薯汁液、豆粕酶解液、味精废水、琼脂、磷酸二氢钾、维生素B1、硫酸镁，混合均匀，调节pH，放入高压灭菌器中灭菌，即得金针菇液体培养基。2.根据权利要求1所述的金针菇液体菌种的培养方法，其特征在于：所述培养基的成分及其重量份为：马铃薯汁液20-30份、豆粕酶解液15-22份、味精废水11-15份、琼脂0.2-0.3份、磷酸二氢钾0.02-0.04份、维生素B10.001-0.002份、硫酸镁0.01-0.02份。3.根据权利要求7所述的金针菇液体菌种的培养方法，其特征在于：所述混配步骤中金针菇液体培养基的pH至6-7。4.根据权利要求1所述的金针菇液体菌种的培养方法，其特征在于：所述马铃薯汁液制备步骤中活性多肽的添加量为马铃薯重量的0.01-0...

【专利技术属性】
技术研发人员：李冰，
申请(专利权)人：浦江县欧立生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33