一种唾液降钙素原胶体金检测方法技术

本发明专利技术涉及免疫检测分析的技术领域，尤其是一种唾液降钙素原胶体金检测方法，包含有唾液收集器、唾液、抗降钙素原抗体、胶体金试剂和检测器。唾液收集器包括收集管、收集棒、收集刮片的一种或组合；抗降钙素原抗体为抗降钙素原单克隆抗体和抗降钙素原多克隆抗体的一种或组合；胶体金试剂为含有所述胶体金物质的液相和/或固相材料；检测器为胶体金检测器。以人体唾液为检测样本，可有效监测唾液中降钙素原，特异性强，重复性好，灵敏度高，操作简单，不需特殊仪器设备，不需专业培训，结果清晰易辨，易于推广，适合于现场检测。

A colloidal gold detection method for saliva calcitonin

The invention relates to the technical field of immune detection and analysis, in particular to a salivary procalcitonin colloidal gold detection method, which includes salivary collector, saliva, anti procalcitonin antibody, colloidal gold reagent and detector. The saliva collector comprises a collecting pipe, collecting bar, collection or a combination of the scraping blade; anti calcitonin antibody anti calcitonin monoclonal antibody and anti procalcitionin polyclonal antibody or a combination; colloidal gold reagent for liquid / containing the colloidal gold material or solid material colloidal gold detector. Taking human saliva as a sample, it can effectively monitor the procalcitonin in saliva, with high specificity, good reproducibility, high sensitivity, simple operation, no special instrument and equipment, no professional training, clear and easy to identify results, and easy to popularize. It is suitable for field detection.

【技术实现步骤摘要】
一种唾液降钙素原胶体金检测方法
本专利技术涉及免疫检测分析
，尤其是一种唾液降钙素原胶体金检测方法。
技术介绍
降钙素原(PCT)是一种含116个氨基酸的无激素活性糖蛋白，分子量为13KD。其半衰期为25～30h。在生理情况下由甲状腺-C细胞产生，含量极少，在健康人群的血清或脑脊液中几乎不能被检出。据文献介绍,在细菌、真菌、寄生虫等感染性疾病并有全身和中枢神经系统性炎症反应时，病菌的内毒素可促使甲状腺-C细胞、肝脏巨噬细胞和单核细胞、肺和肠道组织的淋巴细胞以及神经内分泌细胞等甲状腺以外的组织大量产生PCT，而导致其血清和脑脊液中的含量升高或持续性升高，且与感染的程度、进展或消退呈正相关。在病毒感染、慢性非生物性炎症、癌性发热、药热、自身免疫性疾病以及手术创伤患者的PCT水平却不增高或仅有轻度短暂性增高。其敏感度和特异性远高于传统的C-反应蛋白和外周血白细胞计数的检测，因而具有重要的临床诊断和鉴别诊断价值。目前检测PCT常用的实验室方法有放射免疫学分析法（RIA）、化学发光免疫分析法(CLIA)、胶体金比色法（GICA）和酶联免疫法（ELISA），众多血液样本PCT检测技术与产品本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种唾液降钙素原胶体金检测方法，包含有唾液收集器、唾液、抗降钙素原抗体、胶体金试剂和检测器，具有如下特征：1）所述唾液收集器包括收集管、收集棒、收集刮片的一种或组合；2）所述抗降钙素原抗体为抗降钙素原单克隆抗体和抗降钙素原多克隆抗体的一种或组合；3）所述胶体金试剂为含有所述胶体金的液相和/或固相材料；4）所述检测器为胶体金检测器。

【技术特征摘要】
1.一种唾液降钙素原胶体金检测方法，包含有唾液收集器、唾液、抗降钙素原抗体、胶体金试剂和检测器，具有如下特征：1）所述唾液收集器包括收集管、收集棒、收集刮片的一种或组合；2）所述抗降钙素原抗体为抗降钙素原单克隆抗体和抗降钙素原多克隆抗体的一种或组合；3）所述胶体金试剂为含有所述胶体金的液相和/或固相材料；4）所述检测器为胶体金检测器。2.根据权利要求1所述的一种唾液降钙素原胶体金检测方法，其特征在于所述方法包括如下步骤：1)制备降钙素原的单克隆抗体；2)硝酸纤维膜的制备：用划膜液将与羊抗人降钙素原多抗稀释为浓度为0.2～1.0mg/ml、将羊抗鼠IgG抗体稀释为浓度为0.2～1.0mg/ml，喷于硝酸纤维膜上，分别形成检测线和质控线，且于37℃中干燥4小时，备用；所述划膜液由终浓度为0.01～0.2mol/lTris，1％～3％海藻糖或1％～3％蔗糖或0.1％～1％EDTA，0.05％～0.1％叠氮钠配制而成，HCl调节pH值为7.2～7.8；3）金标垫的制备：降钙素原的单克隆抗体标记胶体金的pH值为8.0～8.5，以2～12μg/ml胶体金加入降钙素原的单克隆抗体，摇匀后静置，按质量比0.5‰～1‰，加入10％的脱脂奶粉，摇匀、静置，离心，取沉淀，用复溶液按原初始标记时所用胶体金溶液体积的40％～100％复溶，将复溶后的胶体金标记物喷涂于玻璃纤维膜上，37℃，烘干4h，得到金标垫；所述复溶液是由终浓度为0.01～0.2mol/LTris，1％～5％BSA或0.01％～0.2％络蛋白，1％～3％海藻糖或1％～5％蔗糖或0.1％～1％EDTA，0.1％～2％曲拉通X-100或0.1％～0.5％土温-20或0.01％～0.5％S9表面活性剂，0.1％～1％柠檬酸钠，0.1％～2％β-环糊精，0.1％～1％PEG20000，0.1％～2％水解干络素，0.1％～2％氯化钠或0.1％～2％氯化钾或0.1％～2％氢氧化钠，0.05％～0.1％叠氮钠配制而成，HCl调节pH值为7.0～8.0；4)在反应支持物上依次相互搭接粘贴上样垫、金标垫、硝酸纤维膜和吸水垫；5）所述步骤(4)中把上样垫处理液涂于玻璃纤维上，37℃，烘干4h，室温密封保存；6）依次将上样垫、胶体金标记的降钙素原单克隆抗体玻璃纤维膜、包被有羊抗人降钙素原多抗和羊抗鼠IgG多克隆抗体的反应膜、吸水垫在反应支持物上进行组装；用切条机按纵向剪切，裁成宽度为4mm的条状，待检验合格后铝箔...

【专利技术属性】
技术研发人员：李亚星，刘凤鸣，刘冰，
申请(专利权)人：常州博闻迪医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32