一种改性壳聚糖的核酸靶向递送载体及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种改性壳聚糖的核酸靶向递送载体及其制备方法和应用。三甲基化壳聚糖与琥珀酰亚胺乙酸酯‑聚乙二醇‑邻二硫吡啶进行反应，得到三甲基化壳聚糖‑g‑聚乙二醇‑邻二硫吡啶；在常温条件下，将反应产物与短肽缬氨酸‑丙氨酸‑脯氨酸‑甘氨酸‑半胱氨酸(Val‑Ala‑Pro‑Gly‑Cys,VAPG‑Cys)反应，制得三甲基化壳聚糖‑g‑聚乙二醇‑VAPG。本发明专利技术的三甲基化壳聚糖‑g‑聚乙二醇‑VAPG带有正电荷，能够与带有负电荷的microRNA‑145通过静电作用复合得到纳米粒子，纳米粒子复合物在水中分散性好，靶向血管平滑肌细胞，转染效率高，能够调节血管平滑肌细胞的表型，可用于医药基因治疗领域。

【技术实现步骤摘要】
一种改性壳聚糖的核酸靶向递送载体及其制备方法和应用
本专利技术属于载体材料
，具体涉及一种基于改性壳聚糖的靶向血管平滑肌细胞的microRNAs递送载体及其制备方法和应用。
技术介绍
血管一般由血管内皮细胞层、血管平滑肌细胞层和成纤维细胞层构成，其中，血管平滑肌细胞(VSMC)存在收缩型和合成型两种表型。正常情况下，VSMC为收缩表型，有利于对抗血管张力并维持血管壁稳态，但是当VSMC受到病理和生理刺激后会发生表型改变，由收缩型转变为合成型，同时VSMC过度增殖导致内膜增生，造成血管狭窄，因此需要对VSMC表型进行有效调控，抑制其过度增殖。MicroRNAs(miRNAs)是一种长度为20～24nt的非编码核糖核酸，在血管再生中具有重要作用(PengB,ChenY,LeongKW.MicroRNAdeliveryforregenerativemedicine.AdvancedDrugDeliveryReviews,2015,88:108-122)。其中，miRNA-145可在血管平滑肌细胞内高度表达，对血管平滑肌细胞的增殖和表型具有调控作用(HergenreiderE,Heyd本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种改性壳聚糖的核酸靶向递送载体及其制备方法和应用，其特征是以短肽缬氨酸‑丙氨酸‑脯氨酸‑甘氨酸(Val‑Ala‑Pro‑Gly,VAPG)作为特异性识别短肽，载体具体为三甲基化壳聚糖‑g‑聚乙二醇‑VAPG，其结构式为：

【技术特征摘要】
1.一种改性壳聚糖的核酸靶向递送载体及其制备方法和应用，其特征是以短肽缬氨酸-丙氨酸-脯氨酸-甘氨酸(Val-Ala-Pro-Gly,VAPG)作为特异性识别短肽，载体具体为三甲基化壳聚糖-g-聚乙二醇-VAPG，其结构式为：2.如权利要求1所述的载体，其特征是壳聚糖的重均分子量为1～50kDa；壳聚糖脱乙酰度大于90％。3.如权利要求1所述的载体，其特征是三甲基化壳聚糖的甲基化度为20～60％。4.如权利要求1所述的载体，其特征是聚乙二醇的双端的活性基团分别为琥珀酰亚胺乙酸酯基团和邻二硫吡啶基团；聚乙二醇的数均分子量为1～5kDa；载体中聚乙二醇的接枝率为10～30％。5.权利要求1所述的基于改性壳聚糖的核酸靶向递送载体的制备方法，其特征在于包括以下步骤：(1)制备三甲基化壳聚糖-g-聚乙二醇-邻二硫吡啶：琥珀酰亚胺乙酸酯-聚乙二醇-邻二硫吡啶与三甲基壳聚糖反应，其质量比为1～5:1，三甲基化壳聚糖的浓度为5～10mg/mL，去离子水作为溶剂，室温下反应2～10h，产物使用去离子水透析，最后冻干得到三甲基化壳聚糖-g-聚乙二醇-...

【专利技术属性】
技术研发人员：袁晓燕，文美玲，周芳，周培琼，赵蕴慧，任丽霞，
申请(专利权)人：天津大学，
类型：发明
国别省市：天津,12