一种建立绿色荧光BALB/c裸小鼠模型的方法及模型应用技术

本发明专利技术公开了一种建立绿色荧光BALB/c裸小鼠模型的方法，方法如下：选取雌性C57BL/6‑Tg(CAG‑EGFP)小鼠与雄性Foxn1nu小鼠杂交得到F1子代均为有毛荧光小鼠，筛选其中♀小鼠，待其性成熟后与亲代♂Foxn1nu交配(回交)得F2；产生F2子代性状分离，筛选其中♀有毛荧光鼠与亲代♂Foxn1nu回交，完成一个回交循环；此回交循环过程一共进行10代，得到F10，建立绿色荧光BALB/c裸小鼠模型，本发明专利技术还公开本发明专利技术方法建立的动物模型在脑肿瘤移植模型中的应用；本方法利用同源导入法建立的新品系稳定表达EGFP的模型小鼠，为人胶质瘤原位移植示踪研究胶质瘤及其肿瘤微环境奠定坚实基础。

【技术实现步骤摘要】
一种建立绿色荧光BALB/c裸小鼠模型的方法及模型应用
本专利技术属于医疗领域用动物模型领域，特别涉及小鼠模型。
技术介绍
胶质瘤是颅内最常见的原发难治性脑肿瘤，目前国内、外各实验室都在广泛开展胶质瘤的基础研究，包括胶质瘤的发生机制、生物学行为、基因通路与生物治疗和基因治疗等，在一定程度上提高了疗效，并改善预后。作为基础研究的平台，建立人脑胶质瘤原位移植模型至关重要。如今此类动物模型研究虽比较成熟，但都存在一定缺陷：以普通BALB/c裸鼠建立的肿瘤模型，不能很好的示踪并分辨肿瘤和源于宿主的肿瘤微环境细胞；利用BALB/c裸鼠与免疫功能正常的荧光小鼠杂交而来的荧光裸鼠，因其遗传学性状不稳定，其子代荧光表达并不稳定。为此，本专利技术旨在建立一种稳定表达绿色荧光蛋白的近交系免疫缺陷小鼠，从而为直观高效稳定地揭示肿瘤细胞与宿主组织之间复杂的关系奠定基础。自从1907年美国杰克逊实验室的C.Little首次培育出第一株近交系动物DBA小鼠以来，近交系小鼠因为遗传背景一致，体积小，繁育快，易于重复操作，与人有许多共患疾病，而被做为医药研究的首选动物。一百年来，近交系品种不断增多，利用小鼠与人类类本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种建立绿色荧光BALB/c裸小鼠模型的方法，其特征在于，方法如下：选取雌性C57BL/6‑Tg(CAG‑EGFP)小鼠与雄性Foxn1nu小鼠杂交得到F1子代均为有毛荧光小鼠，筛选其中♀小鼠，待其性成熟后与亲代♂Foxn1nu交配(回交)得F2；产生F2子代性状分离，筛选其中♀有毛荧光鼠与亲代♂Foxn1nu回交，完成一个回交循环；此回交循环过程一共进行10代，得到F10，建立绿色荧光BALB/c裸小鼠模型。

【技术特征摘要】
1.一种建立绿色荧光BALB/c裸小鼠模型的方法，其特征在于，方法如下：选取雌性C57BL/6-Tg(CAG-EGFP)小鼠与雄性Foxn1nu小鼠杂交得到F1子代均为有毛荧光小鼠，筛选其中♀小鼠，待其性成熟后与亲代♂Foxn1nu交配(回交)得F2；产生F2子代性状分离，筛选其中♀有毛荧光鼠与亲代♂Foxn1nu回交，完成一个回交循环；此回交循环过程一共进行10代，得到F10，建立绿色荧光BALB/c裸小鼠模型。2.根据权利要求1所述一种建立绿色荧光BALB/c裸小鼠模型的方法，在所述F10子代中筛选♀有毛荧光鼠与♂荧光裸小鼠杂交，筛选其中荧光亮度高的子代，以此建立血缘扩大群及生产群。3.根据权利要求2所述一种建立绿色荧光BALB/c裸小鼠模型的方法，其特征在于，筛选其中♀有毛荧光鼠表型的鉴定方法为：孕鼠生产后，利用有无体毛的特征来辨认新生仔鼠是否为裸小鼠，无毛为裸小鼠；性别判断方法为通过肛门与生殖器的距离辨别；荧光的初步判断方法为使用荧光成像仪判断是否为发绿色荧光的荧光鼠。4.根据权利要求3所述一种建立绿色荧光BALB/c裸小鼠模型的方法，绿色荧光BALB/c裸小鼠需经过基因型筛选，待筛选的小鼠出生10d前后剪尾(＜0.5cm)，在56℃热水浴应用蛋白酶K消化6h，基因组DNA抽提试剂盒提取DNA，紫外分光光度计测OD值，稀释为100ng/μl作为DNA模板...

【专利技术属性】
技术研发人员：董军，陈延明，盛敏峰，薛彦平，刘加驰，黄强，
申请(专利权)人：苏州大学附属第二医院，
类型：发明
国别省市：江苏,32