A method for extracting organelles from cells, which comprises the following steps: a plurality of cells and uniformly mixed solution to obtain a mixture; the mixture is placed in a container; the container into the grinding device, the grinding device comprises a grinding parts and mechanical power source connected to the grinding; grinding parts will be immersed in a container mixture; the mixture was grinding, set grinding parameters on the grinding device, the mechanical power source control parameters according to the grinding abrasive grinding the mixture to obtain the homogenized mixture; the homogenized mixture obtained by centrifugal supernatant; the supernatant centrifuged to get containing a plurality of organelles in the sediment; mixture grinding step, keep grinding parts at least in part volume mixture. The method of extracting cells from cells can destroy the cell membrane of a large number of cells while maintaining the integrity of the cytosolic cells, and successfully extract a large number of good quality cytosolic cells from cells.
【技术实现步骤摘要】
自细胞提取胞器的方法
本专利技术涉及一种自细胞提取胞器的方法,尤其涉及一种以研磨件研磨细胞并从中提取胞器的方法。
技术介绍
胞器(organelle)是细胞中功能独立的生物组织。在众多的胞器当中,线粒体(mitochondrion)是细胞内进行氧化磷酸化和合成三磷酸腺苷(ATP)的主要场所。由于三磷酸腺苷为细胞活动的能量来源,所以线粒体又有(细胞能量工厂)之称。除了为细胞提供能量外,线粒体还参与细胞分化、细胞信息传递和细胞凋亡等过程,并拥有调控细胞生长周期的能力。由于分析线粒体的基因组有助于进行遗传学以及部分疾病的研究,因此发展能自细胞内提取质量良好的线粒体的方法有助于促进相关研究领域发展。目前有采用化学方式或物理方式破坏细胞膜以取得细胞内部的胞器。然而,上述各传统方法皆容易于破坏细胞膜的同时,也将胞器的胞器膜一并破坏,使得能成功提取的完整胞器数量极为稀少。因此,发展一种能破坏细胞膜但又能保持胞器完整性的提取方法,是目前业界亟欲解决的问题之一。
技术实现思路
专利技术人发现公知技术提取胞器的方法容易于细胞液中产生气泡,使得气泡破裂时产生的冲击力容易对胞器产生破坏,这情 ...
【技术保护点】
一种自细胞提取胞器的方法,其特征在于,其步骤包括:将多个细胞和一溶液均匀混合以得到一混合物;将所述混合物置入一容器内;将所述容器置入一研磨装置中,所述研磨装置包括一研磨件和连接于所述研磨件的一机械动力源;将所述研磨件浸入位于所述容器内的所述混合物;进行所述混合物研磨,对所述研磨装置设定一研磨参数,而使所述机械动力源根据所述研磨参数控制所述研磨件研磨所述混合物,以得到一均质化混合物;将所述均质化混合物离心以得到一上清液;以及将所述上清液离心以得到含有多个胞器的一沉淀物;其中,在进行所述混合物研磨的步骤中,保持所述研磨件的至少部分体积位于所述混合物中。
【技术特征摘要】
1.一种自细胞提取胞器的方法,其特征在于,其步骤包括:将多个细胞和一溶液均匀混合以得到一混合物;将所述混合物置入一容器内;将所述容器置入一研磨装置中,所述研磨装置包括一研磨件和连接于所述研磨件的一机械动力源;将所述研磨件浸入位于所述容器内的所述混合物;进行所述混合物研磨,对所述研磨装置设定一研磨参数,而使所述机械动力源根据所述研磨参数控制所述研磨件研磨所述混合物,以得到一均质化混合物;将所述均质化混合物离心以得到一上清液;以及将所述上清液离心以得到含有多个胞器的一沉淀物;其中,在进行所述混合物研磨的步骤中,保持所述研磨件的至少部分体积位于所述混合物中。2.如权利要求1所述的自细胞提取胞器的方法,其特征在于,进行所述混合物研磨包括有如下的子步骤:利用所述研磨参数中的一旋转参数来控制所述机械动力源,以使所述容器以自身的一轴心为旋转轴相对研磨件旋转;以及利用所述研磨参数中的一推压参数来控制所述机械动力源,以使所述研磨件沿所述容器的所述轴心在所述容器中进行往复移动而研磨所述混合物。3.如权利要求2所述的自细胞提取胞器的方法,其特征在于,所述旋转参数为每分钟3转/每分钟-7转/每分钟。4.如权利要求1所述的自细胞提取胞器的方法,其特征在于,当进行所述混合物研磨时,在所述混合物中的细胞数量的80%~90%破裂时停止研磨,以得到所...
【专利技术属性】
技术研发人员:林佳玟,蔡新庭,郑汉中,
申请(专利权)人:台湾粒线体应用技术股份有限公司,
类型:发明
国别省市:中国台湾,71
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