一种病理标本切片免疫组化操作方法及其系统技术方案

本发明专利技术公开了一种病理标本切片免疫组化操作方法及其系统，操作方法包括病理标本石蜡切片、病理标本烤片、病理标本切片脱蜡、病理标本切片抗原修复、病理标本切片染色、病理标本切片滴加抗体、病理标本切片显色、病理标本切片复染、病理标本切片封片和镜检等步骤。本发明专利技术采用先用苏木素进行染色滴加抗体Ⅰ、抗体Ⅱ，利于抗体的显色，且染色后滴入抗体便于把握组织的大小和位置，减小了滴加抗体时对位置把握的偏差，便于实验规范操作，具有较强的实际应用价值，能有效避免实际的浪费，也能很大程度上减小实验数据的误差。

An immunohistochemical method and system for pathological specimen slicing

The invention discloses a pathological slices of immunohistochemical method and operation method of operation system, including pathological specimens of paraffin section, pathological specimens of toast, pathological slices of pathological specimens dewaxing, antigen repair, pathological specimens staining, pathological slices of adding antibody, color, pathological slices of pathological specimens stained the pathological specimens, mounting and microscopic steps. The invention adopts the first dyeing with hematoxylin dropping antibody antibody are I, II, for color antibodies, and antibody staining after instillation to grasp the size and position of the organization, reduce the dropping of antibody position deviation of confidence, for the convenience of standardized operation, has a strong practical value, can effectively to avoid the actual waste, can greatly reduce the error of the experimental data.

【技术实现步骤摘要】
一种病理标本切片免疫组化操作方法及其系统
本专利技术属于实验室检测分析方法的
，尤其涉及一种病理标本切片免疫组化操作方法及其系统。
技术介绍
免疫组化是应用免疫学抗原抗体反应原理，即抗原与抗体特异性反应原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂如荧光素、酶、金属离子、同位素等显色来确定反应组织细胞内抗原，对其进行定位、定性及定量的研究。而对于免疫组化操作，实验人员在操作过程中经常遇到组织切片修复处理后没有颜色，在进行滴加I抗、II抗时，不知道具体滴加的位置和组织，只能采取大面积滴加，从而导致滴加的结果不准确，不能对组织细胞内的抗原进行定位，也无法开展后续的定性、定量研究操作。因此，一个免疫组化实验要经过多次操作，并且对整个实验操作可能影响实验结构的环节进行一一排除，工作量大，极大的降低了工作效率。基于此，实验室研发人员在多次问题的实践操作中设计了一种新型组织切片的免疫组化操作方法。
技术实现思路
本专利技术解决了现有技术中的操作人员在进行免疫组化实验时在滴加抗体时位置把握不准确，病工作效率低，溶剂浪费大，实验数据不准确等问题。为了解决上述技术问题，本专利技术提供了一种病理标本切片免疫组化本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种病理标本切片免疫组化操作方法，其特征在于，包括以下几个步骤：(1)病理标本石蜡切片：取已制好的病理标本石蜡，用石蜡切片机切成2‑4μm的石蜡切片(2)病理标本烤片：55‑65℃恒温箱内烤带有病理标本石蜡切片的载玻片2h；(3)病理标本切片脱蜡：脱蜡前先将带有病理标本石蜡切片的载玻片在室温中放置60min，后用二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ、二甲苯Ⅲ浸泡，每次5min，再将载玻片放置在无水酒精Ⅰ、无水酒精Ⅱ、无水酒精Ⅲ中浸泡，每次2min，再依次移至95％酒精Ⅰ、95％酒精Ⅱ、85％酒精中浸泡，每次2min，最后用PBS冲洗2min；(4)病理标本切片抗原修复：将冲洗干净后的载玻片放入高压锅中的PH为8...

【技术特征摘要】
1.一种病理标本切片免疫组化操作方法，其特征在于，包括以下几个步骤：(1)病理标本石蜡切片：取已制好的病理标本石蜡，用石蜡切片机切成2-4μm的石蜡切片(2)病理标本烤片：55-65℃恒温箱内烤带有病理标本石蜡切片的载玻片2h；(3)病理标本切片脱蜡：脱蜡前先将带有病理标本石蜡切片的载玻片在室温中放置60min，后用二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ、二甲苯Ⅲ浸泡，每次5min，再将载玻片放置在无水酒精Ⅰ、无水酒精Ⅱ、无水酒精Ⅲ中浸泡，每次2min，再依次移至95％酒精Ⅰ、95％酒精Ⅱ、85％酒精中浸泡，每次2min，最后用PBS冲洗2min；(4)病理标本切片抗原修复：将冲洗干净后的载玻片放入高压锅中的PH为8.0的抗原修复液中20-25min，自然冷却30min以上，PBS冲洗2-3次，再移至到蒸馏水中浸泡2min，3％双氧水中浸泡8min，PBS冲洗2-3次；(5)病理标本切片染色：采用苏木素染色2-3min；(6)病理标本切片滴加抗体：在载玻片上滴加抗体Ⅰ，再放入孵育湿盒中，连同孵育湿盒一起放入2-8℃冷藏冰箱中静置8-10h，取出，室温中静置30min，PBS冲洗2-3次，滴加抗体Ⅱ，再放入孵育湿盒中，连同孵育湿盒一起放入37℃恒温箱中静置40min，取出，室温中静置30min，PBS冲洗2-3次；(7)病理标本切片显色：DAB显色3-5min，在显微镜下控制染色的强度。(8)病理标本切片复染：苏木素染液复染1min，盐酸酒精分化3s，PBS冲洗5-10分钟。(9)病理标本切片封片和镜检。2.如权利要求1所述的一种病理标本切片免疫组化操作方法，其特征在于，所述步骤(4)中采...

【专利技术属性】
技术研发人员：姜美容，周梅华，彭靖，黎娅，商亚彤，
申请(专利权)人：长沙金域医学检验所有限公司，
类型：发明
国别省市：湖南,43