一种用于肠外营养相关性肝病药物制造技术

技术编号:16490230 阅读:79 留言:0更新日期:2017-11-03 21:31
本发明专利技术公开了一种用于肠外营养相关性肝病药物,将慢病毒包装质粒、包膜表达质粒与干扰表达载体质粒组合成三质粒慢病毒表达系统,然后共转染至包装细胞,经培养后裂解得到用于肠外营养相关性肝病药物;本发明专利技术设计特异性干扰IRE1α基因的shRNA包装成慢病毒,从而高效导入BRL细胞,可实现IRE1α基因稳定的干扰效果,实现肠外营养相关性肝病的缓解、治疗。

For parenteral nutrition associated liver disease drug

The invention discloses a method for parenteral nutrition associated liver disease drug, the lentiviral packaging plasmid, envelope expression plasmid and the plasmid into three plasmid lentiviral expression system, then transfected into packaging cells, after incubation for pyrolysis of parenteral nutrition associated liver disease drugs; the design of specific interference IRE1 alpha gene shRNA packaged into lentivirus, thereby efficiently transfected into BRL cells, can realize the interference effect of stable IRE1 alpha gene, realize the correlation of parenteral nutrition liver disease remission, treatment.

【技术实现步骤摘要】
一种用于肠外营养相关性肝病药物
本专利技术属于药物
,具体涉及一种用于肠外营养相关性肝病药物。
技术介绍
肠外营养(parenteralnutrition,PN)给不能通过正常肠道方式来满足生长的新生儿带来了革命性关爱。但长时间(>2周)持续应用PN也存在许多相关问题,肠外营养相关性肝病(totalparenteralnutrition-associatedliverdisease,PNALD)是其中一种最常见的并发症。随着长时间PN的应用,PNALD发生率增加,PNALD具有不同程度的脂肪肝、黄疸,严重者可进展为肝硬化,最终发生肝功能衰竭危及生命。PN应用2周后可看到PNAC组织学证据,6周后可观察到不同程度的纤维化。然而,临床上因肝脏病理检查具有创伤性,不为人们接受,PNALD诊断多依赖生化结果:直接胆红素≥2mg/dL而无引起肝功能紊乱的其他原因。多年来国内外学者对PNALD的病因、发病机制研究很多,但确切病因及发病机制仍尚不明确。人们对PN营养液中脂肪乳成分关注较多,最近研究表明,静脉营养液中的脂肪乳剂会导致肝脏脂肪变性、脂肪性肝炎、肝细胞损伤和胆汁淤积等,严重时可引起本文档来自技高网...
一种用于肠外营养相关性肝病药物

【技术保护点】
一种用于肠外营养相关性肝病药物,其特征在于,所述用于肠外营养相关性肝病药物的制备方法包括以下步骤,将慢病毒包装质粒、包膜表达质粒与干扰表达载体质粒组合成三质粒慢病毒表达系统,然后共转染至包装细胞,经培养后裂解得到肠外营养相关性肝病药物;所述干扰表达载体质粒包括由SEQ.ID.NO.1构成的shRNA序列。

【技术特征摘要】
1.一种用于肠外营养相关性肝病药物,其特征在于,所述用于肠外营养相关性肝病药物的制备方法包括以下步骤,将慢病毒包装质粒、包膜表达质粒与干扰表达载体质粒组合成三质粒慢病毒表达系统,然后共转染至包装细胞,经培养后裂解得到肠外营养相关性肝病药物;所述干扰表达载体质粒包括由SEQ.ID.NO.1构成的shRNA序列。2.根据权利要求1所述用于肠外营养相关性肝病药物,其特征在于,所述慢病毒包装质粒为psPAX2;所述包膜表达质粒pMD2.G;所述干扰表达载体质粒的载体为GV248。3.根据权利要求1所述用于肠外营养相关性肝病药物,其特征在于,干扰表达载体质粒、包装质粒、包膜质粒的质量比为4:3:2。4.根据权利要求1所述用于肠外营养相关性肝病药物,其特征在于,所述共转染试剂为Lipofectamine2000;所述包装细胞为293T细胞。5.一种可用于肠外营养相关性肝病治疗shRNA,其特征在于,所述shRNA的核苷酸序列为SEQ.ID.NO.1。...

【专利技术属性】
技术研发人员:朱雪萍汪健朱晓黎崔宁迅崔铭玲李洁陈小倩黄凤霞李之珩
申请(专利权)人:苏州大学附属儿童医院
类型:发明
国别省市:江苏,32

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