一种金银花提取物在制备治疗反复脑缺血和局灶性脑缺血药物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及金银花提取物在制备治疗反复脑缺血和局灶性脑缺血药物中的应用，有效解决从金银花中提取金银花提取物，并作为唯一活性成分在制备治疗反复脑缺血和局灶性脑缺血的药物问题，所述的金银花提取物是，将金银花粉碎成粗粉，乙醚回流提取脱脂，药渣挥干乙醚，加质量浓度70%乙醇浸泡，回流提取，过滤，滤液减压回收乙醇至无醇味，加蒸馏水分散至相当于含生药0.3g/mL的分散液，用乙酸调节pH值，分散液上HPD‑600或AB‑8型大孔吸附树脂，用30%乙醇洗脱，洗脱液浓缩，冷冻干燥，粉碎，得金银花提取物，本发明专利技术可有效解决从金银花中提取金银花提取物，并有效用于治疗反复脑缺血和局灶性脑缺血，开拓了金银花的新用途和药用价值，有显著的经济和社会效益。

【技术实现步骤摘要】
一种金银花提取物在制备治疗反复脑缺血和局灶性脑缺血药物中的应用
本专利技术涉及医药，特别是一种金银花提取物在制备治疗反复脑缺血和局灶性脑缺血药物中的应用。
技术介绍
脑缺血性疾病是一组由多种原因导致大脑、小脑或脑干局部或多部位供血不足，从而引起相应神经系统症状的疾病。包括反复脑缺血和局灶性脑缺血，形成病因复杂，给人的身体健康带来很大伤害，因此对反复脑缺血和局灶性脑缺血的治疗是人们非常关心的问题，但目前虽有多种药物，由于种种原因，其疗效并不尽人意，因此，研制新的治疗反复脑缺血和局灶性脑缺血的药物是人们所希望解决的技术问题。金银花，又名忍冬(学名：Lonicerajaponica)，性寒，味甘，入肺、心、胃经，金银花自古被誉为清热解毒的良药，具有清热解毒、抗炎、补虚疗风的功效，它性甘寒气芳香，甘寒清热而不伤胃，芳香透达又可祛邪。金银花既能宣散风热，还善清解血毒，用于各种热性病，如身热、发疹、发斑、热毒疮痈、咽喉肿痛等症，均效果显著，主治胀满下疾、温病发热，热毒痈疡和肿瘤等症。其对于头昏头晕、口干作渴、多汗烦闷、肠炎、菌痢、麻疹、肺炎、乙脑、流脑、急性乳腺炎、败血症、阑尾炎、皮肤感染、痈疽疔疮、丹毒、腮腺炎、化脓性扁桃体炎等病症均有一定疗效。但至今未见有金银花提取物制备治疗反复脑缺血和局灶性脑缺血药物的公开报导。
技术实现思路
针对上述情况，为克服现有技术之缺陷，本专利技术之目的就是提供一种金银花提取物在制备治疗反复脑缺血和局灶性脑缺血药物中的应用，可有效解决从金银花中提取金银花提取物，并作为唯一活性成分在制备治疗反复脑缺血和局灶性脑缺血的药物问题。本专利技术解决的技术方案是，一种金银花提取物在制备治疗反复脑缺血和局灶性脑缺血药物中的应用，所述的金银花提取物是，将金银花粉碎成粗粉，乙醚回流提取脱脂，弃去乙醚；金银花药渣挥干乙醚，加质量浓度70％乙醇浸泡，回流提取，过滤，滤液减压回收乙醇至无醇味，加蒸馏水分散至相当于含生药0.3g/mL的分散液，用乙酸调节pH值，分散液上HPD-600或AB-8型大孔吸附树脂，用质量浓度30％乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩，冷冻干燥，粉碎，得金银花提取物。本专利技术可有效解决从金银花中提取金银花提取物，并有效用于治疗反复脑缺血和局灶性脑缺血，开拓了金银花的新用途和药用价值，是药物上的一大创新，有显著的经济和社会效益。具体实施方式以下结合具体情况为本专利技术的具体实施方式作详细说明。本专利技术在具体实施中，一种金银花提取物在制备治疗反复脑缺血和局灶性脑缺血药物中的应用，所述的金银花提取物是，将金银花粉碎成过20-30目筛的粗粉，先加10倍重量的石油醚回流提取1h，脱脂，弃去石油醚；金银花药渣挥干石油醚，加金银花10倍重量的、质量浓度70％乙醇浸泡0.5h，80℃回流提取1h，过滤，得第一次滤液；药渣再加金银花10倍重量的、质量浓度70％乙醇，80℃回流提取1h，过滤，得第二次滤液，合并两次滤液，减压回收乙醇至无醇味，加蒸馏水分散至相当于含生药0.3g/mL的分散液，加乙酸调pH至2.4-4.2，分散液上HPD-600或AB-8型大孔吸附树脂，分散液中金银花质量/大孔树脂质量比为1︰6-8，用质量浓度30％乙醇洗脱，以2.3BV/h的流速进行洗脱，洗脱液用量为8-12倍大孔树脂体积，收集洗脱液，浓缩，冷冻干燥，得金银花提取物。本专利技术所制备的金银花提取物经实验具有抗反复脑缺血和局灶性脑缺血之功效，有效用于制备治疗反复脑缺血和局灶性脑缺血的药物，是治疗反复脑缺血和局灶性脑缺血药物上的创新，并经实验取得了非常好的有益技术效果，有关实验资料如下：实验一金银花提取物对小鼠反复脑缺血再灌注模型的影响实验1材料1.1动物KM种小鼠，SPF级，雄性，96只，体重25～30g，由河南省实验动物中心提供，合格证号：41003100000258；实验室合格证号：SYXK(豫)2010-001。1.2药品与试剂本专利技术金银花提取物；尼莫地平片，亚宝药业集团股份有限公司；氯化钠注射液，河南双鹤华利药业有限公司；注射用青霉素钠，华北制药股份有限公司；甲醛溶液(分析纯)，烟台市双双化工有限公司；水合氯醛，天津市光复精细化工研究所；羧甲基纤维素钠(CMC)，天津市恒兴化学试剂制造有限公司；医用乙醇(酒精)，新乡市三伟消毒制剂有限公司；细胞间粘附分子1(ICAM-1)ELISA检测试剂盒，R&D公司；肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA检测试剂盒，R&D公司；神经元特异性烯醇化酶(NSE)ELISA检测试剂盒，R&D公司；髓过氧化物酶(MPO)测试盒，南京建成生物工程研究所。1.3仪器电子天平，上海精密科学仪器有限公司；电子称，上海精密科学仪器有限公司；台式低速自动平衡离心机，长沙湘智离心机仪器有限公司；电热恒温水浴锅，上海一恒科学仪器有限公司；紫外可见分光光度计，上海天美科学仪器有限公司；酶标仪，美国BIO-RAD公司；可调式移液器，上海雷勃分析仪器有限公司；超声波清洗器，上海科导超声仪器有限公司；玻璃匀浆器，郑州玻璃仪器厂。2方法2.1造模与给药健康小鼠96只，雄性，体重25～30g，正常饲养3天，称重，随机分为6组，每组16只，分别为假手术组﹑模型组、尼莫地平组、大、中、小剂量金银花提取物组。按0.1ml/10g灌胃尼莫地平混悬液(阳性对照药，给药剂量为30mg/kg，相当于临床剂量的15倍，临用前用0.5％CMC配成药物浓度3mg/ml)，大、中、小剂量金银花提取物混悬液(给药剂量分别为100mg/kg，50mg/kg，25mg/kg，临用前用0.5％CMC配成药物浓度10mg/ml，5mg/ml，2.5mg/ml)，假手术组﹑模型组给予同体积0.5％CMC灌胃，每天给药1次，连续给药7d。于第6天晚上8点开始分批禁食不禁水，12h后，分批称重给药，1h后，用10％水合氯醛(0.03ml/10g)腹腔注射麻醉(小鼠的翻正反射消失)，用酒精颈部消毒，然后用手术刀作颈部正中切口，逐渐分离周围肌肉，直到见到双侧颈总动脉(CCA)，再用弯头精密镊剥离周围神经，分离CCA，穿线备用，每个颈总动脉用直径约为0.3mm的针灸针钩起来，使成约90度，缺血10min，放松针灸针，恢复灌流10min，再缺血10min，恢复供血。创伤处敷撒青霉素粉，缝合颈部伤口。假手术组除了不阻断CCA外，其它操作同造模组。2.2检测指标和检测方法2.2.1检测指标所有小鼠再灌注24h后，摘眼球取血，静置半小时后，3500r/min离心10min，取血清，测血清中NSE、MPO含量。脱颈椎处死，迅速取脑，矢状切取一半放入10％福尔马林液中，固定一周，石蜡包埋，作HE染色，观察脑组织形态学改变；另一半用生理盐水冲洗上面的血迹，再用滤纸上吸干净上面的生理盐水，准确称量其重量，根据此重计算该加入的冰冷的生理盐水量，以生理盐水(ml)：脑组织(g)＝9∶1的比例在盛有冰块的大烧杯中用玻璃匀浆器制成10％的脑匀浆，4℃，3000r/min离心10min，取上清液于-20℃以下低温保存，分别测定脑匀浆中ICAM-1、TNF-α含量。2.2.2血清中NSE的测定方法检测原理：试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被神经元烯本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种金银花提取物作为唯一活性成分在制备治疗反复脑缺血和局灶性脑缺血药物中的应用，所述的金银花提取物是，将金银花粉碎成过20‑30目筛的粗粉，先加10倍重量的石油醚回流提取1h，脱脂，弃去石油醚；金银花药渣挥干石油醚，加金银花10倍重量的、质量浓度70%乙醇浸泡0.5h，80℃回流提取1h，过滤，得第一次滤液；药渣再加金银花10倍重量的、质量浓度70%乙醇，80℃回流提取1h，过滤，得第二次滤液，合并两次滤液，减压回收乙醇至无醇味，加蒸馏水分散至相当于含生药0.3g/mL的分散液，加乙酸调pH至2.4‑4.2，分散液上HPD‑600或AB‑8型大孔吸附树脂，分散液中金银花质量/大孔树脂质量比为1︰6‑8，用质量浓度30%乙醇洗脱，以2.3BV/h的流速进行洗脱，洗脱液用量为8‑12倍大孔树脂体积，收集洗脱液，浓缩，冷冻干燥，得金银花提取物。

【技术特征摘要】
1.一种金银花提取物作为唯一活性成分在制备治疗反复脑缺血和局灶性脑缺血药物中的应用，所述的金银花提取物是，将金银花粉碎成过20-30目筛的粗粉，先加10倍重量的石油醚回流提取1h，脱脂，弃去石油醚；金银花药渣挥干石油醚，加金银花10倍重量的、质量浓度70%乙醇浸泡0.5h，80℃回流提取1h，过滤，得第一次滤液；药渣再加金银花10倍重量的、质量浓度70%乙醇，80℃回流提取...

【专利技术属性】
技术研发人员：苗明三，冯素香，白明，李瑞奇，
申请(专利权)人：河南中医药大学，
类型：发明
国别省市：河南,41