一种加快降钙素原定量检测的方法技术

本发明专利技术涉及一种加快降钙素原定量检测的方法，所述方法包括利用振荡和远红外共同孵育抗原抗体，从而加快降钙素原的定量检测；本发明专利技术依靠振荡作用，使样本中抗原抗体带电分子以固定的频率振动，因而抗原抗体能在很短的时间内结合；另外远红外能够加速抗原抗体结合，为抗原抗体反应提供了最佳的反应条件，大大缩短了反应时间。本发明专利技术提供的方法除了能够提高检测效率外，同时可以大大降低最低检测限。

【技术实现步骤摘要】
一种加快降钙素原定量检测的方法
本专利技术涉及免疫分析检测领域，尤其涉及一种加快降钙素原定量检测的方法。
技术介绍
降钙素原(procalcitonin，PCT)是一个小分子蛋白，含有116个氨基酸残基，分子量大约为13kDa。PCT的氨基酸序列首次在1984年被Moullec等人发现。它属于一类相关蛋白的家族(CAPA肽家族)，包括降钙素基因相关肽I和II、淀粉不溶素、肾上腺髓质素和降钙素。类似于CAPA家族的其他肽，PCT来源于一个前体分子-降钙素原前体。降钙素原前体含有141个氨基酸，其N端去除25个氨基酸残基后得到降钙素原。1993年，有报道发现PCT水平在细菌系统感染患者中有所升高。如今PCT已经成为伴随有全身性炎症和败血症疾病的主标记物。PCT在临床诊断中的价值，主要是基于PCT浓度和炎症严重程度的紧密相关。PCT在正常人血中浓度低于0.05ng/ml，当血清中PCT浓度高于0.5ng/ml时出现重症败血症和/或败血症休克的风险较低；血清PCT浓度≥2ng/mL出现重症败血症和/或败血症休克的风险较高，在脓毒血症、败血症患者其浓度显著增高，可达1000ng/ml，是正常人的2000倍。PCT可在感染后2个小时后检测到，对临床早期诊断具有重要意义，且在感染后12-24小时达到高峰，体内、外稳定性好。PCT作为一种具有创新意义的严重细菌性感染等疾病的实验指标，提高了临床诊断的准确性。因此，PCT的诊断价值非常之高，使用单克隆抗体定量检测患者血液中PCT的重要性更是显而易见。目前主要采用电化学发光的方法和酶联免疫吸附实验法(ELISA)进行检测，电化学发光法以罗氏为主，将待测标本与包被抗体的顺磁性微粒和发光剂标记的抗体加在反应杯中共同温育，形成磁性微珠包被抗体-抗原-发光剂标记抗体复合物。将复合物吸入流动室，同时用TPA缓冲液冲洗。当磁性微粒流经电极表面时，被安装在电极下的磁铁吸引住，而游离的发光剂标记抗体被冲走。同时在电极加电压，启动电化学发光反应，使发光试剂标记物和TPA在电极表面进行电子转移，产生电化学发光。然而检测成本较高。ELISA主要采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接，然后通过酶与底物产生颜色反应，用于定量测定。然而该检测方法的线性范围较窄，样本浓度高时需要二次稀释，过程繁琐且检测时间较长。因此，寻找缩短降钙素原的检测时间并提高其最低检测限的新方法已成为目前亟待解决的问题。
技术实现思路
为解决上述技术问题，本专利技术提供了一种加快降钙素原定量检测的方法，所述方法包括利用振荡和远红外共同孵育抗原抗体，从而加快降钙素原的定量检测。本专利技术通过利用振荡和远红外共同孵育抗原抗体，其中振荡作用可使样本中抗原抗体带电分子以固定的频率振动，因而抗原抗体能在很短的时间内结合；应用它，可以极大地提高工作效率，缩短实验周期，达到快速定量的效果；而采用远红外能够加速抗原抗体结合，为抗原抗体反应提供了最佳的反应条件，大大缩短了反应时间，除了能够提高检测效率外，同时可以大大降低最低检测限。优选地，所述振荡采用的振动加速度为11.0～13.0m/s2，例如11.0m/s2、11.2m/s2、11.5m/s2、12.0m/s2、12.2m/s2、12.5m/s2、12.8m/s2或13.0m/s2，优选11.5～12.5m/s2。优选地，所述振荡采用的振动速度为2.0～4.0cm/s，例如2.0cm/s、2.2cm/s、2.5cm/s、2.8cm/s、3.0cm/s、3.2cm/s、3.5cm/s、3.8cm/s或4.0cm/s，优选2.5～3.8cm/s。优选地，所述振荡采用的振动位移为0.15～0.40mm，例如0.15mm、0.18mm、0.20mm、0.22mm、0.25mm、0.28mm、0.30mm、0.32mm、0.35mm、0.38mm或0.40mm，优选0.20～0.35mm。优选地，所述远红外采用的波长为2μm～10μm，例如2μm、3μm、5μm、6μm、7μm、8μm、9μm或10μm，优选3～8μm。优选地，所述远红外采用的输出功率＜250VA，例如200VA、210VA、220VA、230VA或240VA，优选＜220VA。优选地，所述抗原的孵育时间为5～30min，例如5min、6min、8min、10min、12min、15min、16min、18min、20min、22min、25min、28min或，优选为6～20min，进一步优选为8min。优选地，所述抗体的孵育时间为5～30min，例如5min、6min、8min、10min、12min、15min、16min、17min、18min、20min、22min、25min、28min或30min，优选为6～15min，进一步优选为8min。优选地，所述方法还包括利用恒温空气浴培养箱加热。优选地，所述恒温空气浴培养箱的加热温度为37℃。作为本专利技术优选的技术方案，所述加快降钙素原定量检测的方法包括：利用37℃恒温空气浴培养箱加热，并且利用振荡加远红外对抗原抗体反应加速；其中，所述振动采用的振动加速度为11.0～13.0m/s2，振动速度为2.0～4.0cm/s，振动位移为0.15～0.40mm；所述远红外采用的波长为2μm～10μm，输出功率＜250VA；抗原孵育5～30min，抗体孵育5～30min。优选地，所述方法采用微电流免疫芯片进行。与现有技术相比，本专利技术至少具有以下有益效果：本专利技术依靠振荡作用，使样本中抗原抗体带电分子以固定的频率振动，因而抗原抗体能在很短的时间内结合；另外远红外能够加速抗原抗体结合，为抗原抗体反应提供了最佳的反应条件，大大缩短了反应时间。本专利技术方法通过将震荡和远红外协同作用，再配合微电流免疫芯片进行检测，除了能够提高检测效率外，同时可以大大降低最低检测限，可使最低检测限在0.01ng/ml以下。具体实施方式为便于理解本专利技术，本专利技术列举实施例如下。本领域技术人员应该明了，所述实施例仅仅是帮助理解本专利技术，不应视为对本专利技术的具体限制。实施例1一种加快降钙素原定量检测的方法，包括以下步骤：利用37℃恒温空气浴培养箱加热，并且利用振荡加远红外对抗原抗体反应加速；其中，所述振动采用的振动加速度为11.5m/s2，振动速度为2.5cm/s，振动位移为0.20mm；所述远红外采用的波长为3μm，输出功率＜250VA；抗原孵育8min，抗体孵育8min，采用微电流免疫芯片进行检测。采用该实施例的方法检测降钙素原的最低检测限为0.005ng/ml。实施例2一种加快降钙素原定量检测的方法，包括以下步骤：利用37℃恒温空气浴培养箱加热，并且利用振荡加远红外对抗原抗体反应加速；其中，所述振动采用的振动加速度为12.0m/s2，振动速度为3.0cm/s，振动位移为0.30mm；所述远红外采用的波长为5μm，输出功率＜250VA；抗原孵育6min，抗体孵育6min，采用微电流免疫芯片进行检测。采用该实施例的方法检测降钙素原的最低检测限为0.008ng/ml。实施例3一种加快降钙素原定量检测的方法，包括以下步骤：利用37℃恒温空气浴培养箱加热，并且利用振荡加远红外对抗原抗体反应加速；其中，所述振动采用的振动加速度为12.5m本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种加快降钙素原定量检测的方法，其特征在于，所述方法包括利用振荡和远红外共同孵育抗原抗体，从而加快降钙素原的定量检测。

【技术特征摘要】
1.一种加快降钙素原定量检测的方法，其特征在于，所述方法包括利用振荡和远红外共同孵育抗原抗体，从而加快降钙素原的定量检测。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述振荡采用的振动加速度为11.0～13.0m/s2，优选11.5～12.5m/s2；优选地，所述振荡采用的振动速度为2.0～4.0cm/s，优选2.5～3.8cm/s；优选地，所述振荡采用的振动位移为0.15～0.40mm，优选0.20～0.35mm。3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述远红外采用的波长为2μm～10μm，优选3～8μm；优选地，所述远红外采用的输出功率＜250VA，优选＜220VA。4.如权利要求1-3之一所述的方法，其特征在于，所述抗原的孵育时间为5～30min，优选为6～20min，进一步...

【专利技术属性】
技术研发人员：李逢辉，严巧，
申请(专利权)人：深圳迈奇生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44