一种治疗癌症的中药组合物的检测方法技术

本发明专利技术提供了一种治疗癌症的中药组合物的检测方法，所述中药组合物原料药组成包括益母草、红花、花椒、水蛭等34味中药材。本发明专利技术检测方法包括：色谱条件：以甲醇‑水为流动相，等度洗脱，检测波长250‑320nm；对照品溶液制备：取丁香酚对照品制备成对照品溶液；供试品溶液制备：取中药组合物，以有机溶剂提取后制备成供试品溶液。本发明专利技术方法专属性强，精密度、稳定性、重复性良好。

【技术实现步骤摘要】
一种治疗癌症的中药组合物的检测方法本申请是申请日为2013年10月29日、申请号为201310520036.8、专利技术名称为“一种治疗癌症的中药组合物的检测方法”的专利技术专利申请的分案申请。
本专利技术涉及一种中药组合物的检测方法，具体涉及一种中药组合物的HPLC检测方法，属于中医药

技术介绍
丁香酚，分子式为C10H12O2，无色或苍黄色液体，有强烈的丁香香气，不溶于水。药理研究表明，丁香酚在1∶8000～1∶16000浓度时，对致病性真菌有抑制作用；在1∶2000～1∶8000浓度时，对金黄色葡萄球菌及肺炎、痢疾(志贺低)、大肠、变形、结核等杆菌均有抑制作用；家兔静脉注射可产生麻醉、降低血压、呼吸抑制与抗惊厥等作用；经肌肉标本实验表明有强的抗组织胺作用。此外丁香酚也可用于香水香精以及各种化妆品香精和皂用香精配方中，还可以用于食用香精的调配。现有技术对丁香酚的含量测定多采用HPLC法，以有机溶剂的酸溶液为流动相进行洗脱，如黎迎等[对《中国药典》2010年版丁香药材中丁香酚含量测定方法的探讨，中药新药与临床药理，2012，23(5)：579-582]以甲醇-1％醋酸水(55∶45)为流动相对丁香药材中丁香酚的含量测定方法进行改进。本专利技术提供一种特定组成的治疗癌症的中药组合物中丁香酚的含量测定方法，现有技术对此未见报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种治疗癌症的中药组合物的检测方法。本专利技术的目的是通过如下技术方案实现的：一种治疗癌症的中药组合物的检测方法，该方法包括：色谱条件：以甲醇-水为流动相，等度洗脱，检测波长250-320nm；对照品溶液制备：取丁香酚对照品制备成对照品溶液；供试品溶液制备：取中药组合物，以有机溶剂提取后制备成供试品溶液；测定：取对照品和供试品溶液分别注入液相色谱仪，照高效液相色谱法测定。进一步，所述流动相体积百分比为甲醇∶水＝(50∶50)～(70∶30)；更进一步，甲醇∶水＝(55∶55)～(65∶45)；更进一步，甲醇∶水＝60∶40。进一步，对照品溶液制备中，对照品溶液浓度为每1ml对照品溶液含丁香酚20-80μg；更进一步，对照品溶液浓度为每1ml含丁香酚40-60μg；进一步，供试品溶液制备中，所述有机溶剂为二氯甲烷、三氯甲烷、乙酸乙酯、丙酮、乙醚、正丁醇、甲醇、50％甲醇水溶液、乙醇、稀乙醇溶液中任意一种或几种组成的混合溶剂；更进一步，所述有机溶剂为甲醇；更进一步，供试品溶液浓度为每1ml供试品溶液相当于原药材0.01-0.1g；更进一步，供试品溶液浓度为每1ml相当于原药材0.04g。本专利技术所述中药组合物原料药组成为：进一步，所述中药组合物的原料药组成为：其中，所述花椒为炭花椒、水蛭为制水蛭、三棱为醋炙三棱、香附为醋炙香附、没药为醋炙、苦杏仁为炒苦杏仁、小茴香为盐炒小茴香、五灵脂为醋炙五灵脂、延胡索为醋炙延胡索、蒲黄为炭蒲黄、乳香为醋炙、干漆为煅干漆、吴茱萸为甘草水炙的吴茱萸、艾叶为炙艾叶。本专利技术检测方法所述“中药组合物”可以是各原料药经粉碎后得到的组合物，也可以是各原料药经常规方法提取后得到的提取物，还可以是各原料药经常规方法提取后再按常规制剂工艺制备而成的组合物制剂，如口服液、片剂、胶囊剂、颗粒剂等。上述本专利技术中药组合物原料药经提取后，加入下述辅料制备成口服液；所述辅料包括：矫味剂、甜味剂、稳定化剂、增稠剂、溶解辅助剂、pH调节剂、着色剂、香精；所述矫味剂选自下述中的一种或几种：聚维酮、薄荷脑、甘草酸二钾、苹果酸、苹果酸钠、酒石酸、琥珀酸、琥珀酸钠、乙酸、谷氨酸、柠檬酸、柠檬酸钠、葡萄糖酸内酯、氯化钠。所述甜味剂选自下述中的一种或几种：蔗糖、果糖、葡萄糖、乳糖、山梨糖醇、麦芽糖醇、赤藓糖、三氯蔗糖、蜂蜜、糖精、甜菊糖苷提取物、阿巴斯甜、安赛蜜、甜味蛋白、甘草、甜蜜素。稳定剂可选自如下一种或几种：聚维酮、甘油、异抗坏血酸及其盐、依地酸、偏磷酸等。增稠剂可选自如下一种或几种：羧甲基纤维素钠、琼脂、聚维酮、聚乙烯醇、黄原胶。溶解辅助剂可选自如下一种或几种：聚山梨醇酯、聚乙二醇、聚氧乙烯硬化蓖麻油、聚维酮、氢氧化钠、聚山梨酯80。pH调节剂选自如下一种或几种：柠檬酸、柠檬酸钠、乳酸、氢氧化钠、盐酸、苹果酸、苹果酸钠、酒石酸、琥珀酸、乙酸、葡萄糖酸、磷酸等。口服液的辅料最优选为：1-5重量份聚山梨酯80、1-5重量份甜蜜素。所述中药组合物的口服液制备方法包括如下步骤：步骤1：鳖甲加水煎煮2-4次，每次2-4小时，合并提取液，滤过，滤液浓缩为鳖甲煎液；步骤2：当归、川芎、姜黄、高良姜、肉桂、丁香、阿魏、降香水蒸气蒸馏提取5-7小时，收集挥发油与蒸馏液，步骤3：步骤2水蒸气蒸馏提取剩余的药渣与其余原药材加水煎煮2-4次，每次1-3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至清膏1，步骤4：步骤3的清膏1加乙醇至含醇量达60-80％，调节pH值为7.5～8.0，静置，滤过，滤液回收乙醇，加水得清膏2，步骤5：步骤4中的清膏2步骤1的鳖甲煎液，煮沸，放冷，加步骤2的挥发油与蒸馏液及口服液的常规辅料，加水搅拌使溶解，静置，滤过，滤液经常规工艺制成口服液；所述步骤2和/或4的静置为：0～5℃静置；所述步骤5中加入口服液的辅料为：1-5重量份聚山梨酯80、1-5重量份甜蜜素。附图说明图1丁香酚对照溶液色谱图图2供试品溶液色谱图图3阴性对照溶液色谱图图4流动相考察实验结果，色谱峰A为丁香酚色谱峰A、流动相1色谱图；B、流动相2色谱图；C、流动相3色谱图；D、流动相4色谱图。图5提取溶剂考察实验结果，色谱峰A为丁香酚色谱峰A、以甲醇为提取溶剂的HPLC色谱图；B、以50％甲醇水溶液为提取溶剂的HPLC色谱图；C、以乙醇为提取溶剂的HPLC色谱图；D、以稀乙醇溶液为提取溶剂的HPLC色谱图。实验例11仪器与试药1.1仪器：SSI1500高效液相色谱仪(UVIS1000检测器，CSchromPlus色谱处理系统)；赛多利斯CPA225D十万分之一电子天平，Waterpurifirer超纯水机，TU-1810紫外可见分光光度计。1.2试剂：甲醇为色谱纯，其余试剂均为分析纯，水为超纯水。1.3对照品：丁香酚由中国药品生物制品检定所提供(批号：110725-201112，供含量测定用)。1.4样品：实施例1制备口服液，批号130801、130802、130803，由成都地奥集团天府药业股份有限公司提供。2方法与结果2.1方法2.1.1色谱条件及系统适应性试验色谱柱：Diamonsil-C18(5μm，250×4.6mm)；流动相：甲醇-水(60∶40)等度洗脱；检测波长：280nm；流速：1.0ml·min-1；柱温：室温；2.1.2对照品溶液制备：精密称取丁香酚对照品50.46mg，置100ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml，置100ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得(50.46μg·ml-1)。2.1.3供试品溶液制备：精密量取样品1ml，置25ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。2.1.4阴性对照溶液制备：取缺丁香酚的阴性样品，按2.1.3项下供试品溶液制备方法制备阴性溶液。在上述条件下，丁香酚和样品中其它组分色谱峰可完全分离，丁香酚与其相邻色谱本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种治疗癌症的中药组合物的检测方法，其特征在于，该方法包括：色谱条件：以甲醇‑水为流动相，等度洗脱，检测波长250‑320nm；对照品溶液制备：取丁香酚制备成对照品溶液；供试品溶液制备：取中药组合物，以有机溶剂提取后制备成供试品溶液；测定：取对照品和供试品溶液分别注入液相色谱仪，照高效液相色谱法测定；其中，所述中药组合物原料药组成为：

【技术特征摘要】
1.一种治疗癌症的中药组合物的检测方法，其特征在于，该方法包括：色谱条件：以甲醇-水为流动相，等度洗脱，检测波长250-320nm；对照品溶液制备：取丁香酚制备成对照品溶液；供试品溶液制备：取中药组合物，以有机溶剂提取后制备成供试品溶液；测定：取对照品和供试品溶液分别注入液相色谱仪，照高效液相色谱法测定；其中，所述中药组合物原料药组成为：2.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述中药组合物的原料药组成为：3.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述花椒为炭花椒、水蛭为制水蛭、三棱为醋炙三棱、香附为醋炙香附、没药为醋炙、苦杏仁为炒苦杏仁、小茴香为盐炒小茴香、五灵脂为醋炙五灵脂、延胡索为醋炙延胡索、蒲黄为炭蒲黄、乳香为醋炙、干漆为煅干漆、吴茱萸为甘草水炙的吴茱萸、艾叶为炙艾叶。4.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述流动相体积百分...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨胜玉，陈勇，汤美健，
申请(专利权)人：成都地奥集团天府药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：四川,51