一种辣木组培苗的组织培养方法技术

一种辣木组培苗的组织培养方法，包括：(1)实验材料得选择；(2)具体实验步骤：(2.1)无菌外植体的获取：切除叶片，保留顶芽心叶，叶柄留0.1‑0.2cm，切割成0.5‑0.8cm的茎段，每段带1‑2个腋芽；(2.3)辣木继代培养；(2.4)培养21‑25天后，植株纵向生长株高在4.5cm以上，植株侧芽均萌发，统计增殖比例平均达到1:6；(2.5)在LM‑8培养基中培养18天后，植株高度平均达到4cm，生根率达到98％，根长大于2cm，根条数大于3；(2.6)组培苗驯化：辣木生根组培苗移至温室内，拧松瓶盖炼苗2‑3天即可移栽至沙床，成活率达到95％以上。本发明专利技术解决了辣木组培苗组织培养过程中植株发黄生、脆弱易折断的现象，并在瓶内实现扩繁、生根一步完成，节省成本在40％以上。

Method for cultivating Moringa seedlings tissue

Including training methods, Moringaceae seedling tissue: (1) experimental material selection; (2) the specific experimental steps: (2.1) obtaining sterile explants: removal of leaves, bud leaf petiole retain, leaving 0.1 0.2cm, cut into 0.5 segments 0.8cm, each with 1 2 a bud; (2.3) Moringa subculture; (2.4) training 21 25 days, plant height in the longitudinal growth of more than 4.5cm, both lateral bud germination, proliferation rate of statistical average 1:6; (2.5) in the LM 8 culture medium for 18 days, the average plant height reached 4cm, rooting rate the root length reached 98%, more than 2cm, root number greater than 3; (2.6) tissue culture seedlings: rooting Plantlets in the greenhouse to Moringa, unscrew the bottle seedling 2 3 days can be transplanted to the sand bed, the survival rate reached more than 95%. The invention solves the problem of Moringa seedlings during tissue culture of plant hair yellow, fragile easily broken phenomenon, and realize the multiplication, one step rooting in the bottle, save the cost of more than 40%.

【技术实现步骤摘要】
一种辣木组培苗的组织培养方法
本专利技术涉及一种组培方法，具体涉及一种辣木组培苗的组织培养方法，属于生物

技术介绍
辣木(MoringaoleiferaLam.)，又名鼓槌树、牛奶树、洋椿树、马萝卜、唪哕豆等，是辣木科(Moringaceae)辣木属(adans)的落叶木本蔬菜及油料植物，因其根具有辛辣味，故因而得名辣木¨。辣木原产于印度北部的喜马拉雅山南麓，现广泛种植于亚洲、非洲和美洲的30多个热带、亚热带国家及地区。辣木全身都是宝，其根、茎、叶、花、果实、种子等均可利用，并且含有丰富的营养物质，广泛应用于农业、工业、畜牧业、医药、美容等多种领域，是一种集美味、营养和保健于一体的珍稀菜肴，被誉为“奇迹之树”。辣木生长发育快，生物量大。辣木抗病性较强，对细菌、真菌等致病生物具有较强的抵抗能力。已有研究技术：现有的关于辣木组织培养的报道中，多是增殖和生根分步进行的培养的。武新琴等在《不同激素配比对辣木组培苗生长的影响》报道中采用MS+6-BA0.02mg/L+NAA0.02-0.5mg/L+3％白糖这一配方进行辣木的增殖培养，增殖倍数可达到5.6-8.1，在1/2MS+NAA0.2mg/L+蔗糖2％的培养基上生根最高仅79％；罗云霞等在《辣木组织培养试验研究》研究中通过种子获得的茎段进行研究，在MS+6-BA0.6mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖30％+琼脂6g/L培养基中继代增殖，增殖倍数可达5.8；；生根诱导在1/2MS+IBA0.1mg/L+蔗糖15％+琼脂6g/L培养基上均能获得健壮的生根苗，生根率达98％；移栽苗圃成活率可达80％。朱尾银等在《辣木的组织培养及快速繁殖研究》中提出，；增殖最适的培养基是改良MS+6-BA0.3mg/L+KT0.2mg/L+NAA0.1mg/L，平均增殖系数达到3.46；；在1/2改良MS+NAA0.1mg/L+IBA0.2mg/L+蔗糖25g/L+卡拉胶6.5g/L培养基上获得健壮的生根苗，生根率达90％以上，且植株和根系长势良好。黎国运利用当年生辣木实生苗定压、有数侧芽为繁殖材料，在改良MS+BA0.3-1.0mg/L+NAA0.1-0.2mg/L+蔗糖20g/L+卡拉胶9g/L上继代增殖，增殖倍数3.0以上，生根诱导在1/3改良MS+NAA0.2-0.5mg/L+IBA0.2-0.5mg/L+蔗糖10/L+卡拉胶10g/L的培养基上获得健壮的生根苗，生根诱导率90％以上，移栽苗圃获得成功(《辣木组培育苗技术研究总结》)。向素琼在研究《辣木组织培养与四倍体植株诱导》的工作中，以印度辣木为材料的，在MS+BA0.6mg/L+NAA0.1mg/L的固体培养基为最佳养基，增殖系数可以达到6.03，生根培养基均以MS+IBA0.2mg/L最适，生根率为90％，生根苗质量最好。《利用辣木茎段建立植株再生体系的研究》中，王洪峰等选择继代培养基为MS+6BA0.4rng/L+NAA0.2mg/L+卡拉胶5g/L+糖30g/L，增殖系数可以达到3.0；生根培养基为1/2MS+IBA0.4mg/L+NAA.2mgmg/L+卡拉胶7g/L+糖20g/L，生根率为100％。已有的专利报道：目前关于辣木组培的专利资料有，《一种辣木组培快繁技术》、《一种辣木组织培养中的种子消毒方法》和《一种辣木组培苗壮苗生根的方法》。已有研究报道不足之处：在已发表的研究报道和专利资料中，辣木的组培方式均是增殖和生根分步进行的，辣木作为木本蔬菜，其萌芽力强，利用传统的组培研究方法进行工厂化生产步骤繁琐，增加人工成本；同时，辣木组培苗茎段质地脆，易折断，在生产过程中易造成浪费。
技术实现思路
本专利技术的目的在于，提供一种辣木组培苗的组织培养方法，以克服现有技术所存在的上述缺点和不足。本专利技术所需要解决的技术问题，可以通过以下技术方案来实现：本实验针对一种辣木的继代培养过程，解决了一种辣木组培快繁中组培苗发黄和脆弱易折断的问题。通过优化生产工艺流程，实现辣木组织培养过程中增殖培养和生根培养同步进行，缩短了培养周期并节约了人工成本超40％，提高了辣木工厂化生产的收益。本专利技术所需要解决的技术问题，可以通过以下技术方案来实现：一种辣木的组培快速繁殖方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)实验材料得选择：挑选长势整齐、植株高度为3.5-4.5cm、继代周期为21-25天、叶色呈绿色或嫩绿色的辣木组培苗作为培养材料；(2)具体实验步骤：(2.1)材料的切割：切除叶片，保留顶芽心叶，叶柄留0.1-0.2cm，切割成0.5-0.8cm的茎段，每段带1-2个腋芽；(2.2)辣木继代培养；顶芽与茎段分开接种，均匀地接种到继代培养基8号(LM-8)中；其中，步骤(2.2)继代培养基8号(LM-8)中改良MS(KNO30.95-1.43g/L，NH4NO30.81-1.24g/L，MgSO4·7H2O0.19-0.28g/L，KH2PO40.09-0.13g/L，CaCl2·2H2O0.22-0.44g/L，Na2EDTA·2H2O0.002-0.04g/L,FeSO4·7H2O0.015-0.03g/L,MnSO4·H2O8.45-16.9mg/L，H3BO33.1-6.2mg/L，ZnSO4·7H2O4.3-8.6mg/L，KI0.42-0.83mg/L，Na2MoO4·2H2O0.13-0.25mg/L，CoCl2·6H2O0.01-0.025mg/L，CuSO4·5H2O0.01-0.025mg/L，肌醇5-10mg/L,烟酸0.025-0.05mg/L，盐酸硫胺素0.005-0.01mg/L，盐酸吡哆醇0.025-0.05mg/L，附加6-BA0.0005-0.001mg/L、IBA0.1mg/L、白砂糖30g/L+琼脂5.5g/L，pH值调至6.1。(2.3)步骤(2.2)中，辣木继代培养得培养条件为光照时间为12h/d，光照强度2000-3000lux，培养温度为26±2℃；(2.4)培养21-25d后，植株纵向生长株高在4.5cm以上，植株侧芽均萌发，统计增殖比例平均达到1:6.01。(2.5)在LM-8培养基中培养18天后，植株高度平均达到4cm，生根率达到98％，根长大于2cm，根条数大于3；(2.6)组培苗驯化：辣木生根组培苗移至温室内，拧松瓶盖炼苗2-3天即可移栽至沙床，成活率达到95％以上。本专利技术的有益效果：本专利技术针对辣木继代培养培养过程所需的营养成分进行调整，使辣木组培苗木质化程度提高，解决了辣木组培苗过程中植株发黄和易折断的现象；本实验改良了辣木组培苗的组培生产工艺，采用扩繁增殖和生根同时进行的手段，实现一步出苗，节省了人工成本，提高生产的经济收益。本专利技术以辣木为试验材料，采用一种配方进行培养，辣木组培苗在茎段木质化程度提高，不易被夹伤，增殖系数可达到6，同时生根率达到98％以上，移栽至温室炼苗，成活率在95％以上，成功实现辣木的工厂化生产。本专利技术针对辣木组织培养过程所需的营养成分进行调整，解决了辣木组培苗组织培养过程中植株发黄生、脆弱易折断的现象，并在瓶内实现扩繁、生根一步完成，缩短了辣木组培工厂化生产的周期，节省成本在40％以上。具体实施方式以下结合具体实施例，对本专利技术作进步说明。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种辣木组培苗的组织培养方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)实验材料得选择：挑选长势整齐、植株高度为3.5‑4.5cm、继代周期为21‑25天、叶色呈绿色或嫩绿色的辣木组培苗作为培养材料；(2)具体实验步骤：(2.1)材料的切割：切除叶片，保留顶芽心叶，叶柄留0.1‑0.2cm，切割成0.5‑0.8cm的茎段，每段带1‑2个腋芽；(2.2)辣木继代培养；顶芽与茎段分开接种，均匀地接种到继代培养基8号(LM‑8)中；(2.3)培养21‑25d后，植株纵向生长株高在4.5cm以上，植株侧芽均萌发，统计增殖比例平均达到1:6.01；(2.4)在LM‑8培养基中培养18天后，植株高度平均达到4cm，生根率达到98％，根长大于2cm，根条数大于3；(2.5)组培苗驯化：辣木生根组培苗移至温室内，拧松瓶盖炼苗2‑3天即可移栽至沙床，成活率达到95％以上。

【技术特征摘要】
1.一种辣木组培苗的组织培养方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)实验材料得选择：挑选长势整齐、植株高度为3.5-4.5cm、继代周期为21-25天、叶色呈绿色或嫩绿色的辣木组培苗作为培养材料；(2)具体实验步骤：(2.1)材料的切割：切除叶片，保留顶芽心叶，叶柄留0.1-0.2cm，切割成0.5-0.8cm的茎段，每段带1-2个腋芽；(2.2)辣木继代培养；顶芽与茎段分开接种，均匀地接种到继代培养基8号(LM-8)中；(2.3)培养21-25d后，植株纵向生长株高在4.5cm以上，植株侧芽均萌发，统计增殖比例平均达到1:6.01；(2.4)在LM-8培养基中培养18天后，植株高度平均达到4cm，生根率达到98％，根长大于2cm，根条数大于3；(2.5)组培苗驯化：辣木生根组培苗移至温室内，拧松瓶盖炼苗2-3天即可移栽至沙床，成活率达到95％以上。2.根据权利要求1所述的一种辣木组培苗的组织培养方法，其特征在于：步骤(2.2)继代培养基8号(LM-8)中改良MS(KNO30.95-1.43g/L，NH4NO30.81-1.24g/L，MgSO4·7H...

【专利技术属性】
技术研发人员：李文剑，
申请(专利权)人：上海杉一植物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31