一种兼具土壤改良和青枯病防治作用的复合菌剂及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种兼具土壤改良和青枯病防治作用的复合菌剂及其制备方法，该菌剂由枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌的菌悬液按体积比1:1:1.5‑3:1.5‑3:1混合而制成。本发明专利技术由多种有益微生物复合构建而成，不仅可优化土壤微生物群体结构，改善土壤理化性状，增强作物养分吸收能力，提高土壤肥力，而且还能有效防治作物青枯病害的发生。

Composite microbial inoculum capable of soil improvement and bacterial wilt control and preparation method thereof

The invention discloses a both soil improvement and bacterial wilt prevention and cure effect of composite agent and a preparation method thereof, the agent is composed of Bacillus subtilis, Bacillus subtilis, Bacillus coagulans, bacillus, Bacillus polymyxa bacterial suspension with a volume ratio of 1:1:1.5 3:1.5 3:1 mixing. The invention consists of a variety of beneficial microorganism composite construct, not only can optimize the soil microbial community structure, improve soil properties, enhance the ability to absorb crop nutrients, improve soil fertility, but also can effectively prevent crop diseases of Ralstonia solanacearum.

【技术实现步骤摘要】
一种兼具土壤改良和青枯病防治作用的复合菌剂及其制备方法
本专利技术属于微生物肥料领域，具体地说，涉及一种兼具土壤改良和青枯病防治作用的复合菌剂及其制备方法。
技术介绍
作物青枯病的防治一直是一个世界性难题。早期，针对作物青枯病的防治，国内外专家在抗病品种选育、化学防治、农业措施等方面进行了大量的研究，但仍存在一些问题，如品种抗病性能低，抗性易丧失；化学防治药剂后期防效差，病菌易产生抗药性，且环境负面效应明显；农业措施易受受地域条件限制，难于大面积推广，等等。目前，随着可持续、生态农业观念的不断深入，生物防治越来越受到人们的重视。尤其是微生物肥料快速发展的今天，越来越多的专家学者将微生物肥料与作物病虫害防治联合起来研究，具有抗病虫害功能的微生物肥料也越来越多。微生物肥料是以微生物的生命活动导致作物得到特定肥料效应的一种制品，其含有大量有益微生物，可以改善作物营养条件、固定氮素和活化土壤中一些无效态的营养元素，创造良好的土壤微生态环境来促进作物的生长。微生物肥料中含有的有益微生物能产生大量糖类物质，且该糖类物质占土壤有机质的0.1％，当微生物肥料施入到土壤中后，与植物粘液，矿物胚体和有机胶体结合在一起，可改善土壤团粒结构，增强土壤物理性能和参与腐殖质形成。可见，研究开发抗病、促生等多功能微生物菌剂，是当前微生物肥料重点研究的内容之一，可以达到防治作物病害和提高土壤肥力的双重目的，符合当今生态农业的发展方向。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术针对上述的问题，提供了一种兼具土壤改良和青枯病防治作用的复合菌剂及其制备方法，该菌剂由多种有益微生物复合构建而成，不仅可改善土壤微生物群体结构，增强作物养分吸收能力，而且还能有效防治作物青枯病害的发生，是生物防治作物青枯病害发生的有效途径之一。为了解决上述技术问题，本专利技术公开了一种兼具土壤改良和青枯病防治作用的复合菌剂，按照体积比由以下组分构成：枯草芽孢杆菌菌悬液1份、地衣芽孢杆菌菌悬液1份、凝结芽孢杆菌菌悬液1.5份-3份、侧孢芽孢杆菌菌悬液1.5份-3份、多粘芽孢杆菌菌悬液1份。进一步地，所述枯草芽孢杆菌菌悬液、地衣芽孢杆菌菌悬液、凝结芽孢杆菌菌悬液、侧孢芽孢杆菌菌悬液和多粘芽孢杆菌菌悬液的浓度大于1×108cfu/ml。进一步地，所述枯草芽孢杆菌菌悬液、地衣芽孢杆菌菌悬液、凝结芽孢杆菌菌悬液、侧孢芽孢杆菌菌悬液和多粘芽孢杆菌菌悬液通过以下方法制备得到：在无菌条件下，将保存在-4℃环境下的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌菌种分别接种至TSA平板培养基上，28-30℃下培养48h，其中凝结芽孢杆菌培养温度为45℃；之后分别挑取各菌单菌落接种至TSA液体培养基中，28-30℃，200-220r/min下振荡培养24h，即得枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌菌悬液。镜检，确保各菌菌悬液浓度大于1×108cfu/ml。进一步地，所述TSA培养基为：酪蛋白胰酶消化物15.0g，大豆粉木瓜蛋白酶消化物5.0g，氯化钠5.0g，琼脂15.0g，pH值7.3；灭菌条件为：压强0.1-0.15MPa，温度121℃，时间30min。本专利技术公开了一种兼具土壤改良和青枯病防治作用的复合菌剂的制备方法，包括以下步骤：步骤1、制备枯草芽孢杆菌菌悬液、地衣芽孢杆菌菌悬液、凝结芽孢杆菌菌悬液、侧孢芽孢杆菌菌悬液和多粘芽孢杆菌菌悬液：在无菌条件下，将保存在-4℃环境下的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌菌种分别接种至TSA平板培养基上培养；之后分别挑取各菌单菌落接种至TSA液体培养基中振荡培养，即得枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌菌悬液；步骤2、称量：按照体积比称量以下组分：枯草芽孢杆菌菌悬液1份、地衣芽孢杆菌菌悬液1份、凝结芽孢杆菌菌悬液1.5份-3份、侧孢芽孢杆菌菌悬液1.5份-3份、多粘芽孢杆菌菌悬液1份；步骤3、将称量好的枯草芽孢杆菌菌悬液、地衣芽孢杆菌菌悬液、凝结芽孢杆菌菌悬液、侧孢芽孢杆菌菌悬液和多粘芽孢杆菌菌悬液混合均匀，制备得到兼具土壤改良和青枯病防治作用的复合菌剂。进一步地，步骤1中的所述枯草芽孢杆菌菌悬液、侧孢芽孢杆菌菌悬液和多粘芽孢杆菌菌悬液的浓度均大于1×108cfu/ml。进一步地，枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌和多粘芽孢杆菌菌种在TSA平板培养基上的培养条件为：温度28-30℃，时间48h；凝结芽孢杆菌菌种在TSA平板培养基上的培养条件为：温度45℃，时间48h。进一步地，枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌单菌落在TSA液体培养基中的培养条件为：温度28-30℃，转速200-220r/min，时间24h。进一步地，TSA培养基为：酪蛋白胰酶消化物15.0g，大豆粉木瓜蛋白酶消化物5.0g，氯化钠5.0g，琼脂15.0g，pH值7.3。进一步地，步骤1中的TSA培养基灭菌条件为：压强0.1-0.15MPa，温度121℃，时间30min。与现有技术相比，本专利技术可以获得包括以下技术效果：1)本专利技术的复合菌剂含有大量有益菌类，具有无毒害、无污染、活性高等优点，能改善土壤微生物群体结构，增强作物对氮磷钾等养分的吸收及利用，对土壤改良和肥力提升有一定效果。2)本专利技术的复合菌剂已经番茄盆栽试验验证，其番茄青枯病的防治效果最高可达67.84％，预防及防治效果较好。3)本专利技术复合菌剂由枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌构建而成，芽孢类杆菌易于发酵生产，不仅可降低菌剂生产成本，也可丰富对作物青枯病有防治作用的功能菌品种。4)本专利技术复合菌剂由枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌构建而成，不仅可有效防治作物青枯病害的发生，而且还对土壤理化性状的改善及质地改良起到一定作用。当然，实施本专利技术的任一产品并不一定需要同时达到以上所述的所有技术效果。具体实施方式以下将配合实施例来详细说明本专利技术的实施方式，藉此对本专利技术如何应用技术手段来解决技术问题并达成技术功效的实现过程能充分理解并据以实施。本专利技术公开了一种兼具土壤改良和青枯病防治作用的复合菌剂，按照体积比由以下组分构成：枯草芽孢杆菌菌悬液1份、地衣芽孢杆菌菌悬液1份、凝结芽孢杆菌菌悬液1.5份-3份、侧孢芽孢杆菌菌悬液1.5份-3份、多粘芽孢杆菌菌悬液1份。本专利技术还提供一种兼具土壤改良和青枯病防治作用的复合菌剂的制备方法，包括以下步骤：步骤1、制备各菌菌悬液：在无菌条件下，将保存在-4℃环境下的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌菌种分别接种至TSA平板培养基上，28-30℃下培养48h，其中凝结芽孢杆菌培养温度为45℃。之后分别挑取各菌单菌落接种至TSA液体培养基中，28-30℃，200-220r/min下振荡培养24h，即得枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌菌悬液。镜检，确保各菌菌悬液浓度大于1×108cfu/ml。其中TSA培养基为：酪蛋白胰酶消化物15.0g，大豆粉木瓜蛋白酶消化物5.0g，氯化钠5.0g，琼脂15.0g，pH值7.本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种兼具土壤改良和青枯病防治作用的复合菌剂，其特征在于，按照体积比由以下组分构成：枯草芽孢杆菌菌悬液1份、地衣芽孢杆菌菌悬液1份、凝结芽孢杆菌菌悬液1.5份‑3份、侧孢芽孢杆菌菌悬液1.5份‑3份、多粘芽孢杆菌菌悬液1份。

【技术特征摘要】
1.一种兼具土壤改良和青枯病防治作用的复合菌剂，其特征在于，按照体积比由以下组分构成：枯草芽孢杆菌菌悬液1份、地衣芽孢杆菌菌悬液1份、凝结芽孢杆菌菌悬液1.5份-3份、侧孢芽孢杆菌菌悬液1.5份-3份、多粘芽孢杆菌菌悬液1份。2.根据权利要求1所述的兼具土壤改良和青枯病防治作用的复合菌剂，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌菌悬液、地衣芽孢杆菌菌悬液、凝结芽孢杆菌菌悬液、侧孢芽孢杆菌菌悬液和多粘芽孢杆菌菌悬液的浓度大于1×108cfu/ml。3.根据权利要求1所述的兼具土壤改良和青枯病防治作用的复合菌剂，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌菌悬液、地衣芽孢杆菌菌悬液、凝结芽孢杆菌菌悬液、侧孢芽孢杆菌菌悬液和多粘芽孢杆菌菌悬液通过以下方法制备得到：在无菌条件下，将保存在-4℃环境下的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌菌种分别接种至TSA平板培养基上，28-30℃下培养48h，其中凝结芽孢杆菌培养温度为45℃；之后分别挑取各菌单菌落接种至TSA液体培养基中，28-30℃，200-220r/min下振荡培养24h，即得枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌菌悬液；镜检，确保各菌菌悬液浓度大于1×108cfu/ml。4.根据权利要求3所述的兼具土壤改良和青枯病防治作用的复合菌剂，其特征在于，所述TSA培养基为：酪蛋白胰酶消化物15.0g，大豆粉木瓜蛋白酶消化物5.0g，氯化钠5.0g，琼脂15.0g，pH值7.3；灭菌条件为：压强0.1-0.15MPa，温度121℃，时间30min。5.一种兼具土壤改良和青枯病防治作用的复合菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、制备枯草芽孢杆菌菌悬液、地衣芽孢杆菌菌悬液、凝结芽孢杆菌菌悬液、侧孢芽孢杆菌菌悬液和多粘芽孢杆菌菌悬液：在无菌条件下，将保存在-4℃环境下的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌...

【专利技术属性】
技术研发人员：云永欢，徐林，曹恩辉，余小兰，李勤奋，邓晓，邹雨坤，李光义，
申请(专利权)人：中国热带农业科学院环境与植物保护研究所，
类型：发明
国别省市：海南,46