一种通过种子测定辣椒品种耐涝性的方法技术

本发明专利技术公开了一种通过种子测定辣椒耐涝性的方法，通过对种子进行淹水处理，并测定其耐涝性，最终得到辣椒品种的耐涝性。本发明专利技术所述方法简便易行，成本低，结果可靠，能客观反映辣椒涝害的真实情况。可为耐涝品种培育及新品种耐涝鉴定提供技术和材料支撑。

Method for determining waterlogging resistance of pepper varieties by seed

The invention discloses a method for determining the waterlogging resistance of a pepper by seed. The seed is treated by flooding, and the waterlogging resistance is determined, and finally, the waterlogging resistance of the chili varieties is obtained. The method of the invention is simple, low cost, reliable results and can objectively reflect the real situation of the growth of pepper. It can provide technical and material support for the cultivation of waterlogging tolerant varieties and the identification of new varieties for waterlogging tolerance.

【技术实现步骤摘要】
一种通过种子测定辣椒品种耐涝性的方法
本专利技术涉及一种通过种子测定辣椒品种耐涝性的方法。技术背景辣椒是我国重要的蔬菜作物之一，全国有20多个省都有辣椒栽培，常年种植面积125～130万hm2(2000万亩左右)，总产量2800万吨、产值700亿元以上，。辣椒是浅根性植物，根系呼吸旺盛，耗氧量大，耐水涝能力较弱，土壤水分过多会影响其生长(邹学校，2009)。辣椒受涝后，易出现沤根死苗，叶片黄化脱落和落花落果等(王彬，2011)。中国长江中下游地区涝渍危害频繁发生，严重影响了春季和夏秋栽培辣椒等作物的产量和质量，而中国种植的辣椒60％～70％为露地栽培，涝害导致的减产减收更为严重。因此，对辣椒进行耐涝性能力评价，鉴定和筛选耐涝性较强的辣椒种质，对促进辣椒稳产和增产具有重要作用。目前减少涝害的的途径主要为通过兴建和完善水利设施来排水减渍，降低地面水位，达到一定的减少涝害的效果，但解决涝渍灾害最根本有效的方法是选育耐涝性品种，目前已有诸多学者开展植物耐涝性的预测和评价(张路，2015；胡化广，2011；齐晓花，2011；Magneschietal，2009)。如李阳生等(2002)利用一些形态和产量性状指标，比较分析杂交稻和常规稻对深水涝渍环境及分裂期、孕穗期对淹涝胁迫环境适应能力的差异性。尹冬梅等(2009)通过观察菊花苗期叶色、叶形态、茎色、茎形态4个外观形态指标，并定量分级来进行耐涝性综合评价。周广生等(2003)利用根系活力、丙二醛、脯氨酸、可溶性糖等生理指标的耐湿系数衡量小麦的耐湿性。除通过产量或植株形态进行耐涝性评价，通过在种子发芽期进行涝渍处理进行耐涝性评价的方法也已有广泛应用，张学昆等(2007)研究发现萌发种子淹水12h后的相对活力指数与花期田间湿害后的产量性状耐湿指标显著相关，认为发芽期淹水处理可以用于评价甘蓝型油菜的耐湿性。陈洁等(2006)明确了淹水12h可以作为油菜发芽期耐渍鉴定的时间指标。邹锡玲等(2014)研究油菜不同生长阶段的耐渍性，发现油菜在发芽期和苗期的耐渍性与成熟期的耐渍性保持一致。现有研究表明辣椒的耐涝性评价多基于苗期涝害的形态特征的表型评价(郑佳秋，2012；2015)，这种方式易受土壤，气候等自然因素的影响，且评价周期长，幼苗长势不好控制，操作较为复杂，不适宜实验室室内操作，限制了辣椒耐涝性评价的时间性和可重复性。而在种子萌发期评价辣椒耐涝性的方法尚无报道，因此，对辣椒种子萌发期进行耐涝性评价，探索更加快速有效的耐涝性评价方法具有重要的理论和实践意义。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是提供一种通过辣椒种子测定辣椒品种耐涝性的方法。该方法简便易行，所需设备和资金投入少，成本低，结果可靠，能更为准确地反映辣椒发芽期对涝害的反应特点，并能合理、高效地评价该品种辣椒的耐涝性。为解决本专利技术提出的技术问题，本专利技术采用的技术方案为：一种通过种子测定辣椒品种耐涝性的方法，包括以下步骤：(1)处理：将辣椒种子完全浸入水中，淹水处理3-6d后取出；(2)测定生理生化指标：测定淹水处理后种子的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽还原酶(GR)、淀粉酶(AMS)和脂肪酶(LPS)的酶活力，以及脯氨酸(PRO)、可溶性糖、超氧阴离子和羟自由基的含量；(3)测定种子发芽率和发芽势：测定淹水处理后种子发芽率和发芽势，将淹水后种子于湿润状态下，于27℃±0.5℃的恒温培养箱中培养，每天观察种子的发芽情况并详细记录，重复3次；发芽率＝规定天数发芽种子数/种子总粒数×100％发芽势＝规定天数发芽种子数/种子总粒数×100％(4)以步骤(2)的生理生化指标为基础，采用隶属函数评估法对各品种辣椒种子的耐涝性进行综合评估。本专利技术进一步包括以下优选的技术方案：优选的方案中，所选辣椒种子为各品种辣椒种子，其籽粒健壮、饱满，一致性好、无残缺。种子淹水处理时间优选为5d。优选的方案中，所述步骤(2)中，超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽还原酶(GR)、淀粉酶(AMS)和脂肪酶(LPS)的酶活力均采用试剂盒法测定。恒温培养优选为置于下垫1-2层和上盖1层滤纸作为保湿材料的10×10cm培养皿中，然后将培养皿置于培养箱中(25±1)℃培养，保持培养皿正常湿度。优选的方案中，步骤(3)中的培养时间为14d，通过下垫和上盖滤纸作为保湿材料，发芽标准为以种子露白视为萌发，按农作物种子检验国家标准，发芽7d后统计种子发芽势，14d后统计其发芽率。优选的方案中，培养时间优选为14d，培养时间过短不易观察辣椒种子涝害后的出芽差异，培养时间过长则容易烂种烂芽。发芽的标准以破胸露白开始即可视为发芽。按国家农作物种子检验规程gb3543-83规定，在培养7d后测定种子发芽势，培养14d后测定种子发芽率。优选的方案中，所述步骤(4)之前，步骤(2)和步骤(3)至少设置1个重复。优选的方案中，步骤(4)中隶属函数评估方法为：R(Xi)＝(Xi–Xmin)/(Xmax–Xmin)；若某一性状与耐涝性呈负相关关系，则利用反隶属函数进行计算，即R(Xi)＝1–(Xi–Xmin)/(Xmax–Xmin)；各项指标的隶属函数值相加得到总隶属函数值，根据总隶属函数值的大小按耐涝性评价等级进行评价；种子各指标耐涝性计算公式：R发芽势＝Xi/6.67R发芽率(Xi)＝(Xi–53.33)/22.23RSOD(Xi)＝(Xi–255.99)/107.02RO2·-(Xi)＝1-(Xi–44.45)/52.82RCAT(Xi)＝(Xi–4.40)/2.16RPOD(Xi)＝(Xi–4.67)/6.26RGR(Xi)＝(Xi–0.0342)/0.0281RAMS(Xi)＝(Xi–6.12)/4.54RLPS(Xi)＝(Xi–100.91)/27.39RPRO(Xi)＝(Xi–40.02)/45.26R可溶性糖(Xi)＝(Xi–25.12)/20.62R·OH(Xi)＝1-(Xi–2.12)/0.35耐涝性评价等级：表1其中，Xi表示所需鉴定品种的某项指标测定值；Xmax表示各品种中该指标测定的最大值；Xmin表示各品种中该指标测定的最小值。本专利技术的有益效果如下：1、本专利技术基于种子淹水后发芽情况，以及辣椒种子超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽还原酶(GR)、淀粉酶(AMS)和脂肪酶(LPS)的活力，以及脯氨酸(PRO)、可溶性糖、超氧阴离子和羟自由基的含量，建立一种快速、简便评价辣椒耐涝性的方法。可完全在实验室进行，简单易行，可控性强，不受季节和气候影响，且所需设备投入少，成本低，省工省时，重复性好。2、能较为准确地反映出辣椒发芽期对涝害的反应特点，结果可靠。3、加速辣椒资源品种耐涝性测定进程，可为耐涝品种培育及新品种耐涝鉴定提供技术和材料支撑。附图说明图1为淹水胁迫下不同品种辣椒种子SOD、POD、CAT、GR活性的变化图；图2为淹水胁迫下不同品种辣椒种子AMS和LPS活性的变化图；图3为淹水胁迫下不同品种辣椒种子脯氨酸、可溶性糖、羟自由基和超氧阴离子含量的变化图；图4为不同品种辣椒的耐涝性，注：A-S15,B-A本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种通过种子测定辣椒品种耐涝性的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)处理：将辣椒种子完全浸入水中，淹水处理3‑6d后取出；(2)测定生理生化指标：测定淹水处理后种子的超氧化物歧化酶、过氧化物酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽还原酶、淀粉酶和脂肪酶的酶活力，以及脯氨酸、可溶性糖、超氧阴离子和羟自由基的含量；(3)测定种子发芽率和发芽势：测定淹水处理后种子发芽率和发芽势，将淹水后种子于湿润状态下，于27℃±0.5℃的恒温培养箱中培养，每天观察种子的发芽情况并详细记录，重复3次；发芽率＝规定天数发芽种子数/种子总粒数×100％发芽势＝规定天数发芽种子数/种子总粒数×100％(4)以步骤(2)的生理生化指标为基础，采用隶属函数评估法对各品种辣椒种子的耐涝性进行综合评估。

【技术特征摘要】
1.一种通过种子测定辣椒品种耐涝性的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)处理：将辣椒种子完全浸入水中，淹水处理3-6d后取出；(2)测定生理生化指标：测定淹水处理后种子的超氧化物歧化酶、过氧化物酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽还原酶、淀粉酶和脂肪酶的酶活力，以及脯氨酸、可溶性糖、超氧阴离子和羟自由基的含量；(3)测定种子发芽率和发芽势：测定淹水处理后种子发芽率和发芽势，将淹水后种子于湿润状态下，于27℃±0.5℃的恒温培养箱中培养，每天观察种子的发芽情况并详细记录，重复3次；发芽率＝规定天数发芽种子数/种子总粒数×100％发芽势＝规定天数发芽种子数/种子总粒数×100％(4)以步骤(2)的生理生化指标为基础，采用隶属函数评估法对各品种辣椒种子的耐涝性进行综合评估。2.根据权利要求1所述的一种通过种子测定辣椒品种耐涝性的方法，其特征在于：所选辣椒种子为各品种辣椒种子，其籽粒健壮、饱满，一致性好、无残缺。3.根据权利要求1或2所述的一种通过种子测定辣椒品种耐涝性的方法，其特征在于：所述步骤(2)中，超氧化物歧化酶、过氧化物酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽还原酶、淀粉酶和脂肪酶的酶活力均采用试剂盒法测定。4.根据权利要求3所述的一种通过种子测定辣椒品种耐涝性的方法，其特征在于：脯氨酸(PRO)的含量采用酸性茚三酮法测定。5.根据权利要求3所述的一种通过种子测定辣椒品种耐涝性的方法，其特征在于：可溶性糖含量采用蒽酮法测定。6.根据权利要求3-5任一项所述的一种通过种子测定辣椒品种耐涝性的方法，其特征在于：超氧阴离子和羟自由基的含量采用试剂盒法测定。7.根据权利要求1所述的一种通过种子测定辣椒品种耐涝性的方法，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈娟，危革，刘周斌，欧立军，邹学校，马艳青，张竹青，陈文超，戴雄泽，李雪峰，
申请(专利权)人：湖南省蔬菜研究所，
类型：发明
国别省市：湖南,43