一种松仁提取物及其制备工艺和用途制造技术

本发明专利技术涉及一种松仁提取物(命名为UPNO-1)及其制备工艺和用途。所述松仁提取物为由皮诺敛酸和亚油酸为主要成分的脂肪酸组合物。所述松仁提取物的制备包括提取、皂化、尿素包合和干燥等步骤。所述松仁提取物能够用于药物的制备，用于预防和治疗老年痴呆。

A pine nut extract and its preparation and use

The invention relates to a pine nut extract (named UPNO-1) and its preparation and use. Fatty acid composition of the extract of pine nuts by pinolenic acid and linoleic acid as the main component. The pine nut extract preparation including extraction, saponification, urea inclusion and drying steps. The pine nut extract can used for the preparation of drugs for the prevention and treatment of senile dementia.

【技术实现步骤摘要】
一种松仁提取物及其制备工艺和用途
本专利技术属于医药领域，涉及天然产物提取物，尤其涉及一种松仁提取物及其制备方法和用途。所述松仁提取物可用于预防和治疗老年痴呆症等疾病。
技术介绍
老年痴呆，又称阿尔兹海默病(Alzheimer’sdisease，AD)，是老年性痴呆的一种，是在意识清楚下发生的、后天的、持续的、全面认知障碍综合征，临床表现为认知障碍、痴呆，其在神经病理学上有两个特征：神经纤维缠结(NeurofibrillaryTangles，NFTs)和老年斑(SenilePlaques，SPs)。历经一个多世纪的研究，阿尔兹海默病的病因仍未阐释清楚，且目前临床中使用的药物多是针对AD的病理症状，并不能从根本上治疗AD。随着老龄化社会的到来，阿尔兹海默病的提早预防和干预是提高患者自身生活质量和降低患者家庭及社会负担的有力保障。AD是神经退行性疾病，一旦发生不可逆转，松仁作为一种易得、可长期服用的坚果类食物在我国古代医书中已有“延年不老”的功效记载。发掘中药宝藏，从包括中药材的天然产物中分离、纯化和鉴定有效药用成分，开拓医药用途，对于当今医药业的发展有着非常重要的意义。
技术实现思路
本专利技术提供了一种松仁提取物及其制备方法，以及所述松仁提取物用于制备药物以及用于预防和治疗老年痴呆症的用途。首先，本专利技术提供了一种松仁提取物(UPNO-1)。所述松仁提取物是由皮诺敛酸和亚油酸为主要组分的脂肪酸组合物。所述组合物包含下述成分：亚油酸：65.0～70.0％；皮诺敛酸：25.0～30.0％；其余脂肪酸：4.0～5.0％。其中，所述其余脂肪酸包括：5,9-十八碳二烯酸(2.0～3.0％)、5,11,14-二十碳三烯酸(0.5～1.0％)、油酸(0.5～1.0％)。根据本专利技术的一种具体实施方式，上述脂肪酸组合物的成分按照质量百分比进行计算确定。另外，本专利技术还提供了所述松仁提取物的制备方法。所述方法如下步骤：提取、皂化、尿素包合、干燥。所述步骤可进一步包括：提取，包括采用正己烷为提取液，从松仁得到粗油脂提取物；皂化，包括采用皂化用碱对所述粗油脂提取物进行水解；尿素包合，包括采用尿素对所述水解产物进行纯化；以及干燥。还有，本专利技术进一步提供了一种药用组合物，其含有有效剂量的所述松仁提取物作为药用活性成分，以及药学上可接受的载体。本专利技术还提供了所述松仁提取物或其组合物用于制备药物的用途。所述药物能够用于预防和治疗老年痴呆症等疾病。所述药物可制备成胶囊剂、颗粒剂、丸剂、粉剂、口服液或注射剂。所述胶囊剂可为微型胶囊。附图说明图1显示D-gal造模和各药物组对大鼠脑海马CA1区和CA3区神经元细胞影响。其中，A、E：脑海马CA1区HE染色(400×)；B、F：脑海马CA3区HE染色(400×)；C、G：脑海马CA1区死亡神经元百分比；D、H：脑海马CA3区死亡神经元百分比；*：T检验，p＜0.05；**：T检验，p＜0.01。图2显示D-gal造模和各预防药物在不同采样点对血液氧化应激指标的影响。其中，A：血浆T-AOC活力；B：血浆T-SOD活力；C：全血CAT活力；*：T检验，p＜0.05；**：T检验，p＜0.01。图3显示应用靶向代谢组学评价D-gal及各药物在不同采样点对大鼠的影响。其中，A：不同采样点正常对照组(■)和模型组(◆)PLS-DA分组；B：不同采样点诊断模型Y’的ROC曲线；C：不同采样点药物与正常对照组(■)和模型组(◆)PLS-DA分组，4周、8周、12周显示松仁(◇)、UPNO-1鱼油(▲)的预防作用，16周显示阳性药司来吉兰UPNO-1的治疗作用；D：不同采样点诊断模型Y’值箱图。具体实施方式在下文中结合一些具体的实施方式对本专利技术作进一步的、示例性的描述。应该理解，这些描述不是用来限制本申请要求保护的范围。松仁提取物的制备粗油脂提取物制备：以松仁重量为基准，设松仁重量为1。称取1份松仁，研磨，加入正己烷4～6份，超声提取20～60min，过滤，将滤液减压蒸干，同时回收正己烷。重复此步骤，将两次得到油状物质合并，即得到粗油脂提取物。油脂的水解：用2～3份无水乙醇溶解粗油脂提取物、加入0.25～0.35份氢氧化钠，回流，2～4h后，减压浓缩，得固体。不饱和脂肪酸纯化：将上述固体物质调至酸性，然后用0.8～1.2份正己烷萃取两次，有机层用水洗至中性，减压浓缩，得黄色粘稠液体，同时回收正己烷。依次向粘稠液体中加入尿素0.8～1.2份、95％乙醇4～6份，80～85℃回流至溶解完全，降至室温后，4℃下静置24h，析出晶体。过滤，滤液减压蒸干，加入酸使成酸性，随后用0.8～1.2份正己烷萃取两次，合并有机层。将有机层水洗至中性，除水，过滤，滤液减压浓缩至恒重。干燥：室温下真空泵抽真空3～5h，得到产物松仁提取物，为黄色至棕黄色澄清的粘稠液体。产品的药学研究及功效一、产品的质量控制制得的松仁提取物为黄色至棕黄色澄清的粘稠液体，溶解于乙醇、甲醇、乙腈、正己烷，不溶于水。1.组成分析(1)高分辨质谱法应用高分辨质谱法对提取物的成分进行确认，根据获得的精确分子量对提取物中物质的化学式进行匹配，结果表明该松仁提取物(UPNO-1)中的成分包括18:2脂肪酸和18:3脂肪酸。(2)气相色谱-质谱法应用气相色谱-质谱法对松仁提取物的甲酯化样品进行进一步的结构确认，获得的气相色谱-质谱图中可见5个色谱峰。提取每个色谱峰的质谱裂解图，与标准谱库或标准品进行匹配，5个物质的结构为皮诺敛酸(与标准品保留时间、质谱裂解一致)、亚油酸(与标准品保留时间、质谱裂解一致)、5,9-十八碳二烯酸、油酸、7,11,14-二十碳三烯酸。且皮诺敛酸和亚油酸的峰响应强度远高于其余3个化合物，表明此两个化合物为松仁油提取物的主要成分。2.质量控制(1)皮诺敛酸和亚油酸比例应用液相色谱-紫外检测器对三批松仁提取物的组成进行考察，得到色谱图中共检测到5个色谱峰，经标准品保留时间比对，确认两个主峰分别为皮诺敛酸、亚油酸。计算三批样品中皮诺敛酸和亚油酸质量百分比，亚油酸：65.0～70.0％，皮诺敛酸：25.0～30.0％，其余脂肪酸：4.0～5.0％(其中其余脂肪是5,9-十八碳二烯酸：2.0～3.0％；5,11,14-二十碳三烯酸：0.5～1.0％；油酸：0.5～1.0％)。(2)残留有机溶媒对获得的三批松仁提取物依照药典(2015版)对提取过程中使用到的有机溶剂进行残留有机溶媒检查，未检测到有机溶剂(乙醇、正己烷)。二、产品具有防治老年痴呆作用1、实验动物与分组实验设为预防组和治疗组，其中预防组设计有正常对照组(C组)、D-gal模型组(D组)、松仁组(D+P组)、松仁提取物UPNO-1组(D+U组)、鱼油组(D+F组)，除正常对照组外，其余各组腹腔注射D-gal造模，并同时给予相应药物预防，实验周期为12周。治疗组设计有正常对照组(C16组)、模型组-2(D8+8-16组)、阳性药司来吉兰组(D8+S8-16组)、松仁提取物组(D8+U8-16组)，正常对照组自然喂养至第16周，其余各组于造模8周后停止造模，并开始给予相应药物进行治疗，实验周期共计16周。2.实验结果(1)松仁提取物UPNO-1对大鼠脑海马神经元的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种松仁提取物，其为由皮诺敛酸和亚油酸为主要成分的脂肪酸组合物。

【技术特征摘要】
1.一种松仁提取物，其为由皮诺敛酸和亚油酸为主要成分的脂肪酸组合物。2.根据权利要求1所述的松仁提取物，其中所述组合物按照质量百分比计算包含下述成分：亚油酸65.0～70.0％；皮诺敛酸25.0～30.0％；其余脂肪酸4.0～5.0％。3.根据权利要求2所述的松仁提取物，其中所述其余脂肪酸为：5,9-十八碳二烯酸2.0～3.0％；5,11,14-二十碳三烯酸0.5～1.0％；油酸0.5～1.0％。4.一种松仁提取物的制备方法，包括如下步骤：提取、皂化、尿素包合、干燥。5.根据权利要求4所述的制备方法，其中所述步骤为：提取，包括采用正己烷为提取液，从松仁得到粗油脂提取物；皂化，包括采用皂化用碱对所述粗油脂提取物进行水解；尿素包合，包括采用尿素对所述水解产物进行纯化；以及干燥。6.根据权利要求5所述的制备方法，在...

【专利技术属性】
技术研发人员：凌笑梅，张建美，武瑞君，林微微，李静，杨海松，
申请(专利权)人：北京大学，
类型：发明
国别省市：北京,11