一种外源性硫化氢供体及其制备和应用制造技术

本发明专利技术提供了一种外源性硫化氢供体，公开了茴三硫衍生物作为硫化氢供体对心血管疾病的治疗作用，可释放出硫化氢，能促进HUVEC动脉粥样硬化细胞模型的生长，具有抗动脉粥样硬化的作用，有望成为抗动脉粥样硬化作用药物研发的新靶点药物。

Exogenous hydrogen sulfide donor and preparation and application thereof

The present invention provides a kind of exogenous hydrogen sulfide, sulfur derivatives are disclosed as fennel three hydrogen sulfide donor effect on the treatment of cardiovascular disease, can release hydrogen sulfide, can promote the growth of HUVEC cell model of atherosclerosis, has anti atherogenic effects, is expected to become a new target for drug anti atherosclerosis drugs.

【技术实现步骤摘要】
一种外源性硫化氢供体及其制备和应用
本专利技术属于医药
，具体涉及一种外源性硫化氢供体及其制备和应用。
技术介绍
硫化氢(HydrogenSulfide,H2S)是一种无色具有臭鸡蛋气味的有毒气体，是继一氧化氮(NiticOxide,NO)和一氧化碳(CarbonMonoxide,CO)后发现的存在于体内具有广泛生理活性的第三种气体信号分子。硫化氢作为一种新型的气体信号分子，广泛参与到人体各个系统的调节，尤其是在人体心血管系统中。最近几年，对硫化氢在动脉粥样硬化的发病机制进行了体外和体内研究的诸多探讨，硫化氢已成为动脉粥样硬化疾病研究的新方向。内源性硫化氢是由哺乳动物体内含硫氨基酸在代谢过程中产生的。硫化氢主要由以下三种途径产生。硫化氢可由L-半胱氨酸在胱硫醚-β-合成酶(cystathionine-β-synthase,CBS)或胱硫醚-γ-裂解酶(Cystathionineγ-lyase,CSE)的催化作用下产生。也可由β-巯基丙酮酸在3-巯基丙酮酸转硫酶(3-mercaptosul-furtransferase,3-MST)的催化作用下产生。3种酶催化底物不同，表达也具有组织特异性。胱硫醚-β-合成酶主要分布在神经系统中，3-巯基丙酮酸转硫酶主要分布于脑和红细胞中。心血管组织包括肺动脉中的内源性硫化氢主要通过胱硫醚-γ-裂解酶催化产生。硫化氢在体内1/3以硫化氢的形式存在，2/3以硫氢化钠(sodiumhydrosulfide,NaHS)的形式存在。NaHS在体内可解离为钠离子和硫氢根离子，后者再与体内的氢离子结合生成硫化氢。硫化氢在体内大部分经氧化代谢形成硫代硫酸盐和硫酸盐而解毒，在代谢过程中谷胱甘肽可能起激发作用；少部分可经甲基化代谢而形成毒性较低的甲硫醇和甲硫醚，但高浓度甲硫醇对中枢神经系统有麻醉作用。体内代谢产物可在24h内从肾脏排出，少部分以原形经肺呼出。体内硫化氢参与了舒张血管、抑制平滑肌细胞增殖、对抗缺血再灌注的心肌的损伤具有保护等作用，因此其在心血管疾病中的保护作用备受关注。
技术实现思路
本专利技术为了提供一种治疗心血管疾病的新的靶点药物，设计了一种外源性硫化氢供体，可释放出硫化氢，具有抗动脉粥样硬化的作用。为了实现上述专利技术目的，本专利技术采用如下技术方案：一种外源性硫化氢供体，结构如下：其中，R为该外源性硫化氢供体用于制备心血管疾病治疗用药物。本专利技术还提供了外源性硫化氢供体的制备方法，包括以下步骤：A、将卡托普利溶于二氯甲烷中，加入乙酰氯，再将pH值调至8-9，继续反应，得中间产物。优选地，用三乙基胺调节pH值。三乙胺做缚酸剂，弱碱性条件才能与去甲茴三硫反应。B、将中间产物与去甲茴三硫在溶剂二氯甲烷中反应，得终产物。本专利技术还提供了另一种外源性硫化氢供体的制备方法，包括以下步骤：A、将丙谷胺溶解于溶剂二氯甲烷中，依次加入去甲茴三硫、DCC(二环己基碳二亚胺)和DMAP(4-二甲氨基吡啶)，室温下氮气保护反应；反应中加入DCC用于活化羧基，DMAP做碱。B、停止反应后往反应体系中滴加NaOH溶液至pH值为7，抽滤，将滤液于分液漏斗中加水分层，往二氯甲烷层中加入无水硫酸钠除去残留的水，旋蒸干燥得到终产物。反应中加入NaOH溶液用于洗去一些酸性副产物。当前的基础与临床研究都表明，硫化氢通过其抗炎、抗氧化、保护血管内皮、抑制血管平滑肌细胞增殖、影响脂质代谢而发挥显著的抗动脉粥样硬化效应。本专利技术首次公开了茴三硫衍生物作为硫化氢供体对心血管疾病的治疗作用，可释放出硫化氢，具有抗动脉粥样硬化的作用。本专利技术以现有药物卡托普利、丙谷胺与去甲茴三硫缩合后所制得的外源性硫化氢供体，能在体外稳定释放硫化氢，具有在有效时间内精确调控体内硫化氢的含量的效果，作为硫化氢供体型药物更具效率性和安全性。附图说明图1为去甲茴三硫的1H-NMR光谱图。图2为化合物Ⅰ的HPLC色谱图。图3为化合物Ⅰ的1H-NMR光谱图。图4为化合物Ⅰ的MS谱图。图5为化合物Ⅱ的1H-NMR光谱图。图6为亚甲基蓝分光光度法所测标准曲线。图7为化合物Ⅰ的硫化氢释放量检测结果图。图8为化合物Ⅱ的硫化氢释放量检测结果图。图9为采用CCK8法检测化合物Ⅰ对HUVEC细胞增殖活力的影响。图10为采用CCK8法检测化合物Ⅱ对HUVEC细胞增殖活力的影响。图11为硫化氢供体对IL-1β、TNF-α、IL-6和IL-10细胞因子的检测结果。具体实施方式下面结合具体实施方式对本专利技术的实质性内容作进一步详细的描述。实施例1一种外源性硫化氢供体，结构如下：实施例2本专利技术化合物Ⅰ的制备方法，包括以下步骤：A、将卡托普利溶于二氯甲烷中，加入乙酰氯，再将pH值调至8-9，继续反应，得中间产物；B、将中间产物与去甲茴三硫在溶剂二氯甲烷中反应，得终产物化合物Ⅰ。实施例3本专利技术化合物Ⅱ的制备方法，包括以下步骤：A、将丙谷胺溶解于溶剂二氯甲烷中，依次加入去甲茴三硫，DCC(二环己基碳二亚胺)，DMAP(4-二甲氨基吡啶)，室温下氮气保护反应；B、停止反应后往反应体系中滴加NaOH溶液至pH值为7，抽滤，将滤液于分液漏斗中加水分层，往二氯甲烷层中加入无水硫酸钠除去残留的水，旋蒸干燥得到终产物。实施例4去甲茴三硫的合成工艺路线为：将干燥的茴三硫(6.0185g)与无水吡啶盐酸盐(30.1553g)在干燥结晶的250ml三颈圆底烧瓶中混合，油浴加热至220℃，固体融化，反应开始。60min中反应终止。冷却至室温，加1M/L稀HCl，使其溶解，过滤。弃滤液，用蒸馏水洗涤至中性，过滤。最后用无水乙醇重结晶得产物(2.9444g)。产率：49％，1H-NMR光谱图见图1。化合物Ⅰ的合成工艺路线为：将干燥的卡托普利(0.87g)与二氯甲烷(15ml)在干燥结晶的250ml三颈圆底烧瓶中混合，冰浴下(-5-0℃)磁力搅拌反应0.5h后加入乙酰氯(0.35ml)，用三乙基胺(TEA)将PH调至8-9，室温反应4h。反应终止后过滤，加0.1M/L稀HCl萃取，然后用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液在真空干燥下蒸发，得白色固体产物。将此产物(503.9mg)与去甲茴三硫(0.91mg)在溶剂二氯甲烷(12ml)中室温下反应24h，反应终止。用盐酸，二氯甲烷萃取，取下层液加饱和氯化钠萃取，调PH至中性，取下层液加无水硫酸钠除水，过滤，旋转蒸发(40℃)，真空干燥得产物(0.12g)。产率：59.8％。HPLC色谱图见图2，1H-NMR光谱图见图3，MS谱图见图4。化合物Ⅱ的合成工艺路线为：于250ml三颈圆底烧瓶中将丙谷胺(1.338g)溶解于DCM(100ml)中，依次加入ADT-OH(0.995g)，DCC(0.9920g)，DAMP(66mg)，轻轻振荡混匀，磁力搅拌器低速搅拌，室温氮气保护4h。停止反应后往反应体系中少量多次滴加NaOH溶液(1M/L)，待PH试纸显色为7停止滴加。抽滤2-3次，弃滤渣，留滤液。将滤液于分液漏斗中加水分层，弃水层，保留DCM层。加入无水硫酸钠除去DCM层中残留的水，50度旋蒸干燥得到丙谷胺去甲茴三硫缩合物产物(1.599g)，产率为75％。1H-NMR谱图见图5。生物试验1、细胞培养采用研究动脉粥样硬化中最常用的细胞系人脐静脉内皮细胞(HUVEC)，购自上本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种外源性硫化氢供体，其特征在于，结构如下：

【技术特征摘要】
1.一种外源性硫化氢供体，其特征在于，结构如下：其中，R为2.权利要求1所述外源性硫化氢供体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：A、将卡托普利与二氯甲烷反应，加入乙酰氯，再将pH值调至8-9，继续反应，得中间产物；B、将中间产物与去甲茴三硫在溶剂二氯甲烷中反应，得终产物。3.根据权利要求2所述外源性硫化氢供体的制备方法，其特征在于，用三乙基胺调节pH值。4.权利要求1...

【专利技术属性】
技术研发人员：周春阳，陈钏，李博，袁斌，欧学兰，余刘勤，梅雪，杨春艳，
申请(专利权)人：川北医学院，
类型：发明
国别省市：四川,51