一种从狼牙刺花中提取氧化槐果碱的方法技术

本发明专利技术公开一种从狼牙刺花中提取氧化槐果碱的方法，包括以下步骤：（1）香菇和水混合后加热，过滤，取滤液对狼牙刺花进行预处理；（2）将预处理过的狼牙刺花，用至少含有一种有机溶剂的溶液浸泡提取2次，合并2次的滤液，将滤液减压浓缩得到氧化槐果碱粗提物浸膏，滤渣再用乙酸溶液浸泡提取2次，合并2次滤液，将滤液真空浓缩得到氧化槐果碱粗提物浸膏；合并得到的粗提物浸膏，经过水沉除杂后收集滤液，滤液经过真空浓缩、真空干燥、硅胶柱分离、结晶分离、重结晶后进行干燥，即得到氧化槐果碱。本发明专利技术可以将狼牙刺花进行回收利用，操作过程简单，直接提取即可得到氧化槐果碱，提取率高，产品纯度高，能达到99%以上。

【技术实现步骤摘要】
一种从狼牙刺花中提取氧化槐果碱的方法
本专利技术属于生物提取
，具体涉及一种从狼牙刺花中提取氧化槐果碱的方法。
技术介绍
狼牙刺又名白刺花,为豆科槐属多年生灌木,多生于海拔400～1500m的阳坡或河谷地带,广泛分布于我国华北、江苏、浙江、湖北、河南、陕西、甘肃及西南等省。狼牙刺的根、茎、叶、花、果实和种子中都含有生物碱，包括氧化苦参碱、槐果碱、槐定碱等多种生物碱。狼牙刺作为一种民间药材被广泛使用,氧化槐果碱是中草药的主要有效成分，具有抗炎、保肝、抗肿瘤、抗心率失常、免疫调节、升高白细胞及杀菌、杀虫、利尿、平喘、抗心律失常等作用，是研制多种人体用药、洗涤用品及杀虫类生物农药的重要原料。目前，直接从植物中提取氧化槐果碱的提取率低，一般是采用先从植物中提取得到槐果碱，再利用工业制备方法将槐果碱制备成氧化槐果碱，此种方法过程复杂、成本高。中国专利（CN102786523A）公开了一种从苦豆子中制备槐果碱的方法，利用苦豆子中各种生物碱极性不同的原理，将苦参碱、槐果碱与其他碱分离，再分离出槐果碱。但是，这种方法只能提取得到槐果碱。氧化槐果碱主要通过工业制备方法获取，导致制备工艺繁琐，例如，中国专利（CN1354181A）是将槐果碱加入双氧水中，然后将反应液萃取或者减压浓缩得到氧化槐果碱。中国专利（CN1473830A）公开了一种从白刺花中提取苦参碱的方法，是将白刺花的地上部分用盐酸浸泡，然后经过甲苯回流，煮沸，加还原剂，萃取，加酸制得苦参总碱后，将苦参总碱离心分离，经过氢化、重结晶后制备得到苦参碱和槐定碱。但是，该工艺中制备得到的苦参总碱中，槐果碱和氧化槐果碱的提取率极低，而且该工艺中使用甲苯对人体有害，难以推广应用。目前仅仅对狼牙刺种子进行生物碱提取和系列产品开发利用，而狼牙刺结实率极低，仅有不到10%的花能够成熟为种子，90%以上的花在生长过程中造成落花浪费；另外，狼牙刺种子的收集难度大且收集率低，而花朵收集率高且易收集。因此，对狼牙刺花进行开发利用，提取其中的氧化槐果碱具有积极意义。
技术实现思路
针对现有技术的缺陷，本专利技术提供一种从狼牙刺花中提取氧化槐果碱的方法，具有提取率高、纯度高的优点。本专利技术是通过以下技术方案实现的。一种从狼牙刺花中提取氧化槐果碱的方法，包括以下步骤：（1）预处理：称取香菇，按照料液比1g：30mL加入水，40-50℃加热40-60min，冷却后，过滤，香菇回收利用，得到的香菇滤液备用；将狼牙刺花和得到的香菇滤液按照料液比1:8混合，在3-6℃下浸泡2h，每隔20min翻动搅拌一次，过滤，得到预处理过的狼牙刺花；（2）提取：将步骤（1）预处理过的狼牙刺花，按照料液比1g：8mL加入至少含有一种有机溶剂的溶液，浸泡72h，过滤后收集滤液和滤渣，滤渣按照料液比1g：8mL用至少含有一种有机溶剂的溶液继续浸泡48h，过滤后收集滤液和滤渣，合并2次得到的滤液，将滤液经旋转蒸发仪减压浓缩得到氧化槐果碱粗提物浸膏；将滤渣按照料液比1g：10mL加入质量浓度为1%-5%的乙酸溶液，浸泡72h，过滤后收集滤液和滤渣，滤渣按照料液比1g：10mL用质量浓度为1%-5%的乙酸溶液继续浸泡48h，过滤后收集滤液，滤液经过真空浓缩得到氧化槐果碱粗提物浸膏；合并2次得到的氧化槐果碱粗提物浸膏，备用；（3）水沉除杂：将步骤（2）最终得到的氧化槐果碱粗提物浸膏中加入3-5倍质量的水，用氨水调节pH至11，室温下静置48h后过滤，收集滤液；（4）将步骤（3）得到的滤液经过真空浓缩得到浓缩膏、浓缩膏真空干燥后、采用甲醇和二氯甲烷为洗脱液进行硅胶柱分离、加入乙醚进行结晶分离、加入丙酮重结晶后进行干燥，即得到氧化槐果碱纯品。优选地，步骤（1）中所述至少含有一种有机溶剂的溶液为甲醇、乙醇、氯仿或二氯甲烷中的任意一种。优选地，步骤（1）中所述至少含有一种有机溶剂的溶液为体积比为（85-95）：（5-15）的甲醇和氯仿的混合物、体积比为9:1的甲醇和乙酸的混合物、或者体积比为（30-50）：（50-70）的浓氨水和氯仿的混合物中的任意一种。优选地，上述浓氨水的质量浓度为27%。优选地，步骤（2）和步骤（4）中所述的真空浓缩为：将滤液在60-65℃、真空度-0.075至-0.081MPa下真空浓缩20-25min，得到浓缩膏。优选地，上述真空干燥为：将真空浓缩得到的浓缩膏在55℃-60℃、压力-0.081至-0.085MPa条件下真空干燥6-8h，得到粉末状氧化槐果碱粗品。优选地，上述采用甲醇和二氯甲烷为洗脱液进行硅胶柱分离的具体操作为：按照质量比为1：（2-3），将氧化槐果碱粗品与200目的硅胶拌样上柱，采用甲醇和二氯甲烷为洗脱液，先按照甲醇：二氯甲烷的质量比为2：3进行洗脱，去除脂溶性色素、脂类等杂质，同时用薄层层析法检识洗脱液中的氧化槐果碱，当检测到洗脱液中氧化槐果碱呈阳性时，再按照甲醇：二氯甲烷的质量比为2：6进行洗脱，直至检测到洗脱液中氧化槐果碱呈阴性时，收集洗脱液；将收集的洗脱液减压分段蒸馏回收二氯甲烷和甲醇，当洗脱液蒸馏至干时，按照氧化槐果碱粗品与二氯甲烷的料液比为1g:1mL加入二氯甲烷，得到二氯甲烷-氧化槐果碱溶液。优选地，上述加入乙醚进行结晶分离的具体操作为：按照体积比1:1，向二氯甲烷-氧化槐果碱溶液中加入乙醚，过滤，得到滤液，按照滤液与乙醚的体积比为1:（3-5），向滤液中加入乙醚，静置结晶12h，过滤，得到氧化槐果碱结晶产品，滤液经减压分段蒸馏回收二氯甲烷和乙醚。优选地，上述加入丙酮重结晶后进行干燥的具体操作为：按照料液比1g:（3-5）mL，向氧化槐果碱结晶产品中加入丙酮，重结晶得到氧化槐果碱单体，然后在100-105℃下干燥3-4h，得到氧化槐果碱成品。采用液相色谱进行氧化槐果碱成品含量测试。本专利技术的优点：本专利技术采用狼牙刺花为原料提取氧化槐果碱，可以将落花浪费的狼牙刺花进行回收利用，原料来源广而且收取成本低，操作过程简单，直接提取即可得到氧化槐果碱，提取率高，产品纯度高，能达到99%以上。具体实施方式实施例1原料狼牙刺花中氧化槐果碱的含量检测（1）标品溶液的配制：精密称取氧化槐果碱标品10.0mg,用超纯水溶解后定容至10mL容量瓶中,制成含氧化槐果碱1.00mg/mL的标品母液；（2）样品溶液的制备：准确称取狼牙刺花样品0.5g,置于100mL三角瓶中,加入10mL分析纯浓氨水使之湿润,再加入30mL分析纯氯仿,振摇提取30min，静置4h后，过滤，滤渣连续提取3次,合并提取液,然后80℃回收氯仿，得到干燥物，干燥物用超纯水定容至25mL,经0.5μm微孔滤膜过滤后，收集滤液为样品溶液，备用；（3）色谱条件：选用ZORBAXC18色谱柱(150mm×4.6mm，5μm)；检测波长220nm；流动相为0.04mol/L的磷酸-甲醇溶液(体积比90：10，分析纯)；流速1.0mL/min；柱温20℃条件下，精密吸取标品溶液和样品溶液10μL分别进样测定。（4）检测指标：经以上方法检测，样品原料狼牙刺花中氧化槐果碱的含量为2.4%。实施例2一种从狼牙刺花中提取氧化槐果碱的方法，包括以下步骤：（1）预处理：称取香菇，按照料液比1g：30mL加入水，50℃加热40min，冷却后，过滤，香菇回收本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种从狼牙刺花中提取氧化槐果碱的方法，包括以下步骤：（1）预处理：称取香菇，按照料液比1g：30 mL加入水，40‑50℃加热40‑60min，冷却后，过滤，香菇回收利用，得到的香菇滤液备用；将狼牙刺花和得到的香菇滤液按照料液比1:8混合，在3‑6℃下浸泡2h，每隔20min翻动搅拌一次，过滤，得到预处理过的狼牙刺花；（2）提取：将步骤（1）预处理过的狼牙刺花，按照料液比1g：8 mL加入至少含有一种有机溶剂的溶液，浸泡72h，过滤后收集滤液和滤渣，滤渣按照料液比1g：8 mL用至少含有一种有机溶剂的溶液继续浸泡48 h，过滤后收集滤液和滤渣，合并2次得到的滤液，将滤液经旋转蒸发仪减压浓缩得到氧化槐果碱粗提物浸膏；将滤渣按照料液比1g：10 mL加入质量浓度为1%‑5%的乙酸溶液，浸泡72h，过滤后收集滤液和滤渣，滤渣按照料液比1g：10 mL用质量浓度为1%‑5%的乙酸溶液继续浸泡48 h，过滤后收集滤液，滤液经过真空浓缩得到氧化槐果碱粗提物浸膏；合并2次得到的氧化槐果碱粗提物浸膏，备用；（3）水沉除杂：将步骤（2）最终得到的氧化槐果碱粗提物浸膏中加入3‑5倍质量的水，用氨水调节pH至11，室温下静置48 h后过滤，收集滤液；（4）将步骤（3）得到的滤液经过真空浓缩得到浓缩膏、浓缩膏真空干燥后、采用甲醇和二氯甲烷为洗脱液进行硅胶柱分离、加入乙醚进行结晶分离、加入丙酮重结晶后进行干燥，即得到氧化槐果碱纯品。...

【技术特征摘要】
1.一种从狼牙刺花中提取氧化槐果碱的方法，包括以下步骤：（1）预处理：称取香菇，按照料液比1g：30mL加入水，40-50℃加热40-60min，冷却后，过滤，香菇回收利用，得到的香菇滤液备用；将狼牙刺花和得到的香菇滤液按照料液比1:8混合，在3-6℃下浸泡2h，每隔20min翻动搅拌一次，过滤，得到预处理过的狼牙刺花；（2）提取：将步骤（1）预处理过的狼牙刺花，按照料液比1g：8mL加入至少含有一种有机溶剂的溶液，浸泡72h，过滤后收集滤液和滤渣，滤渣按照料液比1g：8mL用至少含有一种有机溶剂的溶液继续浸泡48h，过滤后收集滤液和滤渣，合并2次得到的滤液，将滤液经旋转蒸发仪减压浓缩得到氧化槐果碱粗提物浸膏；将滤渣按照料液比1g：10mL加入质量浓度为1%-5%的乙酸溶液，浸泡72h，过滤后收集滤液和滤渣，滤渣按照料液比1g：10mL用质量浓度为1%-5%的乙酸溶液继续浸泡48h，过滤后收集滤液，滤液经过真空浓缩得到氧化槐果碱粗提物浸膏；合并2次得到的氧化槐果碱粗提物浸膏，备用；（3）水沉除杂：将步骤（2）最终得到的氧化槐果碱粗提物浸膏中加入3-5倍质量的水，用氨水调节pH至11，室温下静置48h后过滤，收集滤液；（4）将步骤（3）得到的滤液经过真空浓缩得到浓缩膏、浓缩膏真空干燥后、采用甲醇和二氯甲烷为洗脱液进行硅胶柱分离、加入乙醚进行结晶分离、加入丙酮重结晶后进行干燥，即得到氧化槐果碱纯品。2.根据权利要求1所述的一种从狼牙刺花中提取氧化槐果碱的方法，其特征在于：步骤（1）中所述至少含有一种有机溶剂的溶液为甲醇、乙醇、氯仿或二氯甲烷中的任意一种。3.根据权利要求1所述的一种从狼牙刺花中提取氧化槐果碱的方法，其特征在于：步骤（1）中所述至少含有一种有机溶剂的溶液为体积比为（85-95）：（5-15）的甲醇和氯仿的混合物、体积比为9:1的甲醇和乙酸的混合物、或者体积比为（30-50）：（50-70）的浓氨水和氯仿的混合物中的任意一种。4.根据权利要求3所述的一种...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘煜华，周宝龙，王光中，牛森，
申请(专利权)人：刘煜华，
类型：发明
国别省市：陕西,61