允许在营养不良的情况下促进人和动物的幼年生长的乳杆菌组合物制造技术

本发明专利技术涉及包含至少一种具有肠道向性的乳杆菌属(Lactobacillus)菌株的药物组合物或益生组合物，所述乳杆菌属菌株尤其选自植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)和干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)这些物种，所述组合物用于旨在在营养不良的情况下促进幼年生长的用途。所述营养不良尤其为以蛋白质缺乏为特征的营养不良。所述菌株可以在果蝇模型上和/或在小鼠模型上进行选择。本发明专利技术还涉及使用该组合物的益生性处理方法。

Lactobacillus composition that permits the promotion of juvenile growth in humans and animals under malnutrition

The present invention relates to containing at least one has to the intestinal Lactobacillus (Lactobacillus) pharmaceutical composition or composition of the probiotic bacterium, Lactobacillus plantarum (especially from Lactobacillus plantarum), l.fermentum (Lactobacillus fermentum) and Lactobacillus casei (Lactobacillus casei) of these species, the the composition for the purpose to promote the early growth in the case of malnutrition. Malnutrition, especially for protein deficiency, is characterized by malnutrition. The strains can be selected on a fly fly model and / or on a mouse model. The present invention also relates to prebiotic treatment using the composition.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】允许在营养不良的情况下促进人和动物的幼年生长的乳杆菌组合物本专利技术涉及在营养不良的情况下促进人和动物的幼年生长的药物组合物或益生组合物。该组合物包含至少一种具有肠道向性的细菌(优选地乳酸细菌)作为活性成分或组分。被描述为“附加器官”的肠道微生物群落(或肠道微生物丛)通过行使众多生物学功能来发挥对于宿主有益的关键作用，例如有助于消化的效率、底物的代谢、针对病原体的斗争或者免疫应答的确立和稳态。不同肠道细菌种群之间的不平衡具有有时有害的回应，其导致各种不同的病理学状况(例如，慢性炎性疾病，或代谢病症，包括肥胖症或者2型糖尿病)的发展。这些不平衡还潜在地牵涉癌症的发展和行为综合征的确立。因此，维持肠道微生物丛的平衡是必需的：影响其组成和/或其活性将会是用于治疗上述综合征的一个主要成功手段。本着该精神，使用所谓“益生的”细菌菌株来干预由所述微生物丛所影响的病理学状况的想法体现了其全部意义。2001年由世界卫生组织(WHO)和联合国粮农组织(FAO)定义，益生菌是“当以足够的量摄入时对于健康产生超过传统营养效应之外的正面效应的活微生物”。至于本专利技术，其属于允许优化幼年生长或者在营养不良的背景下恢复正常的幼年生长的条件重建。因此，本专利技术的目标在于提出新的组合物，其允许在已经经历或正经历营养不良(尤其是进食不足和/或同化不良)的人或动物受试者中促进幼年生长或者重建正常的幼年生长。本专利技术的另一个目标在于提供这样的组合物，其基于使用具有肠道向性的细菌菌株，尤其是共生的或者作为益生菌可接受的菌株。本专利技术的另一个目标在于提供这样的组合物，其还可以被纳入在治疗背景中。本专利技术的另外一个目标在于提供益生性处理或治疗性处理的方法。本专利技术的另外一个目标在于提供这样的组合物和方法，其允许支持按照现行法规(尤其是欧洲法规)的健康和/或营养主张。本专利技术基于这样的事实，即某些在动物物种中具有肠道向性的细菌菌株具有在经历营养不良(尤其是进食不足或同化不良)的该同一物种或另一物种的受试者中促进或重建幼年生长的效应。因此，已经能够证明乳杆菌属(Lactobacillus)的细菌菌株在果蝇模型中和在与营养缺乏型营养饮食制度相联合的小鼠模型中均能够促进幼年生长，和此外，已经能够在这些在小鼠中的结果与在这些条件下用这些细菌处理的小鼠中的IGF-1血清滴度的增加之间建立联系。因此，本专利技术的目标在于包含至少一种具有肠道向性的细菌菌株(特别是乳酸细菌)的组合物，所述组合物用于为了在营养不良的情况下促进幼年生长而进行使用。营养不良的概念集合了进食不足、进食过量和同化不良。本专利技术特别地针对进食不足和/或同化不良。本专利技术优选地针对进食不足。所述组合物的适应症将可以是治疗性的或健康的，例如药物，或者是营养性的，例如益生制剂。具有“肠道向性”的细菌是指具有通过胃屏障的能力和能够在肠中坚持的细菌。按照本专利技术的一个有利的特征，所述细菌可以在用根据本专利技术的组合物进行处理的人或动物中促进IGF-1的产生。本专利技术尤其提出了属于下列科的细菌菌株：乳杆菌科(Lactobacillaceae)、链球菌科(Streptoccaceae)、肠球菌科(Enterococcaceae)、明串珠菌科(Leuconostocaceae)、双歧杆菌科(Bifidobacteriaceae)。依照一种方式，本专利技术使用一种或多种乳杆菌属菌株，特别是下列物种之一：德氏乳杆菌(Lactobacillusdelbrueckii)、植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)、发酵乳杆菌(Lactobacillusfermentum)、干酪乳杆菌(Lactobacilluscasei)、类干酪乳杆菌(Lactobacillusparacasei)、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillusrhamnosus)。更特别地，所述细菌为属于植物乳杆菌、发酵乳杆菌、干酪乳杆菌、类干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌这些物种的细菌。依照一种方式，所述菌株选自植物乳杆菌、发酵乳杆菌、干酪乳杆菌这些物种。依照一个实施方案，所述细菌菌株选自植物乳杆菌WJL、植物乳杆菌G821、干酪乳杆菌ATCC393、干酪乳杆菌L919、类干酪乳杆菌ATCC25302、类干酪乳杆菌Shirota、发酵乳杆菌ATCC9338、鼠李糖乳杆菌L900、鼠李糖乳杆菌L908、鼠李糖乳杆菌GG。依照一种方式，所述菌株选自植物乳杆菌WJL、植物乳杆菌G821、干酪乳杆菌ATCC393、干酪乳杆菌L919、发酵乳杆菌ATCC9338。在一个特别的实施方案中，所述细菌是植物乳杆菌这一物种的细菌，例如菌株WJL，或菌株G821，其于2015年5月11日以登记号CNCMI-4979保藏于国家微生物保藏中心(CollectionNationaledeCulturedeMicroorganismes)(InstitutPasteur)。已经通过植物乳杆菌NIZO2877这一菌株的实验进化(即通过天然变体的积累和选择)而获得了菌株G821。依照一种方式，根据本专利技术的组合物包含至少一种从这些群中选择的细菌菌株，其具有所要求的特性并且允许促进或重建幼年生长，尽管有着营养不良的插曲。当然，根据本专利技术的组合物可以包含多于一种符合本专利技术的需求的细菌菌株。尤其，所述组合物包含选自相同物种或不同物种的2种或更多种这些细菌菌株。依照一个令人感兴趣的实施方案，所述细菌为植物乳杆菌。合适的菌株为植物乳杆菌G821和植物乳杆菌WJL(Eun-KyoungKim等人,GenomeAnnouncements,2013年11/12月,vol.1,no.6e00937-13,GenBankAUTE00000000,LactobacillusplantarumWJL,wholegenomeshotgunsequencingproject)。该菌株WJL最初已分离出并且可以从果蝇中分离(JHRyu等人,Science2008,319:777-782)。合适菌株的其他例子为下列：干酪乳杆菌ATCC393、干酪乳杆菌L919(Koryszewska-BaginskaA.等人,2013年9月26日,GenomeAnnounc)、类干酪乳杆菌ATCC25302、类干酪乳杆菌Shirota(YukiN等人,IntJFoodMicrobiol.1999年4月1日,48(1):51-7)、发酵乳杆菌ATCC9338、鼠李糖乳杆菌L900(Aleksandrzak-PiekarczykT.等人,GenomeAnnounc,2013年8月15日)、鼠李糖乳杆菌L908(Koryszewska-BaginskaA.等人,2014年2月20日,GenomeAnnounc)、鼠李糖乳杆菌GG(KankainenM.等人,ProcNatlAcadSciUSA,2009年10月6日)。因此，本专利技术在技术上提供了教导，即具有肠道向性的细菌菌株促进幼年生长，尤其是在营养不良的(人或动物)患者中。但是，本专利技术并不局限于该教导，它还向技术人员提供可靠地测定对于本专利技术来说有用的细菌菌株。不同的标准可以基于测试，其中单独地或相联合地进行使用。在这些标准中，将会注意到在模型动物(例如小鼠)中的IGF-1血清水平、在黑腹果蝇(D本文档来自技高网...

【技术保护点】
包含至少一种具有肠道向性的乳杆菌属(Lactobacillus)菌株的组合物，所述乳杆菌属菌株选自植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)这些物种，所述组合物用于旨在在营养不良的情况下促进幼年生长的用途。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2014.05.16 FR 14544221.包含至少一种具有肠道向性的乳杆菌属(Lactobacillus)菌株的组合物，所述乳杆菌属菌株选自植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)、发酵乳杆菌(Lactobacillusfermentum)、干酪乳杆菌(Lactobacilluscasei)这些物种，所述组合物用于旨在在营养不良的情况下促进幼年生长的用途。2.根据权利要求1的组合物，其中所述乳杆菌属菌株选自植物乳杆菌WJL、植物乳杆菌G821、干酪乳杆菌ATCC393、干酪乳杆菌L919、发酵乳杆菌ATCC9338。3.根据权利要求1或2的组合物，其中所述乳杆菌属菌株对于下述测试作出阳性反应：-拥有一批无菌的黑腹果蝇(Drosophilamelanogaster)亲本的胚胎；-在第1天：在包含玉米粉、琼脂和水且缺乏酵母的营养培养基上将这些胚胎分配成至少2个组(40个胚胎，以三次重复实施，即120个胚胎/组)，此外将所述胚胎组之一用在盐水缓冲液中的大约108CFU的待测试细菌的悬浮液进行接种，这形成单菌组，另一组为无菌组，在大约25℃下进行这两个组的饲养直至第7天；-在第7天：从每个组中回收至少60只果蝇幼虫，对它们施行热休克；-测定每个组的幼虫的长度平均值，并比较所获得的平均值；-如果单菌组的幼虫的长度平均值以下述程度大于无菌组的幼虫的长度平均值，那么认为所测试的细菌菌株对于所述测试作出阳性反应：在对于所述两个组的幼虫的整套大小数据进行的Mann-Whitney统计学检验中具有小于或等于0.001，优选地小于或等于0.0001的p值。4.根据权利要求3的组合物，其包含这样的细菌菌株，所述细菌菌株在该相同的在果蝇上的测试之中相对于植物乳杆菌WJL这一菌株而言具有强的效应，其中用该细菌菌株的单菌组的幼虫的长度平均值显著地大于关于用菌株WJL的单菌组的平均值，当在对于所述两个组的幼虫的整套大小数据进行的Mann-Whitney统计学检验中p值小于或等于0.001，优选地小于或等于0.0001时。5.根据权利要求1至4中任一项的组合物，其中所述乳杆菌属菌株对于下述测试作出阳性反应：-从相同的小鼠品系开始，建立无菌亲本小鼠品系和单菌亲本小鼠品系(与待测试细菌相关联的)，并且产生幼年鼠，将所述幼年鼠与亲本一起用常规营养培养基进行饲养直至其断奶(第21天)；-在第21天：拥有来自这两个品系中每一个品系的8只经断奶的幼年鼠，从而形成单菌组和无菌组，并且将它们以缺乏蛋白质(8％)和脂质(2.5％)的营养饮食制度进行饲养；-在第56天：通过对每个个体从口鼻部端部至尾巴基部进行测量，测定关于每个所考虑的组的小鼠的大小平均值，或者取出每个组的个体的股骨并对其进行测量；-如果单菌组的个体或股骨的平均大小以下述程度大于无菌组的个体或股骨的平均大小，那么认为所述乳酸细菌菌株对于所述测试作出阳性反应：在Tukey统计学检验中具有小于或等于0.05的p值。6.根据权利要求5的组合物，其包含这样的细菌菌株，所述细菌菌株在该相同的在小鼠上的测试之中相对于植物乳杆菌WJL这一菌株而言具有强的效应，其中用该细菌菌株的单菌组的小鼠或其股骨的大小平均值显著地大于关于用菌株WJL的单菌组的平均值，当在Tukey统计学检验中p值小于或等于0.05时。7.根据权利要求1至6中任一项的组合物，其中所述乳杆菌属菌株对于下述测试作出阳性反应：-从相同的无菌小鼠品系开始，建立无菌亲本小鼠品系和单菌亲本小鼠品系(与待测试细菌相关联的)，并且产生幼年鼠，将所述幼年鼠与亲本一起用常规营养培养基进行饲养直至其断奶(第21天)；-在第21天：拥有来自这两个品系中每一个品系的8只经断奶的幼年鼠，从而形成单菌组和无菌组，并且将它们以缺乏蛋白质(8％)和脂质(2.5％)的营养饮食制度进行饲养；-在第56天：抽取每个组的幼年鼠的血液，并测定关于每个组的IGF-1的平均血清水平；-如果单菌组的IGF-1的平均血清水平以下述程度大于无菌组的平均血清水平，那么认为所述乳酸细菌菌株对于所述测试作出阳性反应：在Tukey统计学检验中具有小于或等于0.05的p值。8.根据权利要求7...

【专利技术属性】
技术研发人员：F·勒里尔，G·斯托勒里，M·施瓦策尔，M·E·马蒂诺，
申请(专利权)人：里昂高等师范学院，克劳德伯纳德里昂第一大学，国家科研中心，
类型：发明
国别省市：法国,FR