【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物
,具体地说涉及玻璃酸酶精品的提取方法。
技术介绍
玻璃酸酶(Hyaluronidasum)又名玻璃糠醛酸醋、透明质酸酶。商品名称:Rondas。1929年DuranReynals发现用睾丸提取液在皮下注射时,能产生一种异常的扩散作用,他把这种具有扩散作用的物质称为“扩散因素”(Spreadingfactor)。Chain和Duthie于1940年研究确定这种“扩散因素”是一种酶,并命名为玻璃酸酶(即透明质酸酶)。此酶分成三种不同类型:睾丸型玻璃酸酶,水蛭玻璃酸酶,细菌玻璃酸酶。目前,我国在玻璃酸酶的工业生产中,是从羊睾丸中提取。玻璃酸酶是一种粘液水解剂和药物扩散剂,现在临床使用渐趋普遍。国外于50年代初已生产,并正式收载于日本、英国药典中,我国于1965年由上海生物化学制药厂正式投产,并收载于1977年版中国药典。
技术实现思路
在专利技术的技术方案中,还具有以下技术特征:所述玻璃酸酶精品的提取方法包括如下步骤:(1)取新鲜羊睾丸,剥除内外皮层及副睾丸,用绞肉机绞成糜浆;称取糜浆,按每1千克糜浆加酸液1.5-2.0L的比例,加酸液搅拌,浸出5小时后,将浸出液过滤,滤液调pH3.2-4.0;取滤渣,按每1千克开始加入的糜浆,加酸液0.3-0.4L的比例,加酸液搅拌1小时后,再次过滤,滤液调pH3.2-4.0;所述酸液为冰醋酸,盐酸,氯化钠和水的混合酸液;(2)合并步骤(1)中滤液,不断搅拌,每千克加硫酸铵210克,使完全溶解,静置1-2小时,装入双层涤纶布袋中吊滤,反复1-2次,次日得澄清的滤液,在不断搅拌下,每千克滤液加入硫酸铵29 ...
【技术保护点】
一种玻璃酸酶精品的提取方法,其特征在于包括如下步骤:(1)取新鲜羊睾丸,剥除内外皮层及副睾丸, 用绞肉机绞成糜浆;称取糜浆,按每1千克糜浆加酸液1.5‑2.0L的比例,加酸液搅拌,浸出5小时后,将浸出液过滤,滤液调pH3.2‑4.0;取滤渣,按每1千克开始加入的糜浆,加酸液0.3‑0.4L的比例,加酸液搅拌1小时后,再次过滤,滤液调pH3.2‑4.0;所述酸液为冰醋酸,盐酸,氯化钠和水的混合酸液;(2)合并步骤(1)中滤液, 不断搅拌, 每千克加硫酸铵210克, 使完全溶解, 静置1‑2小时, 装入双层涤纶布袋中吊滤,反复1‑2次, 次日得澄清的滤液,在不断搅拌下, 每千克滤液加入硫酸铵290克,继续搅拌使完全溶解, 静置1‑2小时后, 用涤纶吊滤过夜, 次日拆装得粗制品;(3)取步骤(2)中粗制品溶于冰蒸馏水0.3千克中, 在不断搅拌下, 缓缓加入硫酸铵(C.P)5克, 使完全溶解, 在冷库中静置过夜, 次日除去液面脂肪, 用胶管虹吸取中层清液, 在布氏漏斗上减压过滤, 合并滤液, 在不断搅拌下,缓缓加入硫酸铵(C.P)25克, 使完全溶解,在冷库中放置过夜,次日吸除上层清液, 得湿 ...
【技术特征摘要】
1.一种玻璃酸酶精品的提取方法,其特征在于包括如下步骤:(1)取新鲜羊睾丸,剥除内外皮层及副睾丸,用绞肉机绞成糜浆;称取糜浆,按每1千克糜浆加酸液1.5-2.0L的比例,加酸液搅拌,浸出5小时后,将浸出液过滤,滤液调pH3.2-4.0;取滤渣,按每1千克开始加入的糜浆,加酸液0.3-0.4L的比例,加酸液搅拌1小时后,再次过滤,滤液调pH3.2-4.0;所述酸液为冰醋酸,盐酸,氯化钠和水的混合酸液;(2)合并步骤(1)中滤液,不断搅拌,每千克加硫酸铵210克,使完全溶解,静置1-2小时,装入双层涤纶布袋中吊滤,反复1-2次,次日得澄清的滤液,在不断搅拌下,每千克滤液加入硫酸铵290克,继续搅拌使完全溶解,静置1-2小时后,用涤纶吊滤过夜,次日拆装得粗制品;(3)取步骤(2)中粗制品溶于冰蒸馏水0.3千克中,在不断搅拌下,缓缓加入硫酸铵(C.P)5克,使完全溶解,在冷库中静置过夜,次日除去液面脂肪,用胶管虹吸取中层清液,在布氏漏斗上减压过滤,合并滤液,在不断搅拌下,缓缓加入硫酸铵(C.P)25克,使完全溶解,在冷库中放置过夜,次日吸除上层清液,得湿固体,溶于冰蒸馏水100毫升中,以透析纸包扎放在pH值6.5磷酸盐-柠檬酸缓冲液1千克中,在冷库透析24小时,可进行步骤(4);(4)触破透析袋,透析液用高速离心机进行分离,然后将分离液20克倒入烧杯中,置冰浴中,加入150%磷酸三钠15毫升,在不断搅拌下,续加20%醋酸钙10毫升,并以0.5mol/LNaOH调PH值至8.0-9.0,继续搅拌10分钟,...
【专利技术属性】
技术研发人员:刘乃山,张会灵,陈娥功,
申请(专利权)人:青岛冠龙生物制药有限公司,
类型:发明
国别省市:山东;37
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