一种痔疮药物指标成分含量的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种痔疮药物指标成分含量的检测方法，其属于医药技术领域。所述指标成分包括苦参碱、盐酸黄柏碱、盐酸小檗碱和氢溴酸东莨菪碱。为了规避仅测定单一成分或两种成分的含量，本发明专利技术采用高效液相色谱法，从痔疮药物供试品溶液的配制、对照品溶液的配制以及色谱条件选择上成功地实现了同时且快速测定四个指标成分含量。该检测方法还具有准确度、精密度高，稳定性、重复性及专属性好的特点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及医药
，尤其涉及一种痔疮药物指标成分含量的检测方法。
技术介绍
痔疮是一种位于肛门部位的常见疾病，随着年龄增长，发病率逐渐增高。用于治疗痔疮的痔疮药按类别可以分为三大类：西药、中药和中西药复方制剂，中药有痔炎消颗粒、痔康片和痔疮止血丸等，中西药复方制剂有化痔栓等，相比西药，中药和中西药复方制剂的成分相对复杂。《中国药典》2015年版一部公开了化痔栓的处方为：次没食子酸铋200g、苦参370g、黄柏92.5g、洋金花55.5g、冰片30g。化痔栓的制法为：苦参、黄柏、洋金花加水煎煮二次，第一次4h，第二次2h；合并煎液，过滤并静置12h，将上清液浓缩至相对密度为1.12(60～65℃)的清膏，干燥后粉碎成最细粉；将2.6g的羟苯乙酯用适量乙醇溶解；另取基质适量，加热熔化，加入次没食子酸铋、上述最细粉、冰片以及16.8g聚山梨酯80、羟苯乙酯乙醇液，混匀、灌注，即制成1000粒。本品清热燥湿，收涩止血，用于大肠湿热所致的内外痔、混合痔疮。目前，《中国药典》仅收载了次没食子酸铋及冰片中龙脑的含量测定方法。化痔栓作为中西药复方制剂，不是若干成分简单地加合，而是多个活性成分整体发挥疗效作用。现有技术仅对次没食子酸铋、冰片中的龙脑和苦参中的苦参碱进行检测，仍有多个指标成分未得到检测，缺乏全面性而不能反映药品整体质量。此外，相关文献有公布过：检测含苦参、黄柏或洋金花药材的中药相关成分的含量，但这些方法仍旧比较片面，难以适用于化痔栓乃至痔疮药物的质量检测。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术存在的不足之处而提供一种更全面、可靠的痔疮药物指标成分含量的检测方法，本专利技术将盐酸小檗碱、盐酸黄柏碱、苦参碱和氢溴酸东莨菪碱作为化痔栓乃至痔疮药的指标成分，采用高效液相色谱法同时快速地定量测定，避免仅靠检测单一成分而误判药物的质量。本专利技术采用的技术方案为：一种痔疮药物指标成分含量的检测方法，所述指标成分包括苦参碱、盐酸黄柏碱、盐酸小檗碱和氢溴酸东莨菪碱，所述检测方法包括以下步骤：1)痔疮药物供试品溶液的配制：将痔疮药物粉末置于醇溶液中提取，过滤，浓缩滤液；对照品溶液的配制：配制苦参碱、盐酸黄柏碱、盐酸小檗碱和氢溴酸东莨菪碱的对照品溶液；2)分别精密吸取痔疮药物供试品溶液和对照品溶液，注入高效液相色谱仪，测定；其中色谱条件选择为：采用梯度洗脱，流动相A为乙腈，流动相B为含有十二烷基磺酸钠的酸溶液，检测波长为210～230nm，柱温为20～30℃。作为对上述技术方案的进一步改进，所述检测波长为220nm，柱温为20℃，此时各指标成分(苦参碱、盐酸黄柏碱、盐酸小檗碱和氢溴酸东莨菪碱)之间分离效果较佳。作为对上述技术方案的进一步改进，所述痔疮药物供试品溶液的配制具体为：将痔疮药物粉末置于醇溶液中，相对于每克痔疮药物，所述醇溶液的体积为20～30mL；超声处理30～60min，冷却后添加醇溶液，补足减小的重量；冷冻30～60min后进行过滤，将滤液浓缩至原体积的2/25～1/8。更优选地，相对于每克痔疮药物，所述醇溶液的体积为25mL，浓缩液的体积为原体积的1/10，此时醇溶液提取的指标成分含量更佳，不需要过度浓缩，且适合高效液相色谱的测定。更优选地，所述痔疮药物溶液配制的超声处理时间为45min，冷冻时间为45min。作为对上述技术方案的进一步改进，所述对照品溶液的配制具体为：称取苦参碱对照品、盐酸黄柏碱对照品、盐酸小檗碱对照品和氢溴酸东莨菪碱的对照品，加入所述醇溶液配制成苦参碱浓度为241.3～3860.0μg/mL、盐酸黄柏碱浓度为27.4～438.4μg/mL、盐酸小檗碱浓度为25.9～414.0μg/mL、氢溴酸东莨菪碱浓度为10.1～161.8μg/mL的混合溶液。对照品混合液浓度在上述范围内时，得出的线性关系更优，检测的指标成分含量更准确。作为对上述技术方案的更进一步改进，所述醇溶液为50％～100％甲醇溶液或50％～100％乙醇溶液。50％～100％甲醇或乙醇提取的四种指标成分效果更好，含量检测的结果比较客观。作为对上述技术方案的进一步改进，所述醇溶液为60％甲醇溶液。作为对上述技术方案的进一步改进，所述流动相B中的酸为冰醋酸、磷酸或甲酸，所述酸在流动相B中的体积百分数为0.05％～0.3％，所述十二烷基磺酸钠在流动相B中的质量百分数为0.1％～0.3％。作为对上述技术方案的更进一步改进，所述酸在流动相B中的体积百分数为0.1％，所述十二烷基磺酸钠在流动相B中的质量百分数为0.2％。作为对上述技术方案的进一步改进，所述梯度洗脱的程序为：0～9min，流动相A为33％→35％，流动相B为67％→65％；9～18min，流动相A为35％→40％，流动相B为65％→60％；18～30min，流动相A为40％→50％，流动相B为60％→50％；30～50min，流动相A为50％→60％，流动相B为50％→40％；以上涉及的百分比均为体积百分比。该梯度洗脱的程序能在保证分离四种指标成分的前提下，缩短各组分的保留时间，提高检测效率，同时确保色谱基线比较平稳。作为对上述技术方案的进一步改进，测定时使用的色谱柱是以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的C18柱。作为对上述技术方案的进一步改进，所述痔疮药物为化痔栓。本专利技术的有益效果在于：本专利技术将盐酸小檗碱、盐酸黄柏碱、苦参碱和氢溴酸东莨菪碱作为化痔栓乃至痔疮药物的指标成分，规避了仅测定单一成分或两种成分含量的问题；但是，中药和中西药复方制剂成分复杂，易影响分离、测定，本专利技术为此采用高效液相色谱法，从供试药物溶液、对照品溶液的制备以及色谱条件和流动相系统选择上通过大量创造性的劳动成功地实现了同时且快速测定四个指标成分含量。该检测方法同时还具有准确度、精密度高，稳定性、重复性及专属性好的特点。附图说明图1是盐酸小檗碱、盐酸黄柏碱、苦参碱和氢溴酸东莨菪碱混合对照品溶液的HPLC色谱图；图2是化痔栓供试药物溶液的HPLC色谱图；图3是阴性样品溶液的HPLC色谱图，其中阴性样品不包括盐酸小檗碱、盐酸黄柏碱、苦参碱和氢溴酸东莨菪碱。具体实施方式为更好地说明本专利技术的目的、技术方案和优点，下面将结合具体实施例及附表对本专利技术作进一步说明。实施例11)供试品溶液的配制：取化痔栓粉末约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中；向锥形瓶中精密加入60％甲醇25mL，密塞，称定重量，超声处理45min；放冷，再称定重量，用60％甲醇补足减失的重量；摇匀，冷冻45min；过滤，精密移取续滤液20mL，浓缩至2mL，即得。对照品溶液的配制：取盐酸小檗碱对照品、盐酸黄柏碱对照品、苦参碱对照品和氢溴酸东莨菪碱对照品适量，精密称定，加60％甲醇制成苦参碱浓度为1930.0μg/mL、盐酸黄柏碱浓度为109.6μg/mL、盐酸小檗碱浓度为103.5μg/mL、氢溴酸东莨菪碱浓度为20.2μg/mL的混合对照品溶液。2)高效液相色谱的测定条件：色谱柱是以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的C18柱；流动相A为乙腈，流动相B为含0.2％十二烷基磺酸钠的0.1％磷酸溶液；检测波长为220nm，柱温为20℃，进样量为10μL，梯度洗脱的程序见表1(其中，涉及的百分比为体积百分比)。供试品溶液的指标成分含本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种痔疮药物指标成分含量的检测方法，其特征在于：所述指标成分包括苦参碱、盐酸黄柏碱、盐酸小檗碱和氢溴酸东莨菪碱，所述检测方法包括以下步骤：1)痔疮药物供试品溶液的配制：将痔疮药物粉末置于醇溶液中提取，过滤，浓缩滤液；对照品溶液的配制：配制苦参碱、盐酸黄柏碱、盐酸小檗碱和氢溴酸东莨菪碱的对照品溶液；2)分别精密吸取痔疮药物供试品溶液和对照品溶液，注入高效液相色谱仪，测定；其中色谱条件选择为：采用梯度洗脱，流动相A为乙腈，流动相B为含有十二烷基磺酸钠的酸溶液，检测波长为210～230nm，柱温为20～30℃。

【技术特征摘要】
1.一种痔疮药物指标成分含量的检测方法，其特征在于：所述指标成分包括苦参碱、盐酸黄柏碱、盐酸小檗碱和氢溴酸东莨菪碱，所述检测方法包括以下步骤：1)痔疮药物供试品溶液的配制：将痔疮药物粉末置于醇溶液中提取，过滤，浓缩滤液；对照品溶液的配制：配制苦参碱、盐酸黄柏碱、盐酸小檗碱和氢溴酸东莨菪碱的对照品溶液；2)分别精密吸取痔疮药物供试品溶液和对照品溶液，注入高效液相色谱仪，测定；其中色谱条件选择为：采用梯度洗脱，流动相A为乙腈，流动相B为含有十二烷基磺酸钠的酸溶液，检测波长为210～230nm，柱温为20～30℃。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述步骤1)中，所述痔疮药物供试品溶液的配制具体为：将痔疮药物粉末置于醇溶液中，相对于每克痔疮药物，所述醇溶液的体积为20～30mL；超声处理30～60min，冷却后添加醇溶液，补足减小的重量；冷冻30～60min后进行过滤，将滤液浓缩至原体积的2/25～1/8。3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述对照品溶液的配制具体为：称取苦参碱对照品、盐酸黄柏碱对照品、盐酸小檗碱对照品和氢溴酸东莨菪碱的对照品，加入所述醇溶液配制成苦参碱浓度为241.3～3860.0μg/mL、盐酸黄柏碱浓度为27.4～438.4μg/mL、盐酸小檗碱浓度为25.9～4...

【专利技术属性】
技术研发人员：彭红英，朱少璇，陈晓坚，江涛，程君璐，贾佳良，
申请(专利权)人：广州白云山敬修堂药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44