一种用分子印迹试纸条快速检测三聚氰胺的方法技术
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及分子印迹
，具体涉及一种用分子印迹试纸条快速检测三聚氰胺的方法。
技术介绍
三聚氰胺（MEL）是一种三嗪类含氮杂环有机化合物，简称三胺，分子量为126.13。是一种无色单斜棱晶体，无味，在水中和有机溶剂中的溶解度都很低。三聚氰胺是一种用途广泛的有机化工产品，作为生产三聚氰胺甲醛树脂（MF）的原料是其最主要的用途，含三聚氰胺的化学化工产品具有不易燃，耐水、耐热、耐电弧、耐老化、耐化学腐蚀的优点。三聚氰胺及其衍生物本身并不是蛋白质，对人体健康不仅不能提供营养反而对身体健康造成负面影响。但因其含氮量较高，达到66%，常被非法加入牛奶、饼干等日常食物中，如2008年9月，我国爆发的婴幼儿奶粉中非法添加三聚氰胺污染事件。牛奶中添加三聚氰胺之后，只能在检测中造成蛋白质含量增高的假象，长期重复大量摄入三聚氰胺可能导致膀胱结石、肾结石等。食品与药品监管局（FDA）设定三聚氰胺的每人每日耐受摄入量（TDI）为0.63mg/kg体重。对婴幼儿奶粉中三聚氰胺的安全阂值要求更为严格，设定每日耐受摄入量为成年人的十分之一，体重以7.0kg计算，则婴幼儿配方奶粉中的安全...
【技术保护点】
一种快速检测三聚氰胺的方法，其特征在于具体步骤为：(1) 三聚氰胺分子印迹聚合物的制备称取0.0020 ~ 0.0032 g N,N‑亚甲基双丙烯酰胺，加入20 mL 浓度为3×10‑4 mol/L三聚氰胺溶液，2 ~ 7 mL分析纯α‑甲基丙烯酸，超声10分钟；静置过夜后，加入0.01 ~ 0.03 g过硫酸铵引发，反应2 ~ 7分钟，即制得三聚氰胺分子印迹聚合物，在冰箱中储存，备用；(2) 高碘酸氧化法制备葡萄糖氧化酶标记三聚氰胺称取4 ~ 6 mg葡萄糖氧化酶溶于1 mL二次水，加入0.2 mL浓度为0.1 mol/L 的NaIO4溶液，室温下避光搅拌20分钟；将上述...
【技术特征摘要】
1.一种快速检测三聚氰胺的方法，其特征在于具体步骤为：(1)三聚氰胺分子印迹聚合物的制备称取0.0020~0.0032gN,N-亚甲基双丙烯酰胺，加入20mL浓度为3×10-4mol/L三聚氰胺溶液，2~7mL分析纯α-甲基丙烯酸，超声10分钟；静置过夜后，加入0.01~0.03g过硫酸铵引发，反应2~7分钟，即制得三聚氰胺分子印迹聚合物，在冰箱中储存，备用；(2)高碘酸氧化法制备葡萄糖氧化酶标记三聚氰胺称取4~6mg葡萄糖氧化酶溶于1mL二次水，加入0.2mL浓度为0.1mol/L的NaIO4溶液，室温下避光搅拌20分钟；将上述溶液装入透析袋中，对浓度为1mmol/L、pH=4.4的HAC-NaAC缓冲液透析，4℃过夜；加入20mL浓度为0.2mol/LpH=9.5碳酸盐缓冲液，使葡萄糖氧化酶的pH升高至9.0~9.5；取另一个10mL比色管，加入8~12mg三聚氰胺和1mL浓度为0.01mol/LpH=9.5的碳酸盐缓冲液，与上述葡萄糖氧化酶混合，室温避光搅拌2小时；往混合液中加入0.1mL浓度为4mg/mL的NaBH4混匀，4℃放置2小时；将上述溶液装入透析袋中，对浓度为0.15mol/L、pH=7.4的PBS缓冲液透析，4℃过夜；透析完成后，将标记物分装入1mL比色管中，4℃避光保存；(3)试纸条的制作剪取长×宽为4×1cm的塑料基底，在黑色基底区域刻出0.5×0.5cm的孔穴区域，将硝酸纤维素膜贴在该孔穴区域背面，将步骤（1）制得的三聚氰胺分子印迹聚合物滴加在硝酸纤维素膜表面，分布均匀后室温条件下晾干；接着，往三聚氰胺印迹聚合物上滴加15~25mL质量百分比浓度为25%的乙醇，洗脱2~4分钟，用二次水淋洗，以除去三聚氰胺分子印迹聚合物中的三聚氰胺和部分吸附物，晾干，从而制备得到保留有特异性识别孔穴的三聚氰胺分子印迹试纸条，避光保存；(4)检测方法取步骤（3）制得的三聚氰胺分子印迹试纸条一支，将15~25μL标记好的葡萄糖氧化酶标记三聚氰胺溶液滴加到已经除去模板分子的分子印迹试纸条上，孵化反应5分钟，...
【专利技术属性】
技术研发人员：李建平，马雄辉，魏小平，
申请(专利权)人：桂林理工大学，
类型：发明
国别省市：广西;45
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