一种防治烟草番茄根结线虫制剂和应用制造技术

本发明专利技术公开一种防治烟草番茄根结线虫制剂和应用。所述防治烟草或番茄根结线虫制剂的活性成分为一株解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)YN2010-KC CGMCC No.5722的发酵液。本发明专利技术制剂不仅是一种微生物肥料，可显著促进植物生长，而且还是一种生物农药，对烟草根结线虫病的平均相对防效达78.32％；对番茄根结线虫病防效达74.50％以上，防治效果显著。本发明专利技术制剂生产成本低，施用方法简单易行，可直接拌种、灌根、且无毒、无污染、无残留、对人畜安全。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及烟草和番茄根结线虫的防治，具体的说是一株解淀粉芽孢杆菌及其对烟草和番茄根结线虫的防治应用。
技术介绍
根结线虫(Meloidogynespp.)病是一种危害严重的病害，主要发生在热带和温带地区。其寄主范围非常广泛，超过5500种作物，其中包括单子叶植物、双子叶植物、草本植物和木本植物。植物被根结线虫侵害后，在根系产生巨细胞和根结，根结线虫从中汲取养分，完成生活史。植物受根结线虫危害后，易导致减产，植株萎蔫，并很容易被其他土传性病害侵染。烟草根结线虫(Meloidogynespp.)是许多国家烟草生产的限制因素之一，不仅直接危害烟草，造成烟株萎蔫黄化，发育迟缓，甚至整株死亡，而且还会导致烟草黑胫病、青枯病等病害发生，降低烟草品种的抗性。在我国云南、河南、山东等13个主要产烟区都有发生，造成严重危害，且日趋严重，仅云南省发病面积就达40余万亩，病株造成烟叶减产30％～50％。由于生产上缺乏抗性品种，复种指数高，化学杀线剂会造成烟叶中农药残留的增加，致使烟叶农药残留超标。烟草作为吸食品，其农药残留问题更应重视，生物防治烟草根结线虫作为一种安全、有效的方法而越来越受到重视。番茄根结线虫(Meloidogynespp.)是番茄重要病害之一，随着保护地蔬菜生产面积增加，特别是日光温室大面积推广以来，复种指数增加，加之重茬严重，导致根结线虫危害日趋严重，一般可造成减产10％～20％，严重可达30％～40％，甚至绝产。目前国内尚无抗线虫番茄品种用于生产，防治该病害多采用化学防治，但化学杀线虫剂对环境污染严重，使用过程中对人畜也不安全，很多高毒的化学杀线剂已被禁用。在土壤中尤其是在植物根际存在着大量具有生防潜力的有益微生物，其种类多、数量大、繁殖快；不仅可以对病原菌进行有效的拮抗抑制而且还有促进植物生长和增产的作用，所以利用土壤有益微生物防治植物病害具有巨大的应用潜力。解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)是芽孢杆菌属中的一个种，是土壤和植物微生态的优势群，也是一种有益微生物。具有较强的次级代谢产物的生产能力，可分泌植物生长激素(如吲哚乙酸)，促进植物生长；可分泌植酸酶和有机酸，降解土壤中植酸及矿质磷；可以产生多种抑菌相关的代谢产物(如蛋白酶，杆菌素、杆菌烯、风齐素，大环内酯等)，对真菌和细菌都具有强烈的抑制作用，具有实际应用的潜力。
技术实现思路
本专利技术目的是提供一种生产成本低、无毒、无污染、无残留、对人畜安全、对植物根结线虫防治效果高的防治烟草或番茄根结线虫的制剂和应用。本专利技术技术方案如下：1.一种防治烟草番茄根结线虫制剂，它的活性成分为一株解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722的发酵液。2.根据技术方案1所述的防治烟草番茄根结线虫制剂，所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722的发酵液通过以下方法制备得到：(1)将所述的解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722活化后，按5～10％接种量，将活化的解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722接种到种子培养基，在培养温度35℃、转速120rpm/min条件下，摇床培养36～48h，得到一级种子液，所述种子培养基为液体LB培养基，pH7.0～7.2；(2)按10～12％接种量，将一级种子液转接到种子罐内的二级种子培养基，在28～37℃，转速100rpm/min，通气量为1000L/h，罐压保持在0.02～0.03MPa条件下培养36～48h，得到二级种子液；所述二级种子培养基由以质量分数计的以下成分组成：淀粉1.5～3％，麸皮粉1～2％，酵母膏0.05～0.3％，蛋白胨0.5～1％，磷矿粉1～2％，MgSO4·7H2O0.01～0.05％，CaCl20.1～0.4％，(NH4)2SO40.01～0.04％，余量为水，pH7.0～7.2；(3)按10～12％接种量，将二级种子液接种到发酵罐内的发酵培养基，在28～37℃，转速100rpm/min，通气量为10000L/h、罐压保持在0.02～0.03MPa条件下培养48～72h，培养后的发酵液中解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722的有效活菌数≧1×1010cfu/ml时，该发酵液即为所述解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722的发酵液，所述发酵培养基与步骤(2)所述二级种子培养基相同。3.技术方案1或2所述的防治烟草番茄根结线虫制剂在防治烟草根结线虫的应用。4.技术方案1或2所述的防治烟草番茄根结线虫制剂在防治番茄根结线虫的应用。与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：1、本专利技术制剂不仅是一种微生物肥料，可显著促进植物生长，而且还是一种生物农药，对烟草根结线虫病的平均相对防效达78.32％；对番茄根结线虫病防效达74.50％以上，防治效果显著。2、本专利技术制剂生产成本低，施用方法简单易行，可直接拌种、灌根，较易推广应用。3、本专利技术制剂无毒、无污染、无残留、对人畜安全。本专利技术所述的解淀粉芽孢杆菌BacillusamyloliquefaciensYN2010-KC于2012年1月12日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称：CGMCC)，保藏号为CGMCCNo.5722，并于2012年1月12日检测为存活。该普通微生物中心地址：中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号，邮编:100101。具体实施方式下面结合实施例进一步说明，各实施例无特殊说明为常规方法。实施例1本专利技术解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KC的获得、鉴定和保藏1、本专利技术解淀粉芽孢杆菌YN2010-KC的获得1.1材料采自云南农业大学后山农场玉米根际周围的土壤。1.2培养基制备将LB固体培养基和PSA培养基(马铃薯蔗糖琼脂培养基)融化，分别倒入灭菌培养皿，冷却，制成LB和PSA平板。1.3分离培养采用稀释平皿分离法和平板划线分离，将分离纯化所得的一本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种防治烟草番茄根结线虫制剂，其特征在于：它的活性成分为一株解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)YN2010‑KC CGMCC No.5722的发酵液。

【技术特征摘要】
1.一种防治烟草番茄根结线虫制剂，其特征在于：它的活性成分为一株解
淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722的发
酵液。
2.根据权利要求1所述的防治烟草番茄根结线虫制剂，其特征在于：所述
解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722的
发酵液通过以下方法制备得到：
(1)按5～10％接种量，将活化的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus
amyloliquefaciens)YN2010-KCCGMCCNo.5722接种到种子培养基，在培养温
度35℃、转速120rpm/min条件下，摇床培养36～48h，得到一级种子液，所述
种子培养基为液体LB培养基，pH7.0～7.2；
(2)按10～12％接种量，将一级种子液转接到种子罐内的二级种子培养
基，在28～37℃，转速100rpm/min，通气量为1000L/h，罐压保持在
0.02～0.03MPa条件下培养36～48h，得到二级种子液；所述二级种子培养基由
以质量分数计的以下...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴毅歆，何月秋，何鹏飞，何鹏搏，杨发祥，
申请(专利权)人：云南省微生物发酵工程研究中心有限公司，
类型：发明
国别省市：云南;53