一种新型显微授精管及其制作方法技术

一种显微授精管及其制作方法，用于卵子的显微操作，常规显微授精管在对卵子破膜时引起较大的卵胞质干扰。该新型显微授精管前端开口具有２个尖锋，该２个尖锋是通过磨针时从两个侧面进行磨针形成２个突起，然后在显微镜下用电热体熔粘这些突起并拉细断开而形成。在显微授精管吸入卵胞膜时，２个尖锋可加强对胞膜被吸入的限制而促进胞膜破口的迅速产生。在各种破膜进入卵子内的显微操作，该发明专利技术有利于减少对卵胞质的干扰，如人卵显微授精。传统显微授精管难以进行的小鼠卵子显微授精及核移植能用该发明专利技术进行顺利操作。

Novel micro insemination tube and manufacturing method thereof

The invention relates to a micro insemination tube and a method for making the same, which is used for the microscopic manipulation of an ovum, and the conventional micro insemination tube causes large cytoplasmic interference when the egg is broken. The novel micro insemination tube front opening has 2 peaks, the 2 peak is from two by grinding side grinding into 2 processes, and then use the heating melt glue these protrusions and attenuated disconnect formed in microscope. In the micro insemination tube suction egg membrane, 2 peaks can strengthen rapidly on the cell membrane is sucked into the limit and promote the cell membrane rupture. The invention is advantageous in reducing the interference to the cytoplasm, such as the fertilization of human eggs. The micro fertilization and nuclear transplantation of mouse eggs, which are difficult to be performed by traditional micro insemination tubes, can be successfully operated by the invention.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种显微穿剌动物(包括人)卵子透明带与卵细胞膜的中空 玻璃毛细管及其制作方法，其主要用于卵子显微受精，通常称为显微授精管， 也可用于卵子核移植等需要进入卵子细胞膜内的显微操作。
技术介绍
目前，公知的显微授精管包括管体、拉细部分、前端开口及尖锋等部分， 是由中空毛细管通过热熔拉制、断针、磨针及在显微下用电热体(即通电后 变热的金属体或附于该金属体上的玻璃体)熔粘(即使玻璃热熔变软并与电 热体粘连，在此简称之为熔粘，各文件其它处同此)前端开口尖锋并拉伸拉 尖而断开，使尖锋更锐利化等过程制作而成。其前端为有单一尖锋的近似斜 面型的开口。将显微授精管插向被对侧显微持卵管吸持固定的卵子，可刺破 透明带，然后可进一步向前将卵子胞膜扎成深凹陷而使显微授精管前端到达 卵子深部位置，但一般并不能直接刺破并进入卵子胞膜，而是仍处在M陷的 卵子胞膜外。此时，需要给中空的显微授精管以少量负压，使显微授精管前 端开口处吸入其周围的卵子胞膜，并连带卵子细胞质吸入。当这种吸入込到 一定程度时，卵子胞膜一般可被吸破。吸破时可通过经验在显微镜卜观察判 断，g卩吸入的细胞质流动速度突然加快，并在显微授精管前端管内变得分 散。显微授精管对卵子胞膜产生小破口后，可向卵子膜内导入外界物质，如 精子或细胞核，或者吸出卵子内部物质，如卵核。导入或吸出操作完后，退 出显微授精管，卵子的小破口可在胞膜凹陷缓慢复原而消退凹陷的过程中逐 渐愈合，从而保持卵子膜完整。这种结构的传统的显微授精管现已广泛用丁-人类辅助生殖技术的显微授精，但存在一定缺陷，即该种显微授精管通常要 吸入较多量的卵子胞膜，并连同吸入较多量卵子胞质后才能吸破人卵子胞 膜。这使得卵子中较多量的卵子胞质被吸动而受到干扰，使卵子受精后发育 质量可能受到影响，并可能危及由此显微受精而产生的后代人的健康发育。 目前人类显微受精尚是有危及后代健康之风险的技术，其中卵子胞质受到-定的千扰是其中问题之一。另外，传统显微授精管不能很好地用于小鼠卵子的M微授精与核移植， 因为，小鼠的卵子胞膜粘性大，不容易被吸破，同时，小鼠卵子体积小，过 多吸动细胞膜与细胞质会严重破坏卵子质量，甚至破坏卵子内细胞核的正常结构。因此，为解决小鼠卵子的显微授精与核移植，有称为PIEZO的仪 器可通过显微高频机械性脉冲来将小鼠卵子胞膜冲打出破U 。但该仪器操 作技能要求较高，配备该仪器所需花费较大，对非常规进行小鼠卵子的S微 授精与核移植操作的实验室，配备该仪器就不合算。为减少吸动卵子胞质的程度，可以采取增加显微授精管前端开口的尖锋 的锋利程度的方法，然而这并不可行。因为，过锋利的尖锋使显微授精管在 刚接触卵子胞膜但尚未使膜产生较深的凹陷时就产生胞膜破口 ，而这容易导 致卵子整体崩解，因为，只有在卵子胞膜产生较深的凹陷时的卵子胞膜破口 才可能在凹陷的缓慢恢复过程中得到良好愈合，而浅凹陷因恢复太快而使破口来不及愈合就处于非凹陷状态，此时卵子胞质从破口不断流出，破u加人，以致卵子全面崩解。所以，过于锋利的显微授精管尖锋不是解决问题的科学 方案。参考文献1. Kimura Y， Yanagimachi R. Intracytoplasmic sperm injection in the mouse. Biol R印rod. 1995， 52 (4) :709-20
技术实现思路
为了克服现有的显微授精管在对卵子破膜操作时，吸入胞膜和胞质的量 较大(如对人卵子操作)，甚至不易吸破(如对小鼠卵子操作)等不足之处， 本专利技术提供一种新型显微授精管——双尖型显微授精管，即其前端开口制有 2个尖锋，使得其能在轻微吸动的情况下将人及小鼠卵子的细胞膜吸破。本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是将显微授精管前端丌U制造有2个尖锋，该2个尖锋是通过磨针时从两个侧面(两侧面之间的夹角在IO 度一180度之间，含180度)进行磨针形成2个突起的尖锋，然后还可在显微 镜下用电热体分别轻轻触及而熔粘2个或1个尖锋，然后拉细断开而使尖锋进 一步锐利化，根据对穿刺操作的不同，也可不锐利化。卵子胞膜被吸破的「'丄 能的原理是卵子胞膜被吸入显微授精管内后，被吸入的胞膜在管内随负压 延伸而变薄，然而同时从开口处不断有被吸入的新胞膜，对管内胞膜的变薄 速度会有减缓作用，但是，随着吸入程度增加，胞膜总体趋势是不断变薄的， 当其超过胞膜粘性的抗衡时，则膜破裂。现有的传统显微授精管的前端开U 只有一个尖锋。在卵子胞膜被吸入过程中，该尖锋能牵制其周凼附近的卵子 胞膜的流动，从而对吸入过程中的胞膜的变薄起到促进作用。但前端开口除尖锋以外的部分对胞膜的流动性限制小，这样则如前所述，其对胞膜变薄的 作用不大，以至吸破膜所需吸入的胞膜及胞质的量较多。本技术则足在f^端 开口处制造2个尖锋，2个尖锋会极大地牵制前端开口处卵子胞膜被向管内的 吸入，从而使被吸入的小量胞膜在管内随负压延伸而迅速变薄，以致在微量 吸入的情形下也能产生卵子胞膜破口。本专利技术的有益效果是，可以在进行人辅助生殖的显微授精技术过权'I'降 低对卵子细胞质的干扰，从而降低显微授精对胚胎质量的不利影响，甚至减少显微授精带来的可能影响后代人健康的风险；还可以低成本地实现小鼠卵 子的显微授精与核移植，不需配备特殊的仪器装置。附图说明下面结合附图和实施例对本专利技术进一步说明。 图1是显微授精管肉眼观基本结构示意图。图2是传统型显微授精管前部在显微镜下正面观(左)与侧面观(右) 结构示意图。图3是本专利技术实施例1:双尖一长一短型管前部在显微镜下正面观(左)与侧面观(右)结构示意图。 图4是本专利技术实施例2:双尖等齐型管前部在显微镜下正面观(左)与侧面观(右)结构示意图。 图5是本专利技术制作示意图从一侧磨针(左)，转-一定角度后从另一侧磨针(中)，对磨针后形成的突起进行尖锋化(右)。 图6是传统型显微授精管吸破卵细胞膜的原理图(箭标表示其附近膜及胞质的运动方向与速度)。图7是本专利技术实施例吸破卵细胞膜的原理图(箭标表示其附近膜及胞质的运动方向与速度)。图中标示l.管体，2.拉细部分，3.前端开口， 4.尖锋，5.磨针 石表面，6.电热体，7.显微授精管，8.卵子，9.透明带，10.极体，11. 胞膜，12.胞质，13.尖锋处的胞膜，14. (13)对侧的胞膜。具体实施方式在图i中，玻璃毛细管的管体(i)、拉细部分(2)、前端开n o)及尖锋(4)为整体相连的各部分，管体(1)较长，图中用双折线示意省去中部 的长段，虚线圈内表示其在显微镜下可放大清晰的部分，参见后续图2 — 6。在图2所示传统显微授精管中，仅有l个尖锋(4)。而在木发叨两实施 例图3和4中，有2个尖锋(4)。图5所示本专利技术制作过程先从毛细管拉 细部的前端开口 (3)的一侧在磨针石表面(5)上开始磨针(见图5左)， 然后转一定角度(10度一180度之间，含180度)后到另一侧再磨针(见图 5中)，如此几次反复在这两个侧面磨针使得该两侧磨去的程度幕木相同为 了达到特定的开口面及尖锋的形状，磨针角度可以几次调整，如可以先相对 磨针石低角度地磨2侧面，然后换成高角度地磨2侧面。然后，为丫满足小 同的显微操作要求，对2个尖锋有三种处理方式全锐化、单个锐化及全非 锐化。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种显微授精管，包含整体相连的玻璃毛细管的管体、拉细部分、前端开口及尖锋各部分，其特征是：前端开口处有２个尖锋。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：吕祁峰，
申请(专利权)人：吕祁峰，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]