Fistulains A在抗幽门螺杆菌药物中的应用制造技术

体外活性实验表明Fistulains A具有很强的抗幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori，Hp)活性，可用于急、慢性胃炎、胃、十二脂肠溃疡等疾病的治疗及在制备治疗急、慢性胃炎、胃、十二脂肠溃疡药物中得到应用，具备突出的实质性特点，同时用于幽门螺杆菌感染的防治显然具有显著的进步。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及化合物FistulainsA的新用途，尤其涉及FistulainsA在制备抗幽门螺杆菌药物中的应用。
技术介绍
幽门螺旋杆菌是一种螺旋形、微厌氧、对生长条件要求十分苛刻的革兰氏阴性杆菌。1983年首次从慢性活动性胃炎患者的胃粘膜活检组织中分离成功，是目前所知能够在人胃中生存的惟一微生物种类。幽门螺旋杆菌病包括由幽门螺旋杆菌感染引起的胃炎、消化道溃疡、淋巴增生性胃淋巴瘤等。幽门螺旋杆菌病的不良预后是胃癌。因此，寻找高效、安全的抗Hp活性一类新药物成为一个重要和迫切的任务。本专利技术涉及的化合物FistulainsA是一个2015年发表(MinZhou，etal.,FistulainsAandB,NewBischromonesfromtheBarkofCassiafistula,andTheirActivities.Org.Lett.2015,17,2638-2641.)的新化合物，该化合物拥有全新的骨架类型，具有抗病毒作用(MinZhou，etal.,FistulainsAandB,NewBischromonesfromtheBarkofCassiafistula,andTheirActivities.Org.Lett.2015,17,2638-2641.)，对于本专利技术涉及的FistulainsA在制备抗幽门螺杆菌药物中的用途属于首次公开。
技术实现思路
本专利技术的目的在于根据现有FistulainsA研究中未发现其具有抗幽门螺杆菌活性的报道的现状，提供了FistulainsA在制备抗幽门螺杆菌药物中的应用。所述化合物FistulainsA,结构如式(Ⅰ)所示：所述FistulainsA在制备抗幽门螺杆菌药物中的应用，幽门螺杆菌为幽门螺杆菌Helicobacterpylori，Hp标准菌株ATCC43504。一种抗幽门螺杆菌药物，由FistulainsA为活性成分添加辅料制备而成，制备方法为取5克化合物FistulainsA,加入糊精195克，混匀，常规压片制成1000片。一种抗幽门螺杆菌药物，由FistulainsA为活性成分添加辅料制备而成，制备方法为取5克化合物FistulainsA，加入淀粉195克，混匀，装胶囊制成1000粒。本研究结果显示，FistulainsA的抑制幽门螺旋杆菌活性的能力比氨苄西林强，说明对于与幽门螺旋杆菌密切相关的急、慢性胃炎、胃、十二脂肠溃疡等疾病来讲，FistulainsA是一个极具开发潜力的化合物。它可直接用于相应疾病的治疗以及相关药物的制备。本专利技术涉及的FistulainsA在制备治疗抗幽门螺杆菌药物中的用途属于首次公开，由于骨架类型属于全新的骨架类型，而且其对于幽门螺杆菌抑制活性强得意想不到，不存在由其他化合物给出任何启示的可能，具备突出的实质性特点，同时用于幽门螺杆菌感染的防治显然具有显著的进步。具体实施方式本专利技术所涉及化合物FistulainsA的制备方法参见文献(MinZhou，etal.,FistulainsAandB,NewBischromonesfromtheBarkofCassiafistula,andTheirActivities.Org.Lett.2015,17,2638-2641.)以下通过实施例对本专利技术作进一步详细的说明，但本专利技术的保护范围不受具体实施例的任何限制，而是由权利要求加以限定。实施例1：本专利技术所涉及化合物FistulainsA片剂的制备：取20克化合物FistulainsA,加入制备片剂的常规辅料180克，混匀，常规压片机制成1000片。实施例2：本专利技术所涉及化合物FistulainsA胶囊剂的制备：取20克化合物FistulainsA，加入制备胶囊剂的常规辅料如淀粉180克，混匀，装胶囊制成1000粒。下面通过药效学实验来进一步说明其药物活性。实施例3：FistulainsA的药理实验1)供试菌株幽门螺杆菌(Helicobacterpylori，Hp)标准菌株ATCC43504购于美国菌种保存中心(AmericanTypeCultureCollection，ATCC)。15株Hp临床菌株采自江苏省人民医院消化科、江苏省中医院检验科和南京市儿童医院胃镜室接受胃镜检查的患者；在连续胃镜检查中对消化性溃疡、十二指肠球炎或疣状胃炎的患者，先经快速尿素酶实验确定为Hp阳性者，再取胃窦黏膜1-2块，切碎后接种于含8％马血清、三甲氧苄氨嘧啶(trimethropin,TMP)1.25g/L、多粘菌素(polymyxin)B2500U/L、万古霉素(vancomycin)10mg/L的Columbia选择性琼脂培养基中，于37℃在微氧环境下(5％O2,10％CO2和85％N2)培养72小时。收集细菌，经涂片革兰氏染色，氧化酶、触酶和尿素酶鉴定为阳性后，传代纯培养，所得菌株作为实验菌株。2)菌株培养我们采用微需氧袋(购自上海医科大学)进行HP的菌株培养，它可通过化学反应产生Hp所需要的微需氧环境。3)生物活性测定采用纸片法测定化合物对幽门螺杆菌的抑制作用，用琼脂稀释法来测定供试样品的最低抑菌浓度(MIC)。I.纸片法实验(A)准备培养基将配制好的Columbia培养基经高压蒸汽灭菌后，冷却至50-60℃，加8％马血清或绵羊血，混匀倾注于已经灭菌的培养皿中，每皿7-10ml，培养基厚度为1.5mm(无菌操作)。(B)转接实验菌(涂菌)用微量取样器取稀释好的108CFU/ml(1OD660＝108CFU/ml)Hp的菌悬液0.1ml均匀地涂抹在适宜的培养皿表面。倒置于37℃烘干箱中15min后取出，目的使琼脂表面干燥，备用。(C)贴样品纸片用微量取样器取6μl待测样品(质量浓度2mg/ml)注入已经灭菌的圆滤纸片上。用无菌镊子镊取含样品的纸片和对照空白纸片，按无菌操作分别纸片紧贴于含菌琼脂表面，每隔一定距离贴一张纸片。每种菌做3皿，所得结果求其平均值。(D)培养将各平皿置于微需氧袋中，封口，打开气体发生器，再置于37℃培养箱中培养72h。(E)测抑菌圈直径取出平板后，分别测量各纸片周围抑菌圈直径的大小。参照对照组的结果，可得出待测样品敏感实验的结果。重复三次。II.琼脂稀释法测定MIC(A)药物平板的制备首先将测试的化合物用二甲基亚砜(DMSO)溶液配制成0.5mg/ml的母液，再用无菌水稀释，最终配成10.0，8.0，6.0，4.5，4.0，3.5，3.0，2.5，2.0，1.5，1.0，0.5和0.25μg/ml的浓度系列，DMSO在介质中的浓度小于1％。将1ml配制好的测试化合物溶液与保温于50℃的9ml哥伦比亚培养基另加1ml保温于50℃的马血清充分混匀，浇制入培养皿中冷却即成。(B)转接实验菌(涂菌)用微量取样器吸取稀释好的1×108CFU/mlHp的菌悬液0.1ml均匀地涂抹在培养皿表面，倒置于37℃烘干箱中15min后取出，目的使琼脂表面干燥，备用。(C)确定MIC将待测培养皿在微需氧袋(含：85％N2,10％CO2和5％O2)中，保温37℃培养72小时，观察Hp生长情况，与空白组相对照，以完全没有菌生长的样品最低浓度为最低抑菌浓度(MIC)值。阳性对照为氨苄西林。体外实验表明，FistulainsA本文档来自技高网...

【技术保护点】
Fistulains A在抗幽门螺杆菌药物中的应用，所述化合物Fistulains A结构如式(Ⅰ)所示：

【技术特征摘要】
1.FistulainsA在抗幽门螺杆菌药物中的应用，所述化合物FistulainsA结构如式(Ⅰ)所示：2.如权利要求1所述FistulainsA在抗幽门螺杆菌药物中的应用，其特征在于幽门螺杆菌为幽门螺杆菌Helicobacterpylori，Hp标准菌株ATCC43504。3.一种抗幽门螺杆菌药物，其特征在于由权利要求1所述Fi...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙本如，
申请(专利权)人：全椒先奇医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：安徽;34