一种含野菊花提取物的抗肥胖药物制造技术

本发明专利技术涉及抗肥胖药物技术领域，具体为一种含野菊花提取物的抗肥胖药物。本发明专利技术的抗肥胖药物中的野菊花提取物含有本发明专利技术所公开的倍半萜类化合，这些倍半萜类化合物能显著抑制3T3-L1前脂肪细胞分化过程中甘油三酯和总脂肪的积累，抑制效果优于阳性对照化合物小檗碱。因此，含有所公开的野菊花提取物的抗肥胖药物具有良好的抑制脂肪细胞分化、降低脂肪细胞中油滴和甘油三酯的效果，在治疗肥胖方面有良好的发展前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及抗肥胖药物
，尤其涉及一种含野菊花提取物的抗肥胖药物。
技术介绍
近年来随着人们生活方式以及饮食结构的改变，全球肥胖人数剧增，成为了威胁人类健康和生活质量的世界性公共卫生问题。肥胖可能导致一系列代谢性疾病，如糖尿病、高血压、高脂血症、脂肪肝以及某些癌症等，因此它已经是全球第五大致死因素。目前临床上可用于治疗肥胖的药物屈指可数，并且安全性和疗效尚无定论。肥胖的发病机制复杂，目前尚无一个很好的药物靶点，减肥药物开发过程中，很多药物都通过作用于神经摄食中枢发挥作用，因为种种副作用无法被广泛应用。因此开发更有效，更安全的减肥药物成为了当今的研究热点和挑战。近十几年来的研究表明，脂肪组织不仅是个能量储存器官，还是个极其重要的分泌器官，在机体的能量和代谢调控方面发挥着重要作用。脂肪细胞功能的紊乱，与肥胖及其相关疾病的发生密切相关。脂肪细胞数目的增多或者体积的增大是肥胖的病理基础，因此抑制脂肪细胞分化是当前抗肥胖药物发展的一个重要方向。3T3-L1前脂肪细胞是一种优秀的可用于抗肥胖以及抗糖尿病药物筛选的模型。中药是中国劳动人民几千年来与疾病作斗争的实践经验总结，从中药资源宝库中寻找先导化合物是我国药物开发的优势之一。野菊花属于菊科菊花种野菊花亚种，野生于山坡草地、田边、路旁等野生地带，因具有抗炎、抗菌以及保护心血管的生物功效而被广泛用于中药处方、茶饮中。1987年于德泉从野菊花中鉴别出野菊花醇的结构(野菊花化学成分的研究.药学学报，1987，22(11):837-840.)，2000年M.Yoshikawa鉴别出野菊花抑制NO生成的活性成分倍半萜烯(Chemical&pharmaceuticalbulletin，2000，48(5):651-656.)，2002年H.Matsuda鉴别出野菊花抑制醛酮还原酶的活性成分黄酮苷衍生物(Chemical&pharmaceuticalbulletin，2002，50(7):972-975.)，2005年W.Cheng报道了野菊花粗提物的抗炎活性(Journalofethnopharmacology，2005，101(1-3):334-337.)。至此，野菊花的活性成分还远未被完全开发和利用。
技术实现思路
本专利技术针对现有的抗肥胖药物安全性和疗效欠佳的问题，提供一种有效成分为野菊花提取物且能显著抑制3T3-L1前脂肪细胞分化，降低3T3-L1前脂肪细胞内油滴、甘油三酯积累的抗肥胖药物。为实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案。一种含野菊花提取物的抗肥胖药物，包括野菊花提取物和/或药学上可接受的载体，所述野菊花提取物中含有以下结构的倍半萜类化合物：所述野菊花提取物中所含的倍半萜类化合物的结构式是(化合物1)：所述野菊花提取物中所含的倍半萜类化合物的结构式是(化合物2)：所述野菊花提取物中所含的倍半萜类化合物的结构式是(化合物3)：所述野菊花提取物中所含的倍半萜类化合物的结构式是(化合物4)：与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：本专利技术的抗肥胖药物中的野菊花提取物含有以上公开的倍半萜类化合，这些倍半萜类化合物能显著抑制3T3-L1前脂肪细胞分化过程中甘油三酯和总脂肪的积累，抑制效果优于阳性对照化合物小檗碱；还能明显激动肝X受体α和β(LXRα和LXRβ)，激动效果强于现有的LXR激动剂工具分子GW3965；尤其是化合物4，其激动效果明显优于GW3965。此外，这些倍半萜类化合物还能调节对胆固醇代谢至关重要的转录因子SREBP-1c、PPARγ和CEBPδ的mRNA表达量。因此，含有所公开的野菊花提取物的抗肥胖药物具有良好的抑制脂肪细胞分化、降低脂肪细胞中油滴和甘油三酯的效果，在治疗肥胖方面有良好的发展前景。附图说明图1为实施例1中从野菊花提取物中分离的化合物1、2、4抑制总脂肪积累的活性数据；图2为实施例1中从野菊花提取物中分离的化合物1-4抑制甘油三酯积累的活性数据；图3为实施例1中从野菊花提取物中分离的化合物4激活LXRα和LXRβ的活性数据；图4为实施例1中从野菊花提取物中分离的化合物3和化合物4上调胆固醇调节过程中关键转录因子的mRNA表达的活性数据(PPARγ)；图5为实施例1中从野菊花提取物中分离的化合物3和化合物4上调胆固醇调节过程中关键转录因子的mRNA表达的活性数据(SREBP-1c)；图6为实施例1中从野菊花提取物中分离的化合物3和化合物4上调胆固醇调节过程中关键转录因子的mRNA表达的活性数据(CEBPδ)。具体实施方式为了更充分理解本专利技术的
技术实现思路
，下面结合具体实施例对本专利技术的技术方案作进一步介绍和说明。实施例1本实施例提供一种含野菊花提取物的抗肥胖药物，由野菊花提取物和/或药学上可接受的载体组成。野菊花提取物中含有以下结构的倍半萜类化合物：以上所述的野菊花提取物由以下方法制备而得。本实施例还对野菊花提取物中的倍半萜类化合物进行了生理活性分析。野菊花提取物的制备方法包括以下步骤：(1)提取称取7.0Kg干野菊花，在常温常压下用10L的乙醇(95％)浸泡干野菊花24h，然后过滤，收集滤液。重复提取野菊花三次，合并三次提取的滤液，然后将滤液置于水浴中常压浓缩，得到2.0Kg提取物浸膏。(2)萃取将提取物浸膏放入5L水中，搅拌使提取物浸膏变成浑浊悬浮液，然后用乙酸乙酯萃取，得萃取液，浓缩萃取液得浓缩物，浓缩物干燥后得到425g萃取物。(3)柱层析萃取物用甲醇溶解后吸附于等重量的200-300目的硅胶中，硅胶在室温下干燥后得到层析样品，然后用2.0Kg的200-300目硅胶对层析样品进行柱层析，依次用石油醚、氯仿进行梯度洗脱，收集氯仿流出液；浓缩氯仿流出液，得到120g初层析物。(4)二次层析用200-300目硅胶对初层析物进行柱层析，用复合洗脱液进行梯度洗脱，复合洗脱液由石油醚和乙酸乙酯组成，所用的系列极性的复合洗脱液如下：90:10、80:20、70:30、60:40、50:50、40:60、20:80(石油醚与乙酸乙酯的体积比)。通过薄层色谱(TLC)跟踪流出液，根据TLC反映的层析情况，合并溶解有相同极性(在该TLC层析条件下)的物质的流出液，从而依次收集到极性由小到大的流份A、流份B、流份C和流份D。分别浓缩各流份，对应得到18g提取物A、29g提取物B、19g提取物C和15g提取物D。提取物A、提取物B、提取物C和提取物D组成本实施例的抗糖尿病药物中所述的野菊花提取物。分别对提取物A、提取物B、提取物C、提取物D作进一步分离提纯。经过进一步分离提纯，可得到如下结构通式的倍半萜类化合物：具体的分离提纯步骤如下(5)-(8)所述。(5)分离提纯化合物1提取物A通过使用MCI柱进行柱层析，用甲醇/水进行梯度洗脱，所用的系列极性的甲醇/水洗脱液如下：20:80、30:70、40:60、50:50、60:40、70:30、80:20、90:10(甲醇与水的体积比)，收集流出液，浓缩流出液后得到提取物A1。提取物A1再通过使用MCI柱进行柱层析，依次用石油醚/乙酸乙酯、氯仿/甲醇进行梯度洗脱，所用的系列极性的石油醚/乙酸乙酯洗脱液如下：90:10、80:20、70:30(石油醚与本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种含野菊花提取物的抗肥胖药物，包括野菊花提取物和/或药学上可接受的载体，其特征在于，所述野菊花提取物中含有以下结构的倍半萜类化合物：

【技术特征摘要】
1.一种含野菊花提取物的抗肥胖药物，包括野菊花提取物和/或药学上可接受的载体，其特征在于，所述野菊花提取物中含有以下结构的倍半萜类化合物：2.根据权利要求1所述一种含野菊花提取物的抗肥胖药物，其特征在于，所述倍半萜类化合物的结构式是：3.根据权利要求1所述一种...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐峻，李婵娟，顾琼，
申请(专利权)人：中山大学，
类型：发明
国别省市：广东;44