一种栓皮栎无菌苗的培育方法技术

本发明专利技术属于育苗领域，具体涉及是一种栓皮栎无菌苗的培育方法，尤其是该栓皮栎无菌苗可用于接种块菌。本发明专利技术目的是提供一种栓皮栎无菌苗的培育方法，采用了更安全的高锰酸钾溶液消毒、处理工序简单、节约育苗时间且育苗效果更显著，而且上述培育方法得到的栓皮栎无菌苗尤其适用于接种块菌。其步骤是：(1)选种；(2)种子消毒处理；(3)催芽；(4)播种；(5)出苗管理；采用本方法能有效提高块菌菌根化苗形成的时间，提高栓皮栎种子发芽率及成苗率，提高幼苗整齐度，显著提高苗木质量，应用本发明专利技术培育出的栓皮栎苗可直接用于块菌的接种。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于育苗领域，具体涉及是一种栓皮栎无菌苗的培育方法，尤其是该栓皮栎无菌苗可用于接种块菌。
技术介绍
栓皮栎(Quercus variabilis)是我国境内分布最广的树种之一，也是重要的软木、栲胶资源树种，与多种外生菌根真菌共生。自然条件下，在次生林形成中，伐桩萌苗是最主要的成苗方式，实生苗完成生活史受环境及幼苗侧须根少的影响很大。栓皮栎植苗造林成活率仅为30～50％。现有报道中，申请号为CN201210289748.9的《一种栓皮栎幼苗的培育方法》中，存在采用福尔马林消毒液、地域限制、浸种时间太长(46～52h)、多次生根粉处理等繁琐工序的问题。近几年来，学者们对栓皮栎的实生苗在造林上的应用研究较多，多体现在控根、胚根短截、菌根化苗、容器苗培育等上，已有研究表明，如《接种菌根菌对栓皮栎幼苗生长的影响》[李皓等,安徽农业科学,2013(6):2536-2538.]报道，栓皮栎菌根化苗，具有幼苗成活率高、幼苗生长快、幼苗菌根形成快和苗木质量高的特点。块菌苗培育时多选用华山松、槲栎、板栗等树种，专利技术人发现栓皮栎在环境适应性、缩短育苗、接种时间上具有明显优势，但在常规栓皮栎田间育苗中，病害、苗木质量难以控制，导致栓皮栎移栽成活率低，采用本专利技术培育方法，实现了栓皮栎培育全过程人工干扰控制，培育出了适于接种块菌的无菌壮苗，拓宽了其利用领域。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种栓皮栎无菌苗的培育方法，采用了更安全的高锰酸钾溶液消毒、处理工序简单、节约育苗时间且育苗效果更显著，而且上述培育方法得到的栓皮栎无菌苗尤其适用于接种块菌。本专利技术栓皮栎无菌苗的培育方法包括如下步骤：(1)选种；(2)消毒：用水漂洗种子，用浓度为0.2％～0.6％(质量分数)的高锰酸钾溶液浸泡1～4h：环境温度25～32℃，高锰酸钾溶液淹没种子2cm以上；然后用封口袋封装种子密闭15～30min，再用无菌水冲洗；(3)催芽：用起始温度为50～60℃的无菌水浸泡种子4～12h，再用浓度50～120mg/L的赤霉素溶液浸泡种子12～24h，浸种时放置在25～32℃的培养箱中；(4)播种：将种子放置在保持底部湿润的发芽盒中，放置在25～30℃的培养箱中4～7天至可见种子“露白”，即可播种在基质中；所述播种基质为：珍珠岩、蛭石、水按体积比0.8～1.5:0.5～1.2:0.7～1.0混合，灭菌后取出基质，冷却至室温，调节基质pH至6.5～7.5；(5)出苗管理：播种至幼苗陆续出土，移至人工气候箱中培养，按如下培养条件循环进行A段和B段：A段：光照度33％～66％、时间8～11小时、湿度75％～90％、温度25℃～32℃；B段：光照度0％、时间13～16小时、湿度75％～95％、温度25℃～32℃。采用本专利技术培育方法，待苗龄达3月后，便可移栽，培育所得栓皮栎苗尤其适用于与块菌接种。上述技术方案中，步骤(1)所述选种为进行粒选，剔除病虫损害及色泽不正常的种子，选择色泽、大小均匀且饱满、无霉变、无虫蛀、不漂浮的种子；种子来源为自行采摘成熟的新种，净度为90～96％；或向有权威的售种单位购进。上述技术方案中，步骤(4)播种时，放置在25～30℃的培养箱中4～7天至可见种子“露白”，期间每天用无菌水洗种1次。这是由于种子在萌发过程中，一方面种子会发酵产生酒精等有害根系发生的物质，另一方面是由于表面会发生大量的内生菌及外源菌，所以需要清洗。上述技术方案中，步骤(4)播种时，基质平铺于育苗盘中，所采用的育苗盘为塑料筐盘，四周垫30～60目的防虫网，种子胚根长出端向下直立播种1～2cm深，间距0.5～1cm，放置在温度大于20℃的环境下。上述技术方案中，步骤(4)播种时，基质灭菌的条件为在121℃条件下灭菌40min～2h。上述技术方案中，步骤(4)播种时，采用的珍珠岩、蛭石经灭菌冷却后的基质pH值为6.5，根据块菌生长特性，可采用生石灰调节基质pH至6.5～7.5；保持发芽盒底部湿润是采用滤纸垫在发芽盒底部，所述滤纸为定性滤纸；发芽盒为13cm×19cm×12cm优质ABS透明盒；育苗盘规格为32cm×28cm×10cm。其中，步骤(2)消毒采用封口袋封装种子密闭的原因是为了进一步减少病害，如防止立枯病、腐烂病等。本专利技术培养方法的优点如下：1)采用本专利技术育苗方法，选择优质种、适宜浓度高锰酸钾溶液消毒、适温破休眠、疏松透气保水性能好的基质，最终明显提高了幼苗侧根发生量、苗木质量和发芽率；2)采用本专利技术方法育苗相对容器苗可降低生产成本，且发芽率大于90％；3)采用本专利技术培育出来的无菌苗能满足接种块菌的要求，形成块菌菌根化苗能有效提高幼苗移栽成活率和缩短菌根苗培育的时间；4)本专利技术育苗方法选用的基质疏松透气，能干能湿，可根据基质厚度调节主根长度，能有效调节根冠比，易形成壮苗；5)操作工艺简单。一般情况下，栓皮栎植苗造林成活率只有30～50％，通过本专利技术育苗方法，能有效提高栓皮栎种子发芽率及成苗率，提高幼苗整齐度，显著提高苗木质量，应用本专利技术培育出的栓皮栎苗可直接用于块菌的接种，还提高块菌菌根化苗形成的时间，对我国块菌人工栽培进程和造林产业均具有突出贡献。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术作进一步的说明，下述各实施例仅用于说明本专利技术，对本专利技术并没有限制。实施例1一种用于接种块菌的栓皮栎无菌苗的培育方法，包括以下步骤：(1)自行采摘成熟的新种，净度为94％；(2)采摘种子后，进行粒选，剔除病虫损害及色泽不正常的种子，选择色泽、大小均匀且饱满、无霉变、无虫蛀、不漂浮的种子；(3)自来水漂洗种子3遍后用0.5％的高锰酸钾溶液消毒处理2h(环境温度30℃，消毒液以淹没种子2cm以上为宜)，用封口袋封装种子密闭30min，再用无菌水冲洗5遍；(4)用起始温度为55℃的无菌温水浸种4h后，再用100mg/L的赤霉素溶液浸种24h，且浸种过程放置在30℃的培养箱中；其后再将种子放置在底部垫有湿润滤纸的发芽盒中，放置在30℃的培养箱中，经过5天(期间每天用无菌水洗种1次)，可见种子开始“露白”，即可播种在基质中；育苗盘采用塑料筐盘，四周垫60目的防虫网，基质倒至其中并铺平，种子胚根长出端向下直立播种1.5cm深，间距1cm，放置在温度大于20℃的环境下；所述播种基质为：“珍珠岩+蛭石+水”按照体积比1:1:1的配比混合均匀后，置于121℃条件下，灭菌1h，待灭菌结束，取出基质，冷却至室温，这样的基质，经pH计测定得知pH为6.5，根据块菌生长特性，用生石灰调节基质pH至7；所述滤纸为定性滤纸；发芽盒规格为13cm×19cm×12cm优质ABS透明盒；育苗盘采用规格32cm×28cm×10cm；(5)播种8天后，可见幼苗陆续出土，然后搬运播种盘至人工气候箱中按如下条件循环培养(第一段：温度25℃、时间8h、光照度33％、湿度85％；第二段温度28℃、时间16h、光照度0％、湿度92％)，待苗龄达3月后，随机选取20株在体式镜下观察其根部情况，确
定根部生长良好后，移栽幼苗至营养钵中，便用于块菌的接种。(6)块菌菌根接种；采用公开号为CN103070013A披露的方法进行块菌菌根接种。(7)菌根检测；接种5个月后取出苗木，将典型的外生菌根用无菌的小镊子取下，在本文档来自技高网...

【技术保护点】
栓皮栎无菌苗的培育方法，其特征在于：包括如下步骤：(1)选种；(2)消毒：用水漂洗种子，用浓度为0.2～0.6％(质量分数)的高锰酸钾溶液浸泡1～4h：环境温度25～32℃，高锰酸钾溶液淹没种子2cm以上；然后用封口袋封装种子密闭15～30min，再用无菌水冲洗；(3)催芽：用起始温度为50～60℃的无菌水浸泡种子4～12h，再用浓度50～120mg/L的赤霉素溶液浸泡种子12～24h，浸种时放置在25～32℃的培养箱中；(4)播种：将种子放置在保持底部湿润的发芽盒中，放置在25～30℃的培养箱中4～7天至可见种子“露白”，即可播种在基质中；所述播种基质为：珍珠岩、蛭石、水按体积比0.8～1.5:0.5～1.2:0.7～1.0混合，灭菌后取出基质，冷却至室温，调节基质pH至6.5～7.5；(5)出苗管理：播种至幼苗陆续出土，移至人工气候箱中培养，按如下培养条件循环进行A段和B段：A段：光照度33％～66％、时间8～11小时、湿度75％～90％、温度25℃～32℃；B段：光照度0％、时间13～16小时、湿度75％～95％、温度25℃～32℃。

【技术特征摘要】
1.栓皮栎无菌苗的培育方法，其特征在于：包括如下步骤：(1)选种；(2)消毒：用水漂洗种子，用浓度为0.2～0.6％(质量分数)的高锰酸钾溶液浸泡1～4h：环境温度25～32℃，高锰酸钾溶液淹没种子2cm以上；然后用封口袋封装种子密闭15～30min，再用无菌水冲洗；(3)催芽：用起始温度为50～60℃的无菌水浸泡种子4～12h，再用浓度50～120mg/L的赤霉素溶液浸泡种子12～24h，浸种时放置在25～32℃的培养箱中；(4)播种：将种子放置在保持底部湿润的发芽盒中，放置在25～30℃的培养箱中4～7天至可见种子“露白”，即可播种在基质中；所述播种基质为：珍珠岩、蛭石、水按体积比0.8～1.5:0.5～1.2:0.7～1.0混合，灭菌后取出基质，冷却至室温，调节基质pH至6.5～7.5；(5)出苗管理：播种至幼苗陆续出土，移至人工气候箱中培养，按如下培养条件循环进行A段和B段：A段：光照度33％～66％、时间8～11小时、湿度75％～90％、温度25℃～32℃；B段：光照度0％、时间13～16小时、湿度75％～95％、温度25℃～32℃。2.根据权利要求1所述的栓皮栎无菌苗的培育方法，其特征在于：步骤(1)所述选种为进行粒选，剔除病虫损害及色泽不正常的种子，选择色泽、...

【专利技术属性】
技术研发人员：李小林，叶雷，陈诚，彭卫红，黄忠乾，甘炳成，郑林用，
申请(专利权)人：四川省农业科学院土壤肥料研究所，
类型：发明
国别省市：四川;51