无汞苏木素染色液制造技术

本发明专利技术公开了一种无汞苏木素染色液，其由混合溶液和添加组分组成，其中，混合溶液由以下体积份数的组分组成：蒸馏水1000～1500份，丙三醇70‑100份，以及1～2％的高碘酸水溶液40～60份，所述添加组分包含以下组分，各组分在所述染色液中的终浓度为：苏木素6～8g/L，硫酸铝钾40～60g/L以及柠檬酸3～6g/L。本发明专利技术所述的无汞苏木素染色液染色时间短，染色效果好。所染色处理的细胞，其细胞核染色清晰，染色质、核膜及核仁结构清晰。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于病理学实验
，涉及体外诊断试剂，尤其涉及一种无汞苏木素染色液。
技术介绍
组织病理学的诞生已有150多年的历史，在所有的医院，只要有手术，均由医院病理科对手术组织样本作出组织病理学诊断。常规石蜡包埋HE染色制片是当前用以处理组织样本的最基本技术，它是病理诊断方法学的基础，也是许多新方法、新技术优劣的评定参照标准。传统的方法是将组织样本放置处理液的缸中，依次倒入或调入不同处理液，样本依次在每个试剂中按规定浸泡不同时间完成处理切片、染色、封片等，全程需要30多个步骤。整个过程大量使用甲醛、二甲苯、氧化汞、氨水有毒害化学试剂，病理技术人员长期置身于有毒环境，且试剂排放严重污染环境。并且所用的试剂宽容度差，操作复杂，试剂消耗量大，病理制片优质片低(全国统计在40～70％)，影响诊断。同时绝大数医院自行配试剂，缺乏统一标准。因此病理行业组织标本处理液用品的标准化生产、无毒化、社会化供求，是行业发展的必然趋势。苏木素是一种天然染料，其作为单一的染色是不行的，它染色力弱，必须具备两个条件才能具有强的染色力。一是产生有效成分苏木红，二是加入媒染剂。苏木红的产生需经氧化才能获得，获得苏木红有两种方法，一是天然成熟，苏木素与其它试剂混合好后，暴露于阳光或亮处，在自然光的作用下，慢慢地氧化成熟，但时间较长，一般需八周左右。二是加入化学试剂促进成熟，如加入氧化汞或碘酸钠促使苏木素成熟。Harris氏苏木素为当前最广泛使用的染液，由于它染色时间短，效果好，很受使用者的欢迎。但是其中用到的氧化汞是公认的剧毒有害化学品，并且
其配置方法有诸多注意事项，不易于控制。因此，研发无汞苏木素染色液，替代氧化汞氧化工艺用于病理学实验具有重要的意义。
技术实现思路
本专利技术设计开发了一种染色时间短、染色效果好的无汞苏木素染色液。本专利技术提供的技术方案为：一种无汞苏木素染色液，其由混合溶液和添加组分组成，其中，混合溶液由以下体积份数的组分组成：蒸馏水1000～1500份，丙三醇70-100份，以及1～2％的高碘酸水溶液40～60份，所述添加组分包含以下组分，各组分在所述染色液中的终浓度为：苏木素6～8g/L，硫酸铝钾40～60g/L以及柠檬酸3～6g/L。优选的是，所述的无汞苏木素染色液中，其由混合溶液和添加组分组成，其中，混合溶液由以下体积份数的组分组成：蒸馏水1000份，丙三醇80份以及1％的高碘酸水溶液60份，所述添加组分包含以下组分，各组分在所述染色液中的终浓度为：苏木素7g/L，硫酸铝钾50g/L以及柠檬酸5g/L。优选的是，所述的无汞苏木素染色液中，所述添加组分还包含碳纳米颗粒，碳纳米颗粒的粒径为10～100nm，碳纳米颗粒相对于混合溶液的质量百分数为0.005～0.009％。优选的是，所述的无汞苏木素染色液中，所述添加组分还包含碳纳米颗粒，碳纳米颗粒的粒径为40～100nm，碳纳米颗粒相对于混合溶液的质量百分数为0.009％。本专利技术所述的无汞苏木素染色液染色时间短，染色效果好。所染色处理的细胞，其细胞核染色清晰，染色质、核膜及核仁结构清晰。本专利技术所述的无汞型环保苏木素染色液可满足常规病理诊断、免疫组织化学诊断技术、分子生物学诊断技术要求，染色处理的组织效果优于传统技术，可完全替代氧化汞作为氧化剂工艺应用于相关的病理学实验。附图说明图1为采用本专利技术所述的无汞苏木素染色液染色的肠组织染色显微照片(放大倍数为200倍)。图2为采用本专利技术所述的无汞苏木素染色液染色的肝组织染色显微照片(放大倍数为200倍)。具体实施方式下面结合附图对本专利技术做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。本专利技术提供一种无汞苏木素染色液，其由混合溶液和添加组分组成，其中，混合溶液由以下体积份数的组分组成：蒸馏水1000～1500份，丙三醇70-100份，以及1～2％的高碘酸水溶液40～60份，所述添加组分包含以下组分，各组分在所述染色液中的终浓度为：苏木素6～8g/L，硫酸铝钾40～60g/L以及柠檬酸3～6g/L。本专利技术提供的无汞苏木素染色液采用非汞氧化工艺配制，其中优化了媒染剂硫酸铝钾的剂量，降低了溶液体系中过高的无效溶质浓度；并且优选了溶液的反应温度和氧化剂的浓度，避免了传统配制方法中色元分子过度氧化造成的产生氧化膜现象；进一步使用高碘酸为氧化剂，避免氧化反应时金属离子的产生，由于无晶核形成使溶液结晶和溶胶化问题得以解决。经组织切片染色实验证明，细胞核染色清晰，染色质、核膜及核仁结构清晰。该实施例中无汞苏木素染色液的配制过程，包括如下步骤：1)按比例量取各组分；2)将硫酸铝钾水溶液加热至摄氏90～95度，其中，硫酸铝钾水溶液的浓度为5％；3)加入苏木素无水乙醇溶液，混匀，加热至溶液沸腾，其中，苏木素无水乙醇溶液的浓度为5％；4)再加入高碘酸溶液，混匀，煮沸5～10分钟，其中，高碘酸水溶液的浓度为1％；5)迅速将溶液移至冷水内降温至室温后，加入柠檬酸混匀即可。在一个优选的实施例中，所述的无汞苏木素染色液中，其由混合溶液和
添加组分组成，其中，混合溶液由以下体积份数的组分组成：蒸馏水1000份，丙三醇80份以及1％的高碘酸水溶液60份，所述添加组分包含以下组分，各组分在所述染色液中的终浓度为：苏木素7g/L，硫酸铝钾50g/L以及柠檬酸5g/L。在一个优选的实施例中，所述的无汞苏木素染色液中，所述添加组分还包含碳纳米颗粒，碳纳米颗粒的粒径为10～100nm，碳纳米颗粒相对于混合溶液的质量百分数为0.005～0.009％。碳纳米颗粒有助于提高苏木素的稳定性，延长染色液的储藏时间；可以避免出现苏木红过度氧化的情况；另外，碳纳米颗粒更有助于苏木红附着于细胞内须染色的部分上，并使着色稳定；而且碳纳米颗粒还可以完全避免苏木素结晶，从而提高染色的质量。该实施例中无汞苏木素染色液的配制过程，包括如下步骤：1)按比例量取各组分；2)将硫酸铝钾水溶液加热至摄氏90～95度，其中，硫酸铝钾水溶液的浓度为5％；3)加入苏木素无水乙醇溶液，混匀，加热至溶液沸腾，其中，苏木素无水乙醇溶液的浓度为5％；4)再加入高碘酸溶液，混匀，煮沸5～10分钟，其中，高碘酸水溶液的浓度为1％；5)迅速将溶液移至冷水内降温至室温后，加入柠檬酸和碳纳米颗粒混匀即可。在一个优选的实施例中，所述的无汞苏木素染色液中，所述添加组分还包含碳纳米颗粒，碳纳米颗粒的粒径为40～100nm，碳纳米颗粒相对于混合溶液的质量百分数为0.009％。为了进一步说明本专利技术技术方案，以下提供四个实施例。实施例一本实施例中，无汞苏木素染色液由混合溶液和添加组分组成，其中，混合溶液由以下体积份数的组分组成：蒸馏水1000mL，丙三醇70mL，以及1％的高碘酸水溶液40mL，所述添加组分包含以下组分，各组分在所述染色
液中的终浓度为：苏木素6g/L，硫酸铝钾40g/L以及柠檬酸3g/L。应用该实施例的染色液染色时间仅需6min，染色液可以持续使用一年半。经组织切片染色实验证明(请看图1和图2)，细胞核染色清晰，染色质、核膜及核仁结构清晰。实施例二本实施例中，无汞苏木素染色液由混合溶液和添加组分组成，其中，混合溶液由以下体积份数的组分组本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种无汞苏木素染色液，其特征在于，其由混合溶液和添加组分组成，其中，混合溶液由以下体积份数的组分组成：蒸馏水1000～1500份，丙三醇70‑100份，以及1～2％的高碘酸水溶液40～60份，所述添加组分包含以下组分，各组分在所述染色液中的终浓度为：苏木素6～8g/L，硫酸铝钾40～60g/L以及柠檬酸3～6g/L。

【技术特征摘要】
1.一种无汞苏木素染色液，其特征在于，其由混合溶液和添加组分组成，其中，混合溶液由以下体积份数的组分组成：蒸馏水1000～1500份，丙三醇70-100份，以及1～2％的高碘酸水溶液40～60份，所述添加组分包含以下组分，各组分在所述染色液中的终浓度为：苏木素6～8g/L，硫酸铝钾40～60g/L以及柠檬酸3～6g/L。2.如权利要求1所述的无汞苏木素染色液，其特征在于，其由混合溶液和添加组分组成，其中，混合溶液由以下体积份数的组分组成：蒸馏水1000份，丙三醇80份以及1％的...

【专利技术属性】
技术研发人员：李明，王德田，
申请(专利权)人：北京九州柏林生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11