快速检测中毒病人血液中的毒鼠强的方法技术

本发明专利技术公开了一种快速检测中毒病人血液中的毒鼠强的方法，旨在提供一种灵敏度好，检测效率高的毒鼠强的检测方法；其技术方案为：1)标准溶液的制备；2)供试样品的制备取血液5ml置15ml离心管中，加入5ml乙腈，漩涡震荡2min；3200r/min离心5min，取上清液上气质联用仪测定；属于化学检测技术领域。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术公开了一种毒鼠强的检测方法，具体地说，是一种快速检测中毒病人血液中的毒鼠强的方法，属于化学检测

技术介绍
毒鼠强(tetramine)，化学名为四亚甲基二砜四胺，为剧毒速效的灭鼠药，无色、无味。它对所有温血动物都有剧毒，中国农业部、卫生部曾于1982年联合发文严禁使用这些化合物作为灭鼠药，但仍有人使用而造成中毒事件。为给中毒病人的诊断治疗提供及时可靠的依据，有必要建立一种操作简易快速、定性准确、灵敏度高的检测方法。毒鼠强气质联用法作为唯一确证方法，没有统一国家标准，传统前处理过程复杂繁琐，耗时过长，通常需要几个小时，难以适应突发公共卫生事件的快速毒检要求。而且往往会在分析复杂基质如：人的血液等时，由于净化不够，杂质带入系统，使仪器耗损严重，甚至引起结论判断错误。
技术实现思路
针对上述问题，本专利技术的目的在于提供一种中毒病人血液中的毒鼠强的方法，该方法灵敏度好，检测效率高。为解决上述问题，本专利技术提供的技术方案是这样的：一种快速检测中毒病人血液中的毒鼠强的方法，依次包括下述步骤：1)标准溶液的制备准确称取毒鼠强标准品5.0mg，置于100ml容量瓶中，用乙腈溶解并定容，配成50μg/ml对照溶液；2)供试样品的制备取血液5ml置15ml离心管中，加入5ml乙腈，漩涡震荡2min；3200r/min离心5min，取上清液上气质联用仪测定；所述的色谱条件如下：色谱柱：HP-5MS，20m×0.18mm，膜厚0.18μm；载气为高纯氦气；进样量：30μl；在PTV进样期间，分流排空阀控制在80ml/min的流量，进样完成后，分流排空阀关闭1.0min；所述的质谱条件如下：电子轰击离子源，电子能量70eV；扫描特征离子：m/z92、m/z 132、m/z 212、m/z 240；GC/MS接口温度：280℃；离子源温度：230℃；四级杆温度：150℃。所述的PTV温度程序如下：40℃维持1.0min，以230℃/min速率升至230℃维持2min，以230℃/min速率升至300℃维持7min；柱流速：以恒流模式0.5ml/min；柱温箱：90℃2min，以100℃/min速率升至150℃，以50℃/min速率升至280℃维持4min。进一步，上述的快速检测中毒病人血液中的毒鼠强的方法，所述的气质联用仪采用安捷伦7890A-5975C气质联用仪。与现有技术相比，本申请提供的技术方案结合大体积进样、PTV进样，通过sim模式进行毒鼠强检测确证。从样品前处理到确证完成全过程耗时约20min。该方法具操作简易快速、定性准确、灵敏度高等特点，能应用于应急检验，为病人抢救工作节省了宝贵的时间，降低了成本。附图说明图1是SIM模式采集毒鼠强的质谱图；图2是液液萃取法结合大口径色谱柱的毒鼠强标准溶液图谱；图3是液液萃取法结合大口径色谱柱的血液提取液图谱；具体实施方式下面结合具体实施方式，对本专利技术的权利要求做进一步的详细说明，但不构成对本专利技术的任何限制，任何人在本专利技术权利要求保护范围内所做的有限次的修改，仍在本专利技术的权利要求保护范围之内。本专利技术所涉及到的百分浓度，没有特别说明的，液体均为体积浓度，溶质为固体的指质量浓度。实施例11.材料与方法1.1仪器与试剂安捷伦7890A-5975C气质联用仪，配有CTC多功能进样器、PTV进样口；超纯水器(ELGAPURELAB ClassicUVF)；超声波清洗器；高速离心机；C18固相萃取小柱(天津博纳艾杰尔科技有限公司)乙腈(HPLC级，美国Fisher公司)，其它试剂均为分析纯(国药集团化学试剂有限公司)。实验用水为经ELGAPURELAB ClassicUVF净化系统过滤的去离子水；毒鼠强标准品购自国家标准物质中心。1.2色谱条件色谱柱：HP-5MS(20m×0.18mm膜厚0.18μm)；载气为高纯氦气；进样量：30μl；在PTV进样期间(0.8min)，分流排空阀控制在80ml/min的流量，进样
完成后，分流排空阀关闭(1.0min)；PTV温度程序如下：40℃维持1.0min，以230℃/min速率升至230℃维持2min，以230℃/min速率升至300℃维持7min。柱流速：以恒流模式0.5ml/min。柱温箱：90℃(2min)，以100℃/min速率升至150℃，以50℃/min速率升至280℃维持4min。采用PTV进样口的溶剂吹扫功能与HP-5MS(20m×0.18mm膜厚0.18μm)，可在保证灵敏度的基础上，加快出峰时间，从而减少分析时间。相对于普通进样器与普通的气相分流不分流进样口，一般有效进样量为1μl；但本申请采用了大体积进样(50ul)与PTV进样模式，为达到提取后不需对提取液进行浓缩，即可上样，并在进样口端实现溶剂吹扫，使目标物聚焦后进入色谱柱，大大节省了前处理的时间。2.3质谱条件电子轰击(EI)离子源，电子能量70eV；扫描特征离子：m/z92、m/z 132、m/z 212、m/z 240(质谱图见图1)；GC/MS接口温度：280℃；离子源温度：230℃；四级杆温度：150℃。2.4标准溶液的制备准确称取毒鼠强标准品5.0mg，置于100ml容量瓶中，用乙腈溶解并定容，配成50μg/ml对照溶液。2.5供试样品的制备取血液5ml置15ml离心管中，加入5ml乙腈，漩涡震荡2min；3200r/min离心5min，取上清液上气质联用仪测定。3结果将毒鼠强加入空白血液样品中，采用“2.5”节方法进行处理，测定毒鼠强在血液中的回收率，每种添加量水平测定3次，取平均值作为实际检出，结果
见表1。结果表明血液回收率为80％～93％，方法准确率高。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种快速检测中毒病人血液中的毒鼠强的方法，其特征在于，依次包括下述步骤：1)标准溶液的制备准确称取毒鼠强标准品5.0mg，置于100ml容量瓶中，用乙腈溶解并定容，配成50μg/ml对照溶液；2)供试样品的制备取血液5ml置15ml离心管中，加入5ml乙腈，漩涡震荡2min；3200r/min离心5min，取上清液上气质联用仪测定；所述的色谱条件如下：色谱柱：HP‑5MS，20m×0.18mm，膜厚0.18μm；载气为高纯氦气；进样量：30μl；在PTV进样期间，分流排空阀控制在80ml/min的流量，进样完成后，分流排空阀关闭1.0min；所述的质谱条件如下：电子轰击离子源，电子能量70eV；扫描特征离子：m/z92、m/z 132、m/z 212、m/z 240；GC/MS接口温度：280℃；离子源温度：230℃；四级杆温度：150℃。所述的PTV温度程序如下：40℃维持1.0min，以230℃/min速率升至230℃维持2min，以230℃/min速率升至300℃维持7min；柱流速：以恒流模式0.5ml/min；柱温箱：90℃2min，以100℃/min速率升至150℃，以50℃/min速率升至280℃维持4min。...

【技术特征摘要】
1.一种快速检测中毒病人血液中的毒鼠强的方法，其特征在于，依次包括下述步骤：1)标准溶液的制备准确称取毒鼠强标准品5.0mg，置于100ml容量瓶中，用乙腈溶解并定容，配成50μg/ml对照溶液；2)供试样品的制备取血液5ml置15ml离心管中，加入5ml乙腈，漩涡震荡2min；3200r/min离心5min，取上清液上气质联用仪测定；所述的色谱条件如下：色谱柱：HP-5MS，20m×0.18mm，膜厚0.18μm；载气为高纯氦气；进样量：30μl；在PTV进样期间，分流排空阀控制在80ml/min的流量，进样完成后，分流排空阀关闭1.0min；所述的质谱条件如下：电子轰击离子源，电子能量...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈学松，罗达龙，刘慧妍，
申请(专利权)人：广西壮族自治区梧州食品药品检验所，
类型：发明
国别省市：广西;45