本实用新型专利技术涉及一种评估精子密度的胶体金双通道测试棒，所述测试棒具有两个通道。其特征在于，其包含基板和平行设置且互不接触的第一吸收性条带和第二吸收性条带。其中所述第一吸收性条带的T线包被有抗人ACRV1蛋白的抗体。C线包被有抗鼠二抗或葡萄球菌表面A蛋白SPA，第二吸收性条带的T线包含人ACRV1蛋白，C线包被有抗鼠二抗或葡萄球菌表面A蛋白SPA。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于一种体外诊断的生物技术，具体涉及一种利用胶体金免疫层析技术评估男性精子密度的双通道测试棒。
技术介绍
中国是人口大国，随着生活水平的提高和二胎政策的逐渐放开，我国有超过2亿个有生育需求的适龄家庭。另一方面，由于食品安全、环境污染、不良生活习惯等因素的影响，越来越多的家庭面临生育困难的问题：根据中国人口协会的调查结果,我国不孕不育患者超过4000万，占育龄人口的12.5%，这个比率相比于20年前升高了4倍，并仍在增加。在受到不孕不育困扰的家庭中，男性因素导致的不育占40％，而精子密度异常是导致男性不育的重要原因。如果每毫升精液中精子数量少于1500万，称为精子密度偏低或少精，会直接影响受孕率；另一方面，如果精子密度高于25000万每毫升，由于单位体积内的精子密度过大，精子在游动的过程中相互碰撞增多、速度下降，难以获得精卵结合时所需的能量，也会减少受孕的几率。现有技术中检测精子浓度的方法，主要有经典的显微计数法和比色法。利用显微计数法的检测仪器主要有血细胞计数池、Makler计数池和Cell-VU计数池以及CASA系统随机配置的Macro精子计数池。但国内外专家发现，这种精子计数方法所得的结果可比性较差，其原因不仅包括来自精液标本本身的影响因素，如标本完整性、精液粘稠度等，还包括来自精子计数操作过程中的技术误差，如计数池的差异、样本混匀、加样、技术人员的熟练程度等。检测精子密度的经典方法是进行精液常规检查，这种方法需要到医院去取样，不但受到环境、方法、时间的限制，还会增加被检男性的心理负担，主观和客观因素的限制导致很多人不愿意到医院做检查，而更倾向于在家庭等私密环境中自检。目前，中国市场上存在的精子密度自检工具是基于比色法设计的试剂盒，该方法通过化学染料碘化丙啶对精液中的核酸成分进行染色，根据显色深浅判断精子密度。这种方法虽然具有一定的可行性，但也存在多个弊端：首先，碘化丙啶作为有一定致癌性的核酸染料，家庭使用存在风险；其次，该方法步骤繁琐，结果判读受到主观因素的影响，准确性较低；更重要的是，比色法不能区别精液中非精子细胞成分，容易受到白细胞等其他细胞的影响。比色法本身的这些问题使其无法推广，市场迫切需要一种更方便、更安全、更准确的家用精子密度检测工具。精子顶体蛋白（Acrosomalvesicle protein 1，简称ACRV1）是研究较多的一种精子特异性蛋白。一方面，ACRV1的基因位于人的11号染色体上，是单拷贝基因，成熟精子中ACRV1的蛋白含量非常稳定；另一方面，ACRV1蛋白集中在精子顶体区的基质中，在精子细胞裂解时易于释放，能够方便地检测。这两个特点决定了ACRV1的蛋白量能够作为推断精子密度的可靠指标。胶体纳米金免疫层析法是一种对复杂样品中的目标蛋白进行检测的固相膜免疫分析方法，该方法将胶体金免疫技术和色谱层析技术相结合，其原理是将特异的抗原或抗体先固定于硝酸纤维素膜的某一区带，该干燥的硝酸纤维素膜一端浸入样品（如尿液、血液、精液裂解液、唾液等）后，由于毛细管作用，样品便会带着胶体金垫上的金标抗体或抗原沿着硝酸纤维素膜向前移动，当移动至固定有抗原或抗体的区域时，体系中发生抗原与抗体特异性结合反应，这一反应使胶体金在这一条带聚集而显示出紫红色，从而实现特异性的免疫诊断。由这一技术开发出的胶体金检测试纸已成功应用于多种临床诊断及药物监测。现有技术中的检测精子密度的方法，仅能定性地测定精子密度较高或者半定量的测定精子密度高于某一值，而不能准确地测定精子密度的范围。此外，现有技术中还公开了一种通过比较检测线（T线）与对照线（C线）的颜色差异来判断精子密度的方法。这种方法的缺点在于，其需要主观地比较判断C线与T线的颜色深浅，在家用中受到使用者个人主观的判断误差的影响，很难获得准确的误差较小的结果。针对这一技术问题，本技术提供了一种检测精子密度的方法，所述方法为双通道胶体金免疫层析法来检测精子标志蛋白ACRV1的浓度，所述两个通道分别标志性检测正常精子密度范围的上限和下限，从而用来评估男性精液样品中的精子密度是否处于适于受孕的范围。本技术仅通过肉眼观察两个通道的T线是否显色，就可以判断精子密度处于何种范围内。
技术实现思路
本技术的目的是提供一种评估精子密度的胶体金双通道测试棒，此测试棒可以家用评估精液中精子密度是否处于健康范围以内，以克服现有家用精子密度检测产品不安全、不准确、非特异的缺点，同时帮助患者避免到医院进行精液检查时受到的环境、方法、时间、以及心理上的限制。为了实现上述目的，本技术采用以下技术方案，提供一种评估精子密度的胶体金双通道测试棒，其包含基板和平行设置且互不接触的第一吸收性条带和第二吸收性条带，所述基板的两端分别定义为S端和E端，所述第一吸收性条带和第二吸收性条带分别包括样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜、吸水垫，所述样品垫的一端位于所述基板的S端，另一端位于所述金标垫的近S端上，所述金标垫的近E端位于所述硝酸纤维素膜的近S端表面上，所述硝酸纤维素膜的近E端位于吸水垫的近S端下面，所述吸水垫的近E端位于所述基板的E端，所述硝酸纤维素膜上分别包被T线和C线，所述T线靠近S端，所述C线靠近E端，其中所述第一吸收性条带的T线包被有抗人ACRV1蛋白的抗体，C线包被有抗鼠二抗，第二吸收性条带的T线包含人ACRV1蛋白，C线包被有抗鼠二抗，所述金标垫包被有胶体金标记的鼠抗人ACRV1单克隆抗体。技术方案中提供的测试棒，进一步包含壳体，其分别在第一吸收性条带和第二吸收性条带的样品垫的上端具有开口，并且在第一吸收性条带和第二吸收性条带的T线和C线上端具有开口。技术方案中提供的测试棒，进一步的包含第一吸收条带的T线，第一吸收条带的C线；第二吸收条带的T线，第二吸收条带的C线。第一吸收性条带的T线上包含的抗人ACRV1蛋白抗体的含量为0.2-1 μL/cm，浓度为0.5-2 mg/mL，第一吸收性条带的C线包含的抗鼠二抗的含量为0.5-2.0 mg/mL；第二吸收性条带的T线包含的人ACRV1蛋白的含量为0.5-2.0 mg/mL，包被量为0.2-1 μL/cm，第二吸收性条带的C线包含的抗鼠二抗的含量为0.5-2.0 mg/mL，包被量为0.2-1 μL/cm。技术方案中提供的测试棒，进一步的包含第一和第二吸收条带的金标垫，包含的胶体金标记的鼠抗人ACRV1单克隆抗体的含量为3-6 μL/cm。本技术根据上述技术方案，设计开发了一种用于评估男性精液中精子浓度是否处于健康范围之内的双通道测试棒。通道一用于测定男性精液中的精子密度是否低于生育所需精子密度的下限，通道二用于判断精子密度是否显著高于正常至孕的上限。其中通道一的硝酸纤维素膜上有一条兔抗人ACRV1蛋白多克隆抗体的T线和一条抗鼠二抗的C线，T线的报告设定值为高于1500万个精子／毫升精液；通道二的硝酸纤维素膜上带有重组人ACRV1蛋白的T线和抗鼠二抗的C线，T线的报告设定值为低于25000万个精子／毫升精液。该方法不仅具有使用安全、灵敏度高、特异性强、稳定性好等特点，更具有方便快捷、无需任何仪器设备、结果判读直观可靠的优点。使用该测试棒，受试者可以随时在家中自我检测。附图说明图1是一种评本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种评估精子密度的胶体金双通道测试棒，其特征在于包含基板和平行设置且互不接触的第一吸收性条带和第二吸收性条带，所述基板的两端分别定义为S端和E端，所述第一吸收性条带和第二吸收性条带分别包括样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜、吸水垫，所述样品垫的一端位于所述基板的S端，另一端位于所述金标垫的近S端上，所述金标垫的近E端位于所述硝酸纤维素膜的近S端表面上，所述硝酸纤维素膜的近E端位于吸水垫的近S端下面，所述吸水垫的近E端位于所述基板的E端，所述硝酸纤维素膜上分别包被T线和C线，所述T线靠近S端，所述C线靠近E端，其中所述第一吸收性条带的T线包被有抗人ACRV1蛋白的抗体，C线包被有抗鼠二抗，第二吸收性条带的T线包含人ACRV1蛋白，C线包被有抗鼠二抗，所述金标垫包被有胶体金标记的鼠抗人ACRV1单克隆抗体。
【技术特征摘要】
1.一种评估精子密度的胶体金双通道测试棒，其特征在于包含基板和平行设置且互不接触的第一吸收性条带和第二吸收性条带，所述基板的两端分别定义为S端和E端，所述第一吸收性条带和第二吸收性条带分别包括样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜、吸水垫，所述样品垫的一端位于所述基板的S端，另一端位于所述金标垫的近S端上，所述金标垫的近E端位于所述硝酸纤维素膜的近S端表面上，所述硝酸纤维素膜的近E端位于吸水垫的近S端下面，所述吸水垫的近E端位于所述基板的E端，所述硝酸纤维素膜上分别包被T线和C线，所述T线靠近S端，所述C线靠近E端，其中所述第一吸收性条带的T线包被有抗人ACRV1蛋白的抗体，C线包被有抗鼠二抗，第二吸收性条带的T线包含人ACRV1蛋白，C线包被有抗鼠二抗，所述金标垫包被有胶体金标记的鼠抗人ACRV1单克隆抗体。2.根据权利要求1所述的测试棒，其特征是进一步包括：壳体，其分别在第一吸收性条带和第二吸收性...
【专利技术属性】
技术研发人员：郝睿，陈明慧，
申请(专利权)人：南京沐美生物科技有限公司，
类型：新型
国别省市：江苏;32
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