当归补血汤的应用制造技术

本发明专利技术公开了当归补血汤的应用，具体是在制备增强骨髓细胞聚集能力药物和/或在制备增加骨髓基质细胞贴壁能力药物方面的应用，本发明专利技术突破现有技术关于当归补血汤具有对骨髓基质细胞的增殖作用的技术偏见，提供了当归补血汤在增强骨髓细胞聚集能力和/或增加骨髓基质细胞贴壁能力方面的新应用。

【技术实现步骤摘要】


本专利技术涉及医药
，更具体地，涉及当归补血汤在制备促进骨髓细胞黏附能力的药物方面的应用。

技术介绍

当归补血汤，出自金元四大家之一李杲的《内外伤辨惑论》卷中，方剂组成为黄芪一两，当归两钱，具有补气生血之功效，主治劳倦内伤，气血虚弱，阳浮于外，肌肤燥热，面红目赤，烦渴引饮，脉洪大而虚，以及妇人经行、产后血虚发热头痛，或疮疡渍后久不愈合者。该方的应用已有800多年的应用历史，临床疗效显著，特别是对放化疗引起的骨髓抑制又很好的缓解作用。
陈玉春等在《当归补血汤补血作用机理的探讨》中提出，当归补血汤能显著促进正常小鼠SCM和LCM中及血虚小鼠SCM中CSFs的产生。当归促进，而黄芪显著抑制正常小鼠SCM中CSFs生成。结果揭示当归补血汤的补血活血作用与其刺激CSFs分泌有关，且系当归的作用所致。金若敏等提出当归补血汤能显著增加血虚模型小鼠的红细胞、白细胞数；侯火明等在《当归补血汤治疗贫血机制研究进展》中提出，当归补血汤能刺激骨髓造血祖细胞，从而有可能增强粒系、单核巨噬细胞的生长、成熟与释放，而达到生血补血的作用；已有文献报道，当归补血汤能够升高外周血中红细胞和骨髓组织中BFU-E和CFU-E祖细胞的数量。
骨髓是机体的主要造血器官，骨髓中的造血干细胞通常处于休眠状态，并通过不对称有丝分裂(即一个造血干细胞产生的两个子代细胞中，一个分化为造血祖细胞，并进一步分化为成熟的血细胞；另一个则仍然保持造血干细胞的特征)来保持体内造血干细胞数量的恒定，以维持机体的终身造血功能。
造血干细胞在骨髓中的分布不是随机分布的，而是根据其成熟阶段的不同而存在于不同的微环境中。这种微环境是有不同的骨髓基质细胞、充填在细胞之间的细胞外基质和进入骨髓的血管和神经组成。造血微环境的不同成分可通过多种机制对造血进行正性和负性调控，主要作用方式可分为三种，细胞与细胞间的接触、细胞外基质与细胞相互作用和细胞因子对细胞的作用。
骨髓基质细胞是一种复杂的细胞群体，包含有成纤维细胞、网状细胞、内皮细胞、脂肪细胞和破骨细胞等。骨髓基质细胞与造血干细胞之间的直接接触可以起到固定造血干细胞和直接传递造血信号的作用。在造血细胞表面已发现20多种黏附受体，包括钙黏素、整合素、选择素和免疫球蛋白家族成员等，它们的配体主要是细胞外基质成分和基质细胞表面黏附分子。黏附受体与相应配体的相互作用能激活细胞内多种信号转导通路，产生特异的细胞效应。造血系统内的细胞黏附作用调节造血过程中的多种生物学行为，包括造血干祖细胞在造血组织内的归巢、居住和迁移，成熟血细胞从造血器官释放如外周血，造血干祖细胞的生存、生长和命运。
已有文献报道，主要有破骨细胞组成的造血微环境，能够保持干细胞处在慢速分裂状态并抑制其分化，其调节作用主要是通过细胞与细胞之间的直接接触、生长因子和细胞因子来协调完成；主要有内皮细胞、网状细胞等组成的造血微环境，能够促进造血干细胞的分裂，内皮细胞表面高表达黏附分子：E选择素和VCAM-1。内皮细胞表面的黏附分子P、E选择素和VCAM-1能够通过与造血干细胞表面的PSG-1配体接触来促进造血干细胞的归巢。造血干细胞可通过选择性的表达细胞表面分子来调节与造血微环境作用的强弱，造血微环境中的基质细胞可通过表达细胞黏附分子、基质蛋白和生长因子等来调节造血干细胞的生长状态，有研究表明甲状旁腺素可通过增加破骨细胞表面CXCL-12的表达来促使造血干细胞保留造血壁龛中。造血干细胞膜表面的络氨酸激酶受体Tie2通过与破骨细胞表面的Ang-1接触来控制造血干细胞处在休眠期。B祖细胞的分化受到基质细胞表面VCAM-1和祖细胞表面α1β2整合素相互接触的影响。综上所述。造血干细胞与骨髓基质细胞之间可通过直接接触来传递造血调控的正负信号，来保持体内造血干细胞数目的恒定和成熟血细胞的持续产生。

技术实现思路

本专利技术要解决的技术问题是填补古方当归补血汤的应用技术不足，提供当归补血汤在制备促进骨髓细胞黏附能力的药物方面的应用。
本专利技术的目的通过以下技术方案予以实现：
提供当归补血汤在制备增强骨髓细胞聚集能力药物方面的应用。
提供当归补血汤在制备增加骨髓基质细胞贴壁能力药物方面的应用。
为进一步保证新应用的技术效果，本专利技术提供了原材料的不同产地对应用效果的影响作用。优选地，所述当归补血汤上述应用中，本专利技术独辟蹊径，为保证当归补血汤上述应用效果的稳定性，进一步精确研究了不同产地黄芪和当归的配伍在所述应用方面的不同效果。结果表明，以来自于中国内蒙古产的黄芪和中国云南产当归的配伍或来自于中国甘肃产的黄芪和中国甘肃产的当归的配伍所得当归补血汤，在制备增强骨髓细胞聚集能力药物方面的应用效果较佳，尤以甘肃产黄芪和甘肃产当归的配伍所得当归补血汤在制备增强骨髓细胞聚集能力药物方面的应用效果最为显著。
本专利技术的有益效果如下：
本专利技术突破现有技术关于当归补血汤具有对骨髓基质细胞的增殖作用的技术偏见，提供了当归补血汤在增强骨髓细胞聚集能力和/或增加骨髓基质细胞贴壁能力方面的新应用，为进一步保证新应用的技术效果，本专利技术提供了原材料的不同产地对应用效果的影响作用。本专利技术关于当归补血汤增强骨髓细胞聚集能力的研究成果有助于更好地解释当归补血汤发挥药效的作用机制，并从整体调节和多靶点角度更科学的指导临床用药，以更精准的进行个体化治疗；有助于了解骨髓基质细胞体外的生活特性，以满足以骨髓基质细胞作为饲养层细胞体外长期培养和扩增造血干细胞的需要，并进一步为造血干细胞回输治疗的应用提供保障。
附图说明
图1不同处理组小鼠骨髓细胞聚集情况。A、统计图；B、正常组；C、模型组；D、低剂量组；E、中剂量组；F、高剂量组；G、EPO组。
图2不同浓度当归补血汤对骨髓基质细胞的作用。
图3当归补血汤促骨髓基质细胞增殖能力。
图4当归补血汤对细胞周期的影响。
其中A贴壁细胞；B悬浮细胞；C对照组贴壁细胞；D中药组贴壁细胞；E对照组悬浮细胞；F中药组悬浮细胞。
图5不同批次当归补血汤指纹图谱。
图6当归补血汤共有图谱。
图7不同产地当归补血汤促进骨髓基质细胞贴壁能力。
具体实施方式
下面结合具体实施例进一步说明本专利技术。下述实施例仅用于示例性说明，不能理解为对本专利技术的限制。除非特别说明，下述实施例中使用的原料为常规市购或商业途径获得的原料，除非特别说明，下述实施例中使用的方法和设备为本领域常规使用的方法和设备。
实施例1
试验材料：当归和黄芪购自广州致信中药饮片有限公司；IMDM(Hyclone)；胎牛血清(BI)；Hoechst33342(sigma)。
试验方法：
1、骨髓抑制小鼠模型制备及给药
把30只小鼠按体重采用“均衡随机”法分为正常组、骨髓抑制模型组、当归补血汤低剂量组、当归补血汤中剂量组、当归补血汤高剂量组和EPO组，每组5只。除正常组外其它组小鼠连续腹腔注射阿霉素3天，给药剂量为4mg·kg-1·d-1，正常组给予同等体积的生理盐水。注射阿霉素3天后，当归补血汤低、中、高剂量组分别连续腹腔注射当归补血汤5天，给药剂量分别为5g·kg-1·d-1、15g·kg-1·d-1和25g·kg-1·d-1，正常组和模型组给予同等体积的生理盐水。
2、骨本文档来自技高网...

【技术保护点】
当归补血汤在制备增强骨髓细胞聚集能力药物方面的应用。

【技术特征摘要】
1.当归补血汤在制备增强骨髓细胞聚集能力药物方面的应用。
2.当归补血汤在制备增加骨髓基质细胞贴壁能力药物方面的应用。
3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述当归补血汤中的黄芪为来自于中国内蒙古产...

【专利技术属性】
技术研发人员：薄华本，黄树林，陈俊，王金全，陈启助，
申请(专利权)人：广东药学院，
类型：发明
国别省市：广东;44