一种观赏向日葵LCYE基因制造技术

技术编号:13296379 阅读:82 留言:0更新日期:2016-07-09 14:36
本发明专利技术提供了一种观赏向日葵LCYE基因,所述观赏向日葵LCYE基因序列如SEQ ID NO:1所示。本发明专利技术的优点在于:番茄红素环化酶(LYCB和LYCE)的相对活性对β‑类胡萝卜素和α‑类胡萝卜素组分积累起着重要的调节作用,本发明专利技术提供了一种类胡萝卜素生物合成途径及其关键酶和基因的研究,以阐明类胡萝卜素合成和积累的调控机制,并为通过基因工程手段调控植物类胡萝卜素合成成为可能。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术具体涉及一种观赏向日葵LCYE基因。
技术介绍
胡萝卜素是许多植物花、果实等的主要色素,对园艺植物的观赏性和经济价值起着重要的作用,其生物合成途径中的叶黄素是一种性能优异的抗氧化剂,可预防衰老和老年性眼球视网膜黄斑退化。另外叶黄素也可用作癌症预防剂、生命延长剂、溃疡抵制剂、心脏病与冠状动脉疾病的抵制剂。番茄红素ε环化酶(lycopeneepsiloncyclase,LCYE)催化线性的番茄红素选择性环化,形成δ-胡萝卜素,是叶黄素代谢途径中处于分支位点的关键酶。LYCB和LYCE基因表达的相对强弱,决定了由β-胡萝卜素代谢生成的β-隐黄质,玉米黄质、新黄质和由α-胡萝卜素代谢生成的α-隐黄质和叶黄体素在类胡萝卜素总量中的比例。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题,在于提供一种观赏向日葵LCYE基因。本专利技术是这样实现的:一种观赏向日葵LCYE基因,所述观赏向日葵LCYE基因序列如SEQIDNO:1所示。本专利技术的优点在于:番茄红素环化酶(LYCB和LYCE)的相对活性对β-类胡萝卜素(β-胡萝卜素、β-隐黄质、玉米黄质、花药黄质和堇菜黄质)和α-类胡萝卜素(α-胡萝卜素、α-隐黄质、辛黄质和叶黄体素)组分积累起着重要的调节作用,本专利技术提供了一种类胡萝卜素生物合成途径及其关键酶和基因的研究,以阐明类胡萝卜素合成和积累的调控机制,并为通过基因工程手段调控植物类胡萝卜素合成成为可能。附图说明下面参照附图结合实施例对本专利技术作进一步的说明。图1是观赏向日葵LCYE基因cDNA片段扩增电泳图谱。M:DNA标准分子量DL2000;1:HaLCYE中间片段扩增产物。图2是观赏向日葵HaLCYE氨基酸同源性分析示意图。图3是观赏向日葵HaLCYE与其它植物12个LCYE蛋白的系统进化分析示意图。具体实施方式一种观赏向日葵LCYE基因,所述观赏向日葵LCYE基因序列如SEQIDNO:1所示,即:CGTGCATATGGAAGAGTTAGTCGTGATTTACTTCATGAGGAGTTGCTGAGAAGGTGTGTGGAGTCAGGCGTTTCATATCTGAGCTCCAAAGTGGAACGGATTACTGAAGCTCCAAATGGCCAGAGTCTCATTGAGTGCGAAGGCAATATCACAATTCCATGCAGGCTTGCTACCGTTGCATCTGGAGCAGCTTCAGGAAAACTTTTGCAATATGAGCTTGGTGGTCCCCGTGTTTGTGTTCAAACGGCTTATGGTGTAGAGGTCGAGGTTGAAAGCATACCCTATGATCCAAGTCTAATGGTTTTCATGGATTATCGAGACTACACGAAACATAAATCTCAATCATTAGAAGCACAATATCCAACATTCCTTTATGTCATGCCCATGTCTCCAACTAAAGTATTCTTCGAGGAAACCTGTTTGGCTTCAAAAGAAGCCATGCCTTTCGAGTTATTGAAGACAAAGCTCATGTCAAGATTAAAGACAATGGGGATCCGAATAACCAAAACTTATGAAGAGGAATGGTCGTATATTCCAGTAGGCGGATCGTTACCGAACACAGAGCAAAAGAACCTTGCATTTGGTGCTGCTGCTAGCATGGTACATCCAGCCAC。RNA提取及引物设计采用Trizol法提取观赏向日葵黄色花瓣总RNA。根据GenBank检索到的LCYE氨基酸保守序列设计简并引物LCYE-F和LCYE-R(见表1),RNA反转录成cDNA第一链,以cDNA为模板进行PCR扩增,反应程序为:94℃预变性3min,94℃变性30s,53℃退火30s,72℃延伸30s,循环35次,72℃延伸7min。表1观赏向日葵HaLCYE基因克隆所用引物凝胶回收,连接载体并转化DH5α感受态细胞,通过蓝白斑筛选及PCR鉴定阳性克隆后,测序,获得长为614bp的cDNA片段,编码204个氨基酸,如图1所示,图1是观赏向日葵LCYE基因cDNA片段扩增电泳图谱,其中,M:DNA标准分子量DL2000;1:HaLCYE中间片段扩增产物。经Blast比对,该片段编码的氨基酸序列与多种植物的LCYE蛋白高度同源,其中与万寿菊(Tageteserecta)LCYE同源性最高,达94%,与菊花(Chrysanthemumboreale)和莴苣(Lactucasativa)LCYE同源性分别达93%、90%,认为获得的序列是观赏向日葵LCYE的保守序列。图2为观赏向日葵LCYE氨基酸序列与万寿菊、菊花和莴苣的LCYE蛋白的ClustalW氨基酸同源性分析示意图,从图2可以看出4个物种的氨基酸序列同源性很高。图3为观赏向日葵HaLCYE与其它植物12个LCYE蛋白的系统进化分析示意图,在多重比对的基础上,应用MEGA4.0对13个LCYE的氨基酸序列进行了系统进化树分析。从图3可以看出,HaLCYE万寿菊、菊花和莴苣的LCYE聚为一支。虽然以上描述了本专利技术的具体实施方式,但是熟悉本
的技术人员应当理解,我们所描述的具体的实施例只是说明性的,而不是用于对本发明的范围的限定,熟悉本领域的技术人员在依照本专利技术的精神所作的等效的修饰以及变化,都应当涵盖在本专利技术的权利要求所保护的范围内。本文档来自技高网
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【技术保护点】
一种观赏向日葵LCYE基因,其特征在于:所述观赏向日葵LCYE基因序列如SEQ ID NO:1所示。

【技术特征摘要】
1.一种观赏向日葵LCYE基因,其特征在于:所述观赏向日葵...

【专利技术属性】
技术研发人员:黄敏玲樊荣辉吴建设钟淮钦林榕燕
申请(专利权)人:福建省农业科学院作物研究所
类型:发明
国别省市:福建;35

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