一种用于降解酸性艳绿的组合物制造技术

本发明专利技术属于染料降解技术领域，公开了一种用于降解酸性艳绿的组合物，包括粗酶液和1-羟基苯并三唑；所述粗酶液是由贝壳状革耳菌Panus conchatus发酵产生；利用贝壳状革耳菌Panus conchatus发酵产生的粗酶液，与1-羟基苯并三唑混合后在最佳反应条件下35min对酸性艳绿的降解率达98%。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及染料降解
，更具体地，涉及一种用于降解酸性艳绿的组合物。
技术介绍
造纸行业中除了办公及印刷等所用的白色纸张外，大量带有颜色的纸张的需求量也随着人们生活水平的提高和经济的飞速发展而不断的增加，这样就需要各种用于给纸张染色的染料，造成了大量的染料废水。染料废水是含染料的有色废水，是难以处理的工业废水之一。随着染料工业和印刷工业的迅猛发展，染料的种类和数量在不断的增加。在染料生产和使用的过程中，约有10～20%的染料随废水排放到环境中去。生产染料的基本原料是苯系、萘系、蒽醌、苯胺及联苯胺类化合物，并且在生产过程中长与金属、盐类等物质相螯合，因此染料废水中含有很多具有生物毒性的有机物，即使废水中残余的染料浓度很低，排入水体中后也会造成水体透光率降低、水体生态系统的破坏等问题。因此染料的降解成为了处理染料废水的首要问题。漆酶广泛的底物范围使得它可以用于降解多种结构的染料。朱启忠等人研究了白毒鹅膏菌漆酶的粗酶液与12种工业染料的反应，结果发现漆酶粗酶液能与直接大红、直接黑等造纸用染料反应，且脱色率在70%左右；S.RodríguezCouto研究了Trameteshirsuta漆酶对直接黑等染料的降解效果，结果显示直接黑的脱色率达到70%，直接蓝则接近80%，显示了漆酶对染料较好的降解效果。酸性艳绿GS是工业中常用的一种染料，由于其较难降解，从而成为了研究难题，目前还没有看到关于真菌漆酶降解酸性艳绿GS的研究报道。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是克服现有技术存在的上述缺陷，提供一种用于降解酸性艳绿的组合物。本专利技术的目的是通过以下技术方案予以实现的：一种用于降解酸性艳绿的组合物，包括粗酶液和1-羟基苯并三唑；所述粗酶液是由贝壳状革耳菌Panusconchatus发酵产生。优选地，所述贝壳状革耳菌Panusconchatus每升发酵培养基中含有1～5mmol/L硫酸铜和1～10g天然底物。优选地，所述天然底物为麦麸、豆粕、蔗渣、玉米杆粉中的一种或两种以上。优选地，所述漆酶的用量为0.5～1U/mL；1-羟基苯并三唑的质量百分数为0.005%～0.015%。优选地，所述漆酶的用量为0.8U/mL；1-羟基苯并三唑的质量百分数为0.005%。与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：本专利技术提供了一种用于降解酸性艳绿的组合物，包括粗酶液和1-羟基苯并三唑；所述粗酶液是由贝壳状革耳菌Panusconchatus发酵产生；利用贝壳状革耳菌Panusconchatus发酵产生的粗酶液，与1-羟基苯并三唑混合后在最佳反应条件下35min对酸性艳绿的降解率达98%。具体实施方式下面通过实施例对本专利技术进一步具体描述。本专利技术的设计思想或同类物质的简单替代属于本专利技术的保护范围。下述所使用的实验方法若无特殊说明，均为本
现有常规的方法，所使用的配料或材料，如无特殊说明，均为通过商业途径可得到的配料或材料。本专利技术所用到的贝壳状革耳菌Panusconchatus是专利号为201210270321.4的中国专利所公开的菌株，该菌株4℃下保存于PDA斜面培养基中。实施例1菌种：贝壳状革耳菌Panusconchatus，4℃下保存于PDA斜面培养基中。柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液：准确称取固体柠檬酸和柠檬酸钠，加蒸馏水溶解后，分别将其定容至1L。并混合得到不同pH的缓冲液。酸性艳绿GS母液：称取酸性艳绿GS0.1g，用蒸馏水溶解，并最终用容量瓶定容至100mL。实验时根据需要对母液进行适当稀释。1-羟基苯并三唑（HOBT）溶液：配制质量分数为1%的HOBT溶液，称取HOBT1g，用加热的蒸馏水溶解，冷却后定容至100mL。常温保存。粗酶液的制备：（1）种子的制备：取出冰箱中保存于PDA斜面上的成熟菌丝，用接种针挑取菌丝体至捣碎器中，加入适量的蒸馏水将菌体破碎制成菌丝悬浮液，将菌丝悬浮液以1：3的比例接种于装有60ml液体培养基的300ml三角瓶中。28oC，160rpm摇床培养3d。过滤，用无菌水洗净备用。（2）摇瓶诱导液体发酵：将种子以1：4的比例接种于含有80ml发酵培养基（10g麦麸、10g玉米杆粉、2mmol/LCuSO4）的300ml三角瓶中，160rpm，30oC培养。培养过程中每2d取一瓶发酵液，经6层纱布过滤后，4℃下5000rpm冷冻离心15min，收集上清液即为粗酶液，将培养一定天数具有最高漆酶活性的发酵液收集4000rpm离心10min，取上清液4℃保存备用。一、酸性艳绿GS的脱色降解染料脱色率的测定：10mL的反应体系中，含有不同浓度的染料溶液和酶液，其余用蒸馏水补足。在常温下反应一定时间，用紫外可见光分光光度计进行分析，记录染料在特征波长处的吸光值的变化，相同实验条件下，加入等量灭活酶液作为对照。贝壳状革耳菌漆酶降解酸性艳绿GS的体系包括：0.1mol/L柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液（pH4.0）7.92mL，100mg/L酸性艳绿GS2mL（终浓度20mg/L），粗酶液70ul（漆酶总酶活约为280U/mL）。反应时间根据实际确定，制作酸性艳绿GS标准曲线，工作曲线的线性回归方程为y=0.019x+0.121，R2=0.9971。因此，在脱色降解实验中，可利用吸光度来计算溶液中染料的浓度。在常温下，pH=3的条件下，添加粗酶液使体系中漆酶酶活为1.0U/mL，对染料浓度为80mg/L的酸性艳绿GS进行脱色，其脱色率随反应时间的延长基本不变。添加浓度为0.01%的介体HOBT，酸性艳绿GS在1h内脱色明显，因此将漆酶降解酸性艳绿GS的反应时间定为1h。脱色体系在反应过程中每1min取样，于200～800nm进行紫外-可见光谱扫描，发现在500～700nm间没有其他特征峰出现，且只在酸性艳绿GS的吸光值在最大吸收峰636nm处明显下降。酶解反应1h后吸收峰变化不大。实施例2贝壳状革耳菌漆酶降解酸性艳绿GS正交试验设计本研究选用5个因素（反应体系pH、反应温度、漆酶用量、介体用量和染料浓度），每个因素分为3个水平。按照所选定的因素和水平利用SPSS软件设计出正交表。根据因素和水平要求，运行IBMSPSSStatistics程序，进入数据编辑窗口，点击“数据—正交设计—生成”，打开“生成正交设计”对话框，在“因子名称”框中输入A，点击添加；同样输入输入B、C、D、E、F，然后选中变量A，点击“定义值”，进入“生成设计：定义值”对话框，在“值”一栏中前本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于降解酸性艳绿的组合物，其特征在于，包括粗酶液和1‑羟基苯并三唑；所述粗酶液是由贝壳状革耳菌Panus conchatus发酵产生。

【技术特征摘要】
1.一种用于降解酸性艳绿的组合物，其特征在于，包括粗酶液和1-羟基苯并三唑；所述
粗酶液是由贝壳状革耳菌Panusconchatus发酵产生。
2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述贝壳状革耳菌Panusconchatus每
升发酵培养基中含有1～5mmol/L硫酸铜和1～10g天然底物。
3.根据权利要求2所述的组合物，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：林康艺，
申请(专利权)人：林康艺，
类型：发明
国别省市：广东;44