山蜡梅叶片在制备抑制恶性胚胎横纹肌瘤细胞RD细胞增殖药物中的应用制造技术

本发明专利技术属于中药技术领域，具体涉及一种山蜡梅叶片在制备抑制恶性胚胎横纹肌瘤细胞RD细胞增殖药物中的应用及山蜡梅叶片的制备方法。所述山蜡梅叶片由山蜡梅叶1500g作为原料药制成，采用超临界萃取制备而成，使得槲皮素和山柰素含量有很大提高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于中药
，具体涉及一种山蜡梅叶片在制备抑制恶性胚胎横纹肌瘤细胞RD细胞增殖药物中的应用及山蜡梅叶片的制备方法。
技术介绍
山蜡梅叶片标准号WS-11310(ZD-1310)-2002，记载于国家中成药标准汇编内科内科肺系（一）分册。由山蜡梅叶1500g作为原料药制成，具有辛凉解表，清热解毒的功效。用于风热感冒，发热，恶寒，咽痛。现有技术中，尚未有山蜡梅叶片在在制备抑制人恶性胚胎横纹肌瘤细胞RD细胞增殖药物中的应用的报道，也未见有山蜡梅叶片提取制备方面采用超临界萃取的报道，而水煎煮、水蒸气蒸馏法提取挥发油的方法，工艺粗糙、落后，杂质多，导致患者用量过大，不方便服用，严重影响了本品在临床上应用。
技术实现思路
专利技术目的：本专利技术的目的在于提供一种山蜡梅叶片在制备抑制恶性胚胎横纹肌瘤细胞RD细胞增殖药物中的应用。本专利技术的另一个目的在于提供一种山蜡梅叶片的制备方法。本专利技术的目的是通过如下的方案实现的：山蜡梅叶片在制备抑制恶性胚胎横纹肌瘤细胞RD细胞增殖药物中的应用，所述山蜡梅叶片由山蜡梅叶1500g作为原料药制成，所述山蜡梅叶片的制备方法由下列步骤组成：取山蜡梅叶，加入到CO2超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为4-6%，萃取压力15-30MPa，温度30-50℃，CO2流量l-3ml/g生药·min，萃取时间700-800min，得超临界萃取物，将超临界萃取物加入淀粉，70%乙醇制颗粒，干燥，压片，制成500片，每片重0.35g。r>优选的，上述的山蜡梅叶片在制备抑制恶性胚胎横纹肌瘤细胞RD细胞增殖药物中的应用，所述山蜡梅叶片的制备方法由下列步骤组成：取山蜡梅叶，加入到CO2超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为5%，萃取压力25MPa，温度40℃，CO2流量2ml/g生药·min，萃取时间750min，得超临界萃取物，将超临界萃取物加入淀粉，70%乙醇制颗粒，干燥，压片，制成500片，每片重0.35g。现有技术中，山蜡梅叶片口服，一次6～7片，一日3次。山蜡梅叶片服药量大。采用本专利技术方法制备成的山蜡梅叶片每片重0.35g，每次仅需3片，一日服用3次。在具有更多活性成分的条件下大大减少了服用量。此结论可以通过下述试验证明。试验一、不同方法制备的山蜡梅叶片中槲皮素和山柰素含量的比较l、仪器及试药本专利技术山蜡梅叶片：按实施例1方法制备，使用1500g原料药，经提取制成500片，每片重0.35g。原山蜡梅叶片，按照WS-11310(ZD-1310)-2002标准方法制备。Agilent1200高效液相色谱仪；METTLERAE240电子分析天平；槲皮素和山柰素对照品（中国药品生物制品检定所）。2、方法照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录ⅥD）测定。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-0.5％磷酸溶液（45∶55）为流动相；检测波长为365nm。理论板数分别按槲皮素、山柰素峰计算均应不低于1500。对照品溶液的制备精密称取槲皮素、山柰素对照品适量，分别加甲醇制成每1ml含6μg、8μg的溶液，即得。供试品溶液的制备取本专利技术山蜡梅叶片10片，精密称定，研细，取0.60g，精密称定，加甲醇加热回流2次（50ml、50ml），每次1小时，滤过，合并滤液，残渣加甲醇适量洗涤，滤过，洗液并入滤液中，蒸干，残渣加水30ml使溶解，用冰醋酸调节pH值至3～4，加醋酸乙酯振摇提取5次，每次30ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。对照产品供试品溶液的制备取对照的山蜡梅叶片20片，精密称定，研细，取1.2g，精密称定，加甲醇加热回流2次（50ml、50ml），每次1小时，滤过，合并滤液，残渣加甲醇适量洗涤，滤过，洗液并入滤液中，蒸干，残渣加水30ml使溶解，用冰醋酸调节pH值至3～4，加醋酸乙酯振摇提取5次，每次30ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液、对照产品供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，即得。3、结果结果表明，本专利技术山蜡梅叶片中槲皮素和山柰素的含量为220-362μg/片；而原山蜡梅叶片中槲皮素和山柰素的含量为36μg/粒，每次服用量3片的槲皮素和山柰素含量为原片剂6粒含量的3-5倍，在服用量减少的情况下，槲皮素和山柰素含量有很大提高。上述研究表明，采用本专利技术制备方法制备的山蜡梅叶片，有效成分含量远远高于WS-11310(ZD-1310)-2002标准记载的方法制备的山蜡梅叶片。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术作更进一步的说明，以便本领域的技术人员更了解本专利技术，但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例，凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。实施例1取山蜡梅叶1500g，加入到CO2超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为5%，萃取压力25MPa，温度40℃，CO2流量2ml/g生药·min，萃取时间750min，得超临界萃取物，将超临界萃取物加入淀粉，70%乙醇制颗粒，干燥，压片，制成500片，每片重0.35g。经检测，成品中槲皮素和山柰素的含量为362μg/片。实施例2取山蜡梅叶1500g，加入到CO2超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为4%，萃取压力15MPa，温度30℃，CO2流量1ml/g生药·min，萃取时间800min，得超临界萃取物，将超临界萃取物加入淀粉，70%乙醇制颗粒，干燥，压片，制成500片，每片重0.35g。经检测，成品中槲皮素和山柰素的含量为220μg/片。实施例3取山蜡梅叶1500g，加入到CO2超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为6%，萃取压力30MPa，温度60℃，CO2流量3ml/g生药·min，萃取时间700min，得超临界萃取物，将超临界萃取物加入淀粉，70%乙醇制颗粒，干燥，压片，制成500片，每片重0.35g。经检测，成品中槲皮素和山柰素的含量为308μg/片。实施例4：山蜡梅叶片抑制恶性胚胎横纹肌瘤细胞RD细胞增殖的实验研究资料1．实验材料1.1实验用细胞株人恶性胚胎横纹肌瘤细胞RD细胞，山东大学实验室细胞库，DMEM+10%FBS常规培养。1.2实验药物研究药物：本专利技术山蜡梅叶片：按实施例1方法制备。药液储液：称取100mg山蜡梅叶片，溶于5ml无水乙醇中，0.2μm滤器过滤，500μldoff管分装，-20℃存储，同时0.2μm滤器过滤无水乙醇以备对照组之用。1.3实验试剂DMEM(GIBCO公司Cat.No.12100-061Lot.N本文档来自技高网...

【技术保护点】
山蜡梅叶片在制备抑制恶性胚胎横纹肌瘤细胞RD细胞增殖药物中的应用，所述山蜡梅叶片由山蜡梅叶1500g作为原料药制成，其特征在于，所述山蜡梅叶片的制备方法由下列步骤组成：取山蜡梅叶，加入到CO2超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为4‑6%，萃取压力15‑30MPa，温度30‑50℃，CO2流量l‑3ml/g生药·min，萃取时间700‑800min，得超临界萃取物，将超临界萃取物加入淀粉，70%乙醇制颗粒，干燥，压片，制成500片，每片重0.35g。

【技术特征摘要】
1.山蜡梅叶片在制备抑制恶性胚胎横纹肌瘤细胞RD细胞增殖药物中的应用，所述山蜡梅叶片由山蜡梅叶1500g作为原料药制成，其特征在于，所述山蜡梅叶片的制备方法由下列步骤组成：取山蜡梅叶，加入到CO2超临界萃取器中，乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为4-6%，萃取压力15-30MPa，温度30-50℃，CO2流量l-3ml/g生药·min，萃取时间700-800min，得超临界萃取物，将超临界萃取物加入淀粉，70%乙醇制颗粒，干燥，压片，制成500片，...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨志华，李晶，
申请(专利权)人：济南新时代医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37