野生松茸驯化母种制备方法技术

本发明专利技术公开了一种野生松茸驯化母种制备方法，包括如下步骤：采集自然野外生长的松茸制备孢子液；加入到液体培养基中进行摇菌，进行液体多孢自交后，将所得的松茸混合菌丝液在洁净室接种于栽培瓶的培养料上，用透气盖封口，置于培养室内暗培养25～30d，并在2～6d时，进行超声波水浴培养；待菌丝长满栽培瓶后，感染处理松茸的优势伴生树种，浇水900ml～1000ml，盖好覆盖物，人工驯化，即可得到稳定性强，可用于繁殖生产的松茸母种。本发明专利技术通过培养基和培养方法的合理改进，实现了松茸母种的人工驯化，改变了松茸生产完全依靠自然的现状，而且还实现了松茸产品的稳产、高产和优质。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及松茸培养领域，具体涉及一种。
技术介绍
松鸾Tricholoma matsutake Sing.是世界著名的野生食用菌之一。近几年来云南出口的松茸已占世界主要市场——日本市场销售量的60%以上，年出口松茸创汇达到4000万美元以上，2004年达到5361万美元，出口量为1280.85吨，其中鲜松茸973.5吨，松茸制品307.35吨。据调查，德钦县和香格里拉县农民经济收入的60%以上来源于松茸。松茸产业的持续、健康发展将为山区农民脱贫致富、边疆少数民族地区的农村经济的发展、社会的稳定提供重要经济保障。—个多世纪的松茸驯化研究表明，直接采用纯培养菌种实现松茸人工栽培是一种难以实现的目标，为此，非常有必要进行人工驯化栽培技术开发。
技术实现思路
为解决上述问题，本专利技术提供了一种。为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案为:，包括如下步骤:S1、采集自然野外生长的松茸，取发育完全的子实体菌盖部分，切掉菌柄，用75%的酒精棉球擦净菌盖表面，菌褶朝下用灭过菌的铁钩勾住悬挂于灭菌的三角瓶中，用无菌棉塞封口过夜，收集孢子印，用无菌水制成孢子液；S2、加入到液体培养基中进行摇菌，进行液体多孢自交，摇菌条件为:转速140r/min，培养温度为25°C，得松茸混合菌丝液；S3、将所得的松茸混合菌丝液在洁净室接种于栽培瓶的培养料上，用透气盖封口，并置于14?15°C的培养室内暗培养25?30d，在2?6d时，进行超声波水浴培养，超声波的频率和功率分别设定为68kHz和600W，超声波处理时间为lOmin?90min，超声间歇比为20s/5s ?30s/5s；S4、待菌丝长满栽培瓶后，感染处理松茸的优势伴生树种，浇水900ml?1000ml，盖好覆盖物，人工驯化，即可得到稳定性强，可用于繁殖生产的松茸母种。 其中，所述步骤S2中的液体培养基每升含:葡萄糖20?24g、酵母膏0.3?0.5g、蛋白胨0.5?0.7g、葛仙米冻干粉3?5g、氨基酸螯合镁0.05?0.07g、磷酸二氢钾0.1?0.2g、水溶性淀粉40?60g，其余为无菌水。其中，所述步骤S3中的培养料通过以下步骤制备:(1)称取松树木肩36?48份、魔芋粉8?10g、大蒜素0.5?0.6份、风化煤8?10份置于汽爆罐内，先通入氮气至汽爆罐内压力为0.7?1.3MPa，爆破处理8?25min ;然后迅速通入蒸汽至汽爆罐内压力为1.3?1.7MPa，蒸汽爆破处理0.5?2.5min，得混合物；(2)将所得的混合物自然降温至常温后，加入氮化硅超微粉3?7份、甲壳素纤维4?6份、海藻酸纤维3?5份混合搅拌均勾，并通过加入水调整水分含量为总重量的64?68%，得培养基料备用。其中，所述葛仙米冻干粉通过以下步骤制备:取50?55份葛仙米，清洗，用研磨机磨成粗粉，然后用90?95°C热水浸泡50?85min，捞出沥干后，加入10?12份常温纯净水，和匀，然后按照接种量1?1.5%的比例接种微生物发酵剂，保持温度38°C，发酵52?58小时，发酵结束后低温烘干，研磨成细粉。其中，所述微生物发酵剂的成分为:按照菌株数量比乳酸杆菌:地衣芽孢杆菌:谷氨酸棒杆菌为:1: 1.2: 2的比例配制成1.5X107菌株/ml的发酵剂。本专利技术具有以下有益效果:通过培养基和培养方法的合理改进，实现了松茸母种的人工驯化，改变了松茸生产完全依靠自然的现状，而且还实现了松茸产品的稳产、高产和优质。同时，本专利技术还有效地保护了松茸种质资源及其所依赖的生态环境，为实现了松茸生产的可持续发展提供了一条有效的途径。【具体实施方式】为了使本专利技术的目的及优点更加清楚明白，以下结合实施例对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。以下实施中，所述步骤S2中的液体培养基每升含:葡萄糖20?24g、酵母膏0.3?0.5g、蛋白胨0.5?0.7g、葛仙米冻干粉3?5g、氨基酸螯合镁0.05?0.07g、磷酸二氢钾0.1?0.2g、水溶性淀粉40?60g，其余为无菌水。所述步骤S3中的培养料通过以下步骤制备:(1)称取松树木肩36?48份、魔芋粉8?10g、大蒜素0.5?0.6份、风化煤8?10份置于汽爆罐内，先通入氮气至汽爆罐内压力为0.7?1.3MPa，爆破处理8?25min ;然后迅速通入蒸汽至汽爆罐内压力为1.3?1.7MPa，蒸汽爆破处理0.5?2.5min，得混合物；(2)将所得的混合物自然降温至常温后，加入氮化硅超微粉3?7份、甲壳素纤维4?6份、海藻酸纤维3?5份混合搅拌均勾，并通过加入水调整水分含量为总重量的64?68%，得培养基料备用。所述葛仙米冻干粉通过以下步骤制备:取50?55份葛仙米，清洗，用研磨机磨成粗粉，然后用90?95°C热水浸泡50?85min，捞出沥干后，加入10?12份常温纯净水，和匀，然后按照接种量1?1.5%的比例接种微生物发酵剂，保持温度38°C，发酵52?58小时，发酵结束后低温烘干，研磨成细粉。其中，所述微生物发酵剂的成分为:按照菌株数量比乳酸杆菌:地衣芽孢杆菌:谷氨酸棒杆菌为:1: 1.2: 2的比例配制成1.5X107菌株/ml的发酵剂。实施例1S1、采集自然野外生长的松茸，取发育完全的子实体菌盖部分，切掉菌柄，用75%的酒精棉球擦净菌盖表面，菌褶朝下用灭过菌的铁钩勾住悬挂于灭菌的三角瓶中，用无菌棉塞封口过夜，收集孢子印，用无菌水制成孢子液；S2、加入到液体培养基中进行摇菌，进行液体多孢自交，摇菌条件为:转速140r/min，培养温度为2当前第1页1 2 本文档来自技高网...

【技术保护点】
野生松茸驯化母种制备方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、采集自然野外生长的松茸，取发育完全的子实体菌盖部分，切掉菌柄，用75％的酒精棉球擦净菌盖表面，菌褶朝下用灭过菌的铁钩勾住悬挂于灭菌的三角瓶中，用无菌棉塞封口过夜，收集孢子印，用无菌水制成孢子液；S2、加入到液体培养基中进行摇菌，进行液体多孢自交，摇菌条件为：转速140r/min，培养温度为25℃，得松茸混合菌丝液；S3、将所得的松茸混合菌丝液在洁净室接种于栽培瓶的培养料上，用透气盖封口，并置于14～15℃的培养室内暗培养25～30d，在2～6d时，进行超声波水浴培养，超声波的频率和功率分别设定为68kHz和600W，超声波处理时间为10min～90min，超声间歇比为20s/5s～30s/5s；S4、待菌丝长满栽培瓶后，感染处理松茸的优势伴生树种，浇水900ml～1000ml，盖好覆盖物，人工驯化，即可得到稳定性强，可用于繁殖生产的松茸母种。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘晓红，王志伟，
申请(专利权)人：刘晓红，王志伟，
类型：发明
国别省市：辽宁;21